杨姝
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所更多>>
- 发文基金：云南省科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 流感H3N2疫苗纳米乳佐剂的优化及安全性被引量：1
- 2014年
- 目的 优化纳米乳新配方,并从载水量及载苗方式探讨影响佐剂效果的因素。方法 将ICR小鼠随机分为7组,每组5只,即A1、A2、A3、A4纳米乳佐剂组[A1（载水量66.7%）、A2（载水量80.0%）、A3（载水量85.7%）为成乳后加入疫苗吸附,A4（载水量80.0%）为成乳前加入疫苗包裹]：分别加入等量H3N2裂解疫苗[血凝素（hemagglutinin,HA）1.8μg];空白对照组：生理盐水;单独疫苗组：HA 1.8μg;铝佐剂组：A（lOH）30.2 mg,HA 1.8μg。均经小鼠大腿腓肠肌注射0.2 ml,0、21 d免疫,于初免后第1周开始,每周经尾动脉采血,分离血清,检测血凝抑制（haemagg-lutination inhibition,HI）效价,比较各组的免疫应答水平。以初免后1周内小鼠体重变化及最大给药量试验分析纳米乳的最大耐受量（maximal tolerance dose,MTD）。采用马尔文粒度仪检测不同载水量纳米乳粒径大小及分散系数。伪三元相图法及静置观察检测稳定性。结果 小鼠初免后第5周,单独疫苗组小鼠HI滴度与A1、A2、A3纳米乳佐剂组相比,差异有统计学意义（P〉0.05）,与A4纳米乳佐剂组相比,差异无统计学意义（P〈0.05）;A3纳米乳佐剂组于初免后第5周,HI滴度达到峰值,〉为单独疫苗组的4倍,也明显高于铝佐剂对照组和A1、A2纳米乳佐剂组（P均〉0.05）。纳米乳搭载或包裹疫苗对小鼠生长无明显影响,MTD〈25 ml/kg。纳米乳平均粒径分布均为10～100 nm左右,纳米乳A1、A2、A3粒径大小无明显差异,均匀度较好。载水范围大的纳米乳可搭载足量抗原,稳定性好。结论 载水量85.7%、以吸附方式载苗的纳米乳佐剂效果最佳,且具有良好的安全性。
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- 关键词：纳米乳佐剂流感疫苗安全性
- 精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸序列修饰对流感病毒溶瘤能力的影响
- 2022年
- 目的探讨精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列修饰对流感病毒溶瘤能力的影响。方法采用流感病毒反向遗传操作体系,将含PB2、PB1、PA、HA、NP、NA、M和NS的质粒PHW200(八质粒)及经RGD修饰的八质粒分别共转染293T细胞,拯救出野生型和重组RGD流感病毒。采用胶体金法试纸条进行鉴定,血凝试验检测病毒效价,PCR法检测病毒传代稳定性,噬斑试验检测病毒滴度。用拯救的两种流感病毒感染不同细胞(B16-F10、A549、TC-1、CT26、4T1和Vero细胞),检测细胞活力和细胞中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放率。用B16-F10细胞注射小鼠,建立小鼠黑色素瘤模型后,分别注射两种流感病毒及PBS,隔1 d给药1次,共5次,肿瘤细胞接种后19 d,测量肿瘤大小;肿瘤细胞接种后25 d,统计小鼠存活数量。结果野生型和重组RGD流感病毒经胶体金法试纸条鉴定均为阳性,血凝效价分别为1∶2^(8)和1∶2^(9),传代稳定性良好,病毒滴度分别为3×10^(7)和1.8×10^(7) PFU/mL。两种流感病毒感染后B16-F10和A549细胞活力均大幅降低,其他细胞活力变化较小;与相应野生型流感病毒组比较,重组RGD流感病毒组B16-F10细胞中LDH释放率明显升高(P<0.05),A549细胞略升高,但差异无统计学意义(P>0.05),其他细胞均较低。与PBS组比较,两种流感病毒组小鼠肿瘤大小明显减小(P<0.001),小鼠存活率明显升高(P<0.05)。结论RGD修饰的流感病毒对B16-F10具有较好的亲嗜性,且溶瘤能力增强。本研究为溶瘤流感病毒在肿瘤治疗中的应用奠定了基础。
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- 关键词：流感病毒黑色素瘤
- 纳米乳作为流感疫苗佐剂的免疫效果及安全性的初步研究被引量：2
- 2013年
- 目的研究一种纳米乳作为H3N2灭活流感疫苗佐剂的佐剂效果,并对其安全性进行评价。方法取标准体重的清洁级ICR雌性小鼠随机分组,以纳米乳作为疫苗佐剂配制H3N2流感疫苗免疫小鼠,并以相应剂量的氢氧化铝佐剂组、无佐剂疫苗组和生理盐水组作为对照。在初免后的21天,进行加强免疫1次,自初免之日起,每隔7天,尾动脉采血,分离血清,测定血凝抑制(HI)抗体效价。初免后6天内,每隔2天称量小鼠,监测小鼠体重变化,并通过最大给药量实验测定纳米乳佐剂的急性毒性,以对纳米乳佐剂的安全性进行评价。结果纳米乳佐剂疫苗组小鼠血清HI抗体效价在加强免疫后快速升高,在第6周达到最高峰,效价远大于氢氧化铝佐剂组和无佐剂疫苗组,之后,纳米乳佐剂组HI抗体效价维持在较高水平。纳米乳佐剂组小鼠体重增长正常,与其他组之间无显著性差异。通过腹腔注射,测得小鼠对纳米乳佐剂的最大耐受量>25g/kg,本纳米乳佐剂属无毒级物质。结论此纳米乳作为佐剂可以有效提升流感疫苗抗原的免疫原性,增强免疫效果,且显示出了较好的安全性,是一种良好的流感疫苗佐剂候选。
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- 关键词：纳米乳佐剂流感疫苗急性毒性
