毛春明
- 作品数：17 被引量：72H指数：6
- 供职机构：军事医学科学院生物工程研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 利用基因诱捕技术进行小鼠基因剔除的初步研究被引量：7
- 2004年
- 对利用基因诱捕技术进行小鼠基因剔除做了初步的探索 ,为进一步应用该技术进行小鼠基因功能研究奠定了基础 .利用基因诱捕载体转染小鼠ES细胞 ,获得了 36株neo基因单拷贝整合的诱捕ES细胞 ,其中 14株细胞表达有活性的 β半乳糖苷酶 .将 3株诱捕ES细胞分别经显微注射引入到受体囊胚中 ,再植入假孕母鼠的子宫中使其发育成小鼠 .两株细胞得到了程度不同的嵌合体小鼠 ,其中一株诱捕ES细胞整合至生殖系 .利用质粒拯救实验获得了诱捕载体整合位点附近的基因组序列 ,通过序列比对发现被诱捕的基因可能是一个新基因 .X gal染色结果显示 ,该基因的表达局限于小鼠腹部及肢芽的部位 .
- 谭晓红程萱毛春明陈光慧杨晓
- 关键词：基因诱捕小鼠基因剔除
- 软骨细胞特异性Smad4基因剔除导致小鼠长骨发育异常
- 骨骼的形成方式包括:膜内成骨和软骨内成骨。软骨内成骨是一个软骨组织被骨组织代替的过程,即在将要形成骨骼的部位先形成软骨组织,然后,软骨组织中央的软骨细胞发生肥大分化、凋亡,随之成骨细胞、破骨细胞、血管内皮细胞和间充质细胞...
- 张继帅郝振明谭晓红王友亮毛春明吕娅歆程萱杨晓
- 关键词：基因剔除小鼠SMAD4软骨细胞生长板
- 文献传递
- 角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立被引量：17
- 2003年
- 构建了含有角质细胞特异性角质素 5启动子、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体pK5 Cre hGH。以显微注射的方法将 4 2kb的转基因片段K5 Cre hGH引入小鼠基因组 ,共注射 72 0枚受精卵 ,其中 6 95枚移植至 2 9只假孕母鼠的输卵管中发育 ,获得子代小鼠 48只 ,经基因型鉴定有 12只小鼠在其基因组上整合有Cre基因 ,整合率为 2 5 %。将带有Cre重组酶基因的小鼠与基因组上携带loxP位点的Smad4条件基因打靶小鼠杂交以检测Cre重组酶组织特异性表达情况以及介导重组的功能。结果表明 ,K5 Cre转基因小鼠只在皮肤组织中表达Cre重组酶并能在体内成功地介导loxP位点的重组。
- 毛春明杨晓程萱吕娅歆周江黄翠芬
- 关键词：CRE转基因小鼠组织特异性
- Smads基因在皮肤创伤愈合过程中的功能研究
- 转化生长因子β是一类分泌型多肽信号分子,有调节细胞的增殖,分化,粘附,移行及凋亡的作用,Smad3基因是Smads家族中重要的受体激活型的成员,运用基因剔除的方法研究Smad3功能表明,Smad3参与免疫功能的维持,软骨...
- 毛春明
- 关键词：SMAD3SMAD4创伤愈合CRE重组酶
- 文献传递
- 角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的研制被引量：1
- 2006年
- 本研究采用转基因技术中最常用的受精卵原核显微注射法,制备角质细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠。我们将经过超排处理的供体雌鼠拉颈处死,从其输卵管壶腹部取出卵丘细胞团,用透明质酸酶消化、清洗,得到形态饱满、极体和双原核明显的受精卵培养。将构建好的包括角质细胞特异性角质素5(K5)启动子、Cre重组酶基因和人生长激素(hGH)polyA的转基因载体pK5-Cre-hGH制备成一定浓度的注射片段,通过显微注射的方法将4.2 kb的转基因片段引入小鼠受精卵的雄原核。共注射了720枚受精卵,移植至29只假孕母鼠的输卵管中发育,获得子代小鼠48只,经PCR鉴定有12只小鼠在基因组上整合有Cre基因,整合率为25%。此结果通过Southern杂交得到进一步证实。
- 程萱毛春明杨晓
- 关键词：受精卵CRE基因
- 骨关节炎相关Smad3突变基因的克隆及其初步的功能分析
- 2004年
- 以前的研究结果显示Smad3错义突变(P197N→I)可能与骨关节炎发生的病理过程有关。本研究构建了带有该点突变的Smad3cDNA的表达载体,转染Smad3基因缺失的成纤维细胞,检测细胞培养液中MMP-2的表达水平和活性变化。结果显示,转染野生型Smad3表达载体可以使Smad3基因缺失的成纤维细胞MMP-2表达活性明显降低,而转染Smad3突变体表达载体丧失对MMP-2表达活性的调节作用。本研究结果提示骨关节炎相关的Smad3突变体可能丧失对成纤维细胞表达MMP-2的抑制作用。
- 万海峰毛春明王友亮孙岩松谭晓红姚俊岩杨晓
- 关键词：骨关节炎SMAD3突变基因克隆成纤维细胞
- 炭疽芽胞杆菌感染小鼠病理学及其病理原体诊断研究
- 炭疽病(anthrax)是由炭宜芽胞杆菌(炭疽杆菌)引起的人畜共患烈性急性传染病,平时引起炭疽病在世界流行,对人类构成威胁;战时该菌又是军事大国可能使用的生物战剂,因此国内外对炭疽病的研究仍列为重要课题.有关炭疽实验病理...
- 毛春明
- 关键词：小鼠病理原位PCR
- Smad3基因缺失加快的小鼠皮肤创面收缩速度机制研究被引量：7
- 2004年
- 目的:研究Smad3基因剔除小鼠皮肤创伤愈合速度加快的机制。方法:利用不同基因型的Smad3基因剔除小鼠及对照小鼠进行皮肤缺失型创伤试验,观察组织病理变化;分离不同基因型小鼠胚胎成纤维细胞,观察其胶原收缩能力的变化。结果:Smad3基因剔除小鼠在皮肤创伤愈合时表现出重上皮化进度快;成纤维细胞胶原收缩试验中,Smad3缺失的细胞在有血清的培养条件下胶原收缩速度快于野生型细胞,而在无血清培养条件下,有无转化生长因子β1(TGF-β1)两者变化不显著。有血清培养时Smad3缺失的成纤维细胞表达α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)增加。结论:SMAD3通过抑制α平滑肌肌动蛋白在成纤维细胞中的表达调节成纤维细胞的收缩能力,以致Smad3缺失小鼠皮肤创面收缩速度加快。
- 毛春明杨晓张莉孙彦洵侯宁吕娅歆黄翠芬
- 关键词：SMAD3基因基因缺失小鼠皮肤创伤愈合
- 一种新的体外研究减轻瘢痕愈合的方法
- 本发明提供了一种利用抑制Smad3基因增强基质金属蛋白酶－2(MMP－2)的活性以减轻创伤后瘢痕愈合的方法。包括步骤：1)获得不同Smad3基因型的成纤维细胞并进行基因型鉴定；2)构建Smad3显性负效表达载体；3)通过...
- 杨晓黄翠芬毛春明吕娅歆周江
- 文献传递
- 骨关节炎患者血清中基质金属蛋白酶-2、-9的明胶酶谱分析被引量：12
- 2003年
- 为探讨基质金属蛋白酶-2、-9在骨关节炎发病中的作用,应用明胶酶谱分析方法研究其在骨关节炎患者血清中的表达水平。实验对象为27例膝骨关节炎患者,对照组为7例外伤骨折患者。结果发现病例组血清中基质金属蛋白酶-2和-9的表达水平均明显高于对照组(P<0.05)。该结果显示基质金属蛋白酶-2和-9可能在骨关节炎的发病过程中均起着重要的作用。
- 姚俊岩安靓王岩吕娅歆侯宁万海峰毛春明黄敏杨晓
- 关键词：骨关节炎血清基质金属蛋白酶明胶酶
