涂惠英
- 作品数：7 被引量：29H指数：3
- 供职机构：暨南大学第二临床医学院更多>>
- 发文基金：深圳市科技计划项目深圳市卫生局科技项目吴阶平医学基金会临床科研专项资助基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- EB病毒融合蛋白ZtaN-p23在大肠杆菌中的表达、纯化及活性鉴定被引量：5
- 2012年
- 目的:克隆EB病毒立即早期蛋白ZtaN和衣壳蛋白p23,构建原核表达载体,并在大肠杆菌中表达融合蛋白,为后续利用蛋白进行疾病诊断奠定基础。方法:采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术从B95-8细胞中分别扩增出目的基因BZLF1N和BLRF2,利用融合PCR法将两个基因进行连接,构建重组质粒pGEX-4T-1-BZLF1N-BLRF2,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。加入IPTG诱导表达融合蛋白ZtaN-p23,通过SDS-PAGE和Western blot确定蛋白表达量及活性鉴定。结果:重组质粒pGEX-4T-1-BZLF1N-BLRF2经双酶切鉴定和序列分析正确,证实已成功构建原核表达载体;SDS-PAGE显示诱导的蛋白Mr约46 000,与预期值一致;对融合蛋白表达条件进行优化后,发现其主要以包涵体的形式存在于细胞中;亲和层析结果显示纯化后的ZtaN-p23纯度>95%;Westernblot显示ZtaN-p23具有良好的生物活性。结论:成功构建原核表达载体pGEX-4T-1-BZLF1N-BLRF2,并在大肠杆菌中进行了表达纯化,融合蛋白显示出良好的活性。
- 张毅周淑艳孙业红涂惠英涂惠英陈锐秦晓林
- 关键词：EB病毒纯化
- microR-146a、microR-29a在新生大鼠急性肺损伤中的动态表达被引量：4
- 2014年
- 目的 观察脂多糖（LPS）诱导的新生大鼠急性肺损伤（ALI）肺组织中 microRNA（miR）-146a、miR-29a的动态表达变化，探讨其对ALI的作用。方法 选取7 d龄新生 SD 大鼠80只，简单随机法分为LPS组和对照组。LPS组大鼠腹腔注射内毒素（5 mg/kg）建立新生大鼠 ALI模型；对照组大鼠腹腔注射9 g/L盐水0.1 mL。分别于6 h、1 d、3 d、7 d留取新生大鼠肺组织及血清标本，观察肺组织病理变化，酶联免疫吸附试验测定血清中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的变化，反转录-聚合酶链反应法检测肺组织中 miR-146a和 miR-29a的相对表达量。结果 苏木精-伊红染色显示 LPS组大鼠肺组织呈ALI表现，血清中 TNF-α 和肺组织中 miR-146a的表达水平较对照组呈高表达趋势（P 〈0.05），miR-29a较对照组呈低表达趋势（P 〈0.05）。结论 miR-146a和miR-29a的差异性表达在ALI中有重要作用，其关键靶点可能为临床早期诊治ALI及新药的研发提供新的标靶。
- 陈丽吴本清陈文清程涵蓉涂惠英易晓利戎荣燕旭东
- 关键词：急性肺损伤
- 人脐带间充质干细胞对新生大鼠肺纤维化细胞因子水平的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨人脐带间充质干细胞(hUCMSCs)对新生大鼠肺纤维化细胞因子水平的影响,为慢性肺部疾病临床防治提供新思路。方法 32只新生SD大鼠随机分4组(n=8):磷酸盐缓冲液(PBS)对照组(Ⅰ组)、hUCMSCs组(Ⅱ组)、博莱霉素对照组(Ⅲ组)、博莱霉素+hUCMSCs组(Ⅳ组)。Ⅲ、Ⅳ组用博莱霉素腹腔注射5mg/kg×5 d,进行肺纤维化造模。同时Ⅰ、Ⅱ组予等体积PBS腹腔注射。Ⅱ、Ⅳ组在新生鼠7 d腹腔注射(1×106)hUCMSCs,Ⅰ、Ⅲ组注射等体积PBS。30 d取时大鼠肺组织行HE染色,辐射状肺泡计数(RAC),羟脯氨酸(HYP)含量测定,荧光定量PCR测定细胞因子TNF-α、IL-6、IL-13、角化生长因子(KGF)的mRNA表达水平。结果Ⅲ组肺泡呈发育不良,肺纤维化改变,HYP升高,各细胞因子mRNA水平升高,RAC减少。Ⅳ组病理损伤程度减轻,HYP降低,RAC增加,KGF mRNA表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ、Ⅱ组未见明显病理改变,HYP、RAC和各细胞因子mRNA水平差异无统计学意义(P>0.05)。结论 hUCMSCs具有拮抗肺纤维化作用,其机制可能部分通过旁分泌KGF,保护正常肺发育而实现的。hUCMSCs调节肺内促炎因子(TNF-α、IL-6)/抗炎因子(IL-13)间的平衡在炎症晚期不是主要保护机制。
- 陈丽吴本清吴本清涂惠英程涵蓉丁璐
- 关键词：人脐带间充质干细胞慢性肺部疾病肺纤维化细胞因子细胞治疗
- 内毒素制备新生SD大鼠急性肺损伤疾病模型
- 贺务实涂惠英吴本清陈丽丁璐
- 关键词：急性肺损伤动物模型内毒素新生SD大鼠
- 博莱霉素制备新生SD大鼠慢性肺部疾病模型被引量：2
- 2012年
- 目的探索合适剂量的博莱霉素(BLM)腹腔注射导致新生SD大鼠肺发育不良,肺间质纤维化,建立一种新的慢性肺部疾病(CLD)动物模型。方法 30只2日龄新生SD大鼠随机分为3组,每组10只,分别予BLM 5.0、7.5 mg/(kg.d)及等体积生理盐水连续5 d腹腔注射,分别于第14、30天各处死5只。观察新生大鼠的存活状况,肺组织病理改变、Masson染色和羟脯氨酸(HYP)含量的变化。结果给予5.0 mg/kg BLM后大鼠可存活4周以上,肺组织病理主要为小肺泡数量减少,肺间隔增厚,Masson染色可见肺间隔有较多蓝色胶原沉积,HYP增加等肺发育不良、肺纤维化的表现;7.5 mg/kg BLM注射后大鼠陆续死亡,肺组织病理为肺泡出血,肺结构紊乱;等体积生理盐水注射大鼠存活状况良好,肺组织未见有病理改变。结论新生SD大鼠用BLM 5.0 mg/kg连续5d腹腔注射,可成功制备CLD模型。
- 陈丽吴本清吴本清程涵蓉涂惠英黄进洁
- 关键词：慢性肺部疾病动物模型博莱霉素新生SD大鼠
- 乌司他丁联合胸腺肽α1治疗对脓毒症患者疗效的荟萃分析被引量：16
- 2012年
- 目的评价乌司他丁（UTI）联合胸腺肽仅，对脓毒症患者免疫状态和疗效、预后的影响。方法通过关键词、主题词、引文追溯等途径检索PubMed、Elsevier-SDOL、Embase、Cochrane Library、万方医学期刊库和中国学术期刊全文数据库，检索2000年至2011年关于UTI联合胸腺肽d，治疗对脓毒症患者疗效的随机对照研究（RCT），提取入选文献资料并总结分析。结果最终纳入10个RCT，共1131例患者，Meta分析表明，与常规重症监护病房（ICU）治疗比较，UTI联合胸腺肽d．能显著降低患者28d急性生理学与慢性健康状况评分系统II（APACHEII）评分[加权均数差值（WMD）=-3．72，95％可信区间（95％CI）-5．52- -1．92，P〈0．0001）]，提高28d人白细胞DR抗原／CD14＋（HLA—DR／CD14＋）表达率（WMD=14．02，95％C／11．05。16．99，P〈0．00001），降低28d白细胞介素-6（IL-6）水平（WMD=-10．83，95％CI-14．14～-7．51，P〈0．00001），而28dIL-10水平无差异（WMD=1．25，95％CI-1．08～3．59，P=0．29），同时缩短ICU住院期间机械通气时间（WMD=-4．00．95％CI-4．65- -3．34，P〈0．00001）及28d病死率（合并优势比（0四）=0．48，95％CI0．36～0．63，P〈0．00001），而ICU住院时间无差异（WMD=-1．10，95％CI-2．81～0．60，P=0．21]。结论UTI联合胸腺肽仅．治疗能改善脓毒症患者免疫状态，修复促炎／抗炎失衡，降低APACHE1I评分，缩短ICU住院期间机械通气时间，降低28d病死率。
- 陈子盛傅应云林少雄刘盛国何正强涂惠英李伟
- 关键词：乌司他丁胸腺肽脓毒症META分析
- 新生儿B族链球菌败血症合并化脓性脑膜炎5例临床分析
- 陈丽吴本清程涵蓉唐沂吴俊燕旭东涂惠英
- 关键词：新生儿化脓性脑膜炎
