孙蕾 作品数:14 被引量:14 H指数:3 供职机构: 军事医学科学院基础医学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
登革2型病毒E基因的克隆及碱基序列测定 1996年 采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增了我国登革2型病毒E基因,大小为1.29kb.将扩增的E基因片段首先克隆到T载体(pBluescriptⅡKS+)中,用PCR和限制性酶切分析鉴定出阳性重组子.然后利用M13通用引物直接对插入的E基因片段进行序列分析.结果表明,经限制性内切酶鉴定和DNA序列分析证明所克隆的序列与已报道的E基因序列是一致的. 于曼 秦鄂德 杨佩英 孙蕾 徐品芳 司炳银 闫国珍关键词:登革2型病毒 碱基 化学保护与化学敏感 1998年 化学保护和化学敏感是基因治疗与化学治疗相结合的一种新的肿瘤治疗技术。本文就化学保护和化学敏感的基本策略,几种抗药基因和药物敏感基因。 孙蕾 王会信 周廷冲关键词:肿瘤 基因治疗 药物疗法 我国登革2型病毒E基因的克隆与表达研究 被引量:3 1996年 以我国登革2号病毒43(D2-43)株RNA为模板,采用RT-PCR技术扩增了E基因。扩增的cDNA片段约1290bp,与预期大小相一致,经HindⅢ酶切鉴定和Southern印迹杂交证实了E基因片段的特异性。将E基因的扩增片段首先克隆到pBluescriptⅡKS^+质粒DNA中,利用重组子中载体的酶切位点,将该基因片段再克隆到高效表达载体pBV220中。 于曼 秦鄂德 杨佩英 孙蕾 徐品芳 司炳银关键词:登革热病毒 E基因 DNA扩量 基因表达 Fas和β-雌二醇受体融合基因在COS-7细胞中的表达 被引量:1 1999年 设计三条引物P1、P2、P3扩增全长hFas基因和只含有跨膜区和胞浆区的mFas基因。P2上设计一个BstXI位点,以与hFas信号肽之后的单酶切位点BstXI连接,获得带信号肽的跨膜区和胞浆区SpmFas基因。另外设计两条引物P4、P5扩增人β-雌二醇受体的激素结合结构域。扩增基因均经DNA序列分析得到证实。Ρ3、P4均设计了KpnI位点,用于两基因融合,并将此融合基因插入真核表达载体pcDNA3。脂质体法转入COS-7细胞进行瞬时表达,WesternBlot检测到约57KDa的表达产物,与融合基因的估算分子量相符。 孙蕾 王会信 周廷冲关键词:融合基因 转染 COS-7细胞 肿瘤细胞 细胞凋亡 哺乳类细胞基因表达系统 被引量:1 1998年 真核基因的转录和转译调控是哺乳类细胞基因表达系统建立和发展的基础,外源基因的表达水平不仅决定于启动子/增强子的强弱,还与剪接信号、终止信号和poly(A)信号以及质粒的拷贝数等因素有关。另外,在基因治疗的研究中,也已寻找到多种具有组织或肿瘤特异性的启动子,来达到特异性肿瘤基因治疗的目的。 孙蕾 王会信关键词:质粒拷贝数 登革热的免疫预防与诊治的基础研究 1998年 登革热是由登革病毒引起经蚊媒传播的急性传染病。该病传播快,发病率高,是我国南方重要的病毒性传染病。而且登革病毒也是重要的生物战剂,它包括4个血清型,抗原复杂。至今尚无安全有效的防治措施。 秦鄂德 于曼 杨佩英 韩照中 司炳银 徐品芳 孙蕾关键词:登革热 登革病毒 免疫预防 急性传染病 病毒性传染病 生物战剂 人CD14基因的克隆及序列测定 被引量:6 1998年 采用PCR技术,从佛波酯乙醇刺激的HL60细胞基因组DNA中扩增获得了11kb的人CD14基因.序列分析表明,有四个碱基发生了突变,其中两处为首次报道. 龙建银 薛沿宁 孙蕾 王会信关键词:CD14 脂多糖 基因克隆 鞘磷脂与细胞生长、凋亡调控 被引量:3 1998年 鞘脂分子包括鞘磷脂(sphingomyelin)和鞘糖脂(glycosphingolipid)两大类。它们不仅是维持细胞膜结构的重要组分,而且它们的代谢产物参与了细胞的生长、分化和凋亡等重要生理活动。1-磷酸鞘氨醇(SPP)和神经酰胺(ceramide)是两类重要的代谢产物,它们通过活化或抑制蛋白激酶、磷酸酶、离子通道,传递细胞生长和凋亡的信号。在细胞内,它们的作用是拮抗的,细胞的生与死往往取决于哪一种作用占了主导地位。本文就鞘磷脂的结构与代谢。 孙蕾 王会信 周廷冲关键词:鞘磷脂 神经酰胺 细胞生长 细胞凋亡 人胶质瘤细胞的激素诱导型细胞凋亡 1999年 目的:利用β-雌二醇受体的性质,构建Fas与β-雌二醇受体融合基因,使转染该融合基因的胶质瘤细胞能在激素的诱导下发生凋亡.方法:利用PCR技术及基因重组手段,将人Fas基因的跨膜区、胞内区和人β-雌二醇受体的激素结合结构域基因片断融合,并插入高效真核表达载体peDNA3.脂质体法转染人胶质瘤细胞BT325.结果:加入G4186周后筛选出的转化细胞,经Westem blot检测证明,该融合基因在BT325细胞中得到较高表达.MTT法检测表明,在培养基中加入一定浓度的β-雌二醇.可有效地杀死转化细胞,IC_(50)为10^(-9)mol/L DNA Ladder检测进一步证明,转化细胞被诱导发生凋亡.结论:Fas与β-雌二醇受体融合基因转染的胶质瘤细胞,其调亡严格受激素调控. 孙蕾 王会信 郑莉 王芳 刘农乐关键词:细胞凋亡 胶质瘤细胞 激素诱导 登革2型病毒43株prM基因在痘苗中的克隆与表达 孙蕾