秦鄂德
- 作品数：272 被引量：785H指数：14
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学轻工技术与工程更多>>
- 一种重组乙型脑炎病毒及其应用
- 本发明公开了一种重组乙型脑炎病毒及其应用。本发明提供了一种蛋白质，是将序列表的序列3所示蛋白质自N末端第218位氨基酸残基由极性氨基酸突变为非极性氨基酸后得到的蛋白质。本发明还保护编码所述蛋白质的基因、含有所述基因的重组...
- 秦成峰史佩勇李世华李晓峰赵慧秦鄂德
- 文献传递
- 4株SARS冠状病毒中国分离株3′非编码区的序列测定及分析被引量：8
- 2003年
- 分别对 4株SARS冠状病毒中国株基因组 3′非编码区序列进行测定和分析 ,然后应用Blast、DNAstarGeneQuest等软件对中国株的这段序列与其它SARS和非SARS冠状病毒的序列进行比较 .结果显示 ,所测 4株SARS冠状病毒中国分离株的 3′非编码区长度均为 339nt,与其它已测序SARS冠状病毒的相应序列完全一致 .SARS冠状病毒的非编码区含有冠状病毒保守的“伪结”结构 .在距末端 138nt处还存在 1个长约 32nt的Ⅱ型茎 环结构的序列 ,该序列在其它已知人冠状病毒中并不存在 ,而与禽传染性支气管炎病毒和星状病毒中的对应序列高度同源 .
- 范宝昌姜涛于曼邓永强彭文明常国辉司炳银刘伯华杨保安祝庆余秦鄂德
- 关键词：SARS冠状病毒中国分离株重症急性呼吸综合征非典型肺炎
- 我国登革2/4型病毒株Pr-M-E基因的双表达质粒构建及在真核细胞中的共表达被引量：8
- 2003年
- 将我国登革 2、4型病毒分离株PrM E基因通过RT PCR以病毒RNA为模板扩增我国登革 2型 4 3株和 4型B5株的PrM E基因 .并分别克隆至pGEM TEasy载体 ,然后亚克隆至双顺反子表达质粒的两个多克隆位点 ,获得同时含有登革 2型 4 3株和 4型B5株PrM E基因的双顺反子重组表达质粒pIDME2 4 .在用该重组质粒转染的BHK2 1细胞中 ,不但可检测到PrM E基因的转录产物 ,而且采用间接免疫荧光法还可观察到针对登革 2型 4型病毒的特异荧光 .研究结果表明 ,重组的双顺反子表达质粒在真核细胞中可共表达登革两个血清型PrM E基因 。
- 姜涛于曼范宝昌陈水平段鸿元邓永强彭文明祝庆余秦鄂德
- 关键词：登革病毒真核细胞
- 应用长链RT-PCR法扩增我国登革2型病毒全长cDNA
- 作者通过优化反应液组成及热循条件,采用RT-PCR法成功实现了登革病毒基因组全长cDNA分子的扩增,为进一步构建全长cDNA克隆打下了基础.
- 范宝昌赵卫胡志君杨佩英陈水平于曼秦鄂德
- 关键词：登革病毒
- 文献传递
- 登革2型病毒中国株3′非编码区RNA元件对翻译的影响被引量：2
- 2008年
- 【目的】探讨登革病毒(dengue virus,DEN)3′非编码区(untranslated region,UTR)RNA元件(VR、RCS2、CS2、CS1和SL)对基因组翻译的影响。【方法】首先构建登革2型病毒中国株(DEN2-43)UTR与萤火虫荧光素酶基因(LUC)组成的病毒诱导报告基因(virus induced reporter gene,VIRG),在此基础上分别构建包含DEN2-433′UTR不同RNA元件的VIRG,并通过LUC检测、实时RT-PCR和Western blot方法分析含有不同元件VIRG对翻译效率的影响。【结果】发现完整的3′UTR缺失可显著抑制翻译,含有病毒VR元件VIRG的翻译水平与完整3′UTR的VIRG相似,RCS2或CS2元件可提高VIRG的翻译效率,CS1或SL元件可降低VIRG的翻译效率。【结论】DEN2-43病毒基因组3′UTR参与了报告基因的翻译,其不同元件具有可上调和下调报告基因翻译效率的作用。
- 尉雁姜涛李晓峰赵慧刘忠钰邓永强刘然秦成峰秦鄂德
- 关键词：登革病毒翻译调控
- 登革病毒衣壳蛋白缺失对病毒毒力以及免疫原性的影响
- 登革病毒为有包膜的单股正链 RNA 病毒,为黄病毒属重要成员。其主要的结构蛋白—衣壳蛋白 C 位于病毒颗粒内部,与基因组 RNA 构成病毒核衣壳,在病毒 RNA 衣壳化以及病毒颗粒组装过程中起重要作用。
- 姜涛朱武洋陈水平秦成峰韩剑锋邓永强于曼秦鄂德
- 文献传递
- 我国登革2型病毒株E蛋白B抗原区基因的表达与鉴定被引量：2
- 1999年
- 目的和方法：通过对登革２型病毒Ｅ蛋白Ｂ区基因片段的表达，研究Ｂ区蛋白的抗原性。首先采用ＰＣＲ方法扩增了编码Ｂ区蛋白的基因片段，并将其插入到ｐＭａｌ－Ｃ２原核载体进行融合表达。采用蛋白质印迹法和ＥＬＩＳＡ法对表达产物进行特异性鉴定。结果与结论：在构建的重组质粒Ｂ１６５－ｐＭａｌ中，Ｅ蛋白Ｂ区与大肠杆菌的麦芽糖结合蛋白（ｍａｌｔｏｓｅｂｉｎｄｉｎｇｐｒｏｔｅｉｎ，ＭＢＰ）基因以融合形式高效表达。该融合蛋白可与登革１～４型病毒的鼠腹水抗体起特异反应，表明我国登革２型病毒株Ｅ蛋白Ｂ区具有黄病毒亚组反应性表位。
- 仝莉莉秦鄂德李同据杨佩英于曼
- 关键词：登革热病毒基因表达ELISA
- 两种甲病毒基因组序列的一步RT-PCR检测被引量：2
- 2003年
- 目的 通过对不同扩增条件的优化 ,建立两种马脑炎病毒的快速RT -PCR检测方法。方法 根据东部马脑炎病毒和西部马脑炎病毒基因组相应序列设计引物 ,然后采用两步法及两种一步法分别对其基因组序列进行RT -PCR扩增 ,并用琼脂糖凝胶电泳进行观察。结果与结论 三种方法均可从两种马脑炎病毒感染的乳鼠脑和细胞上清中扩增出单一的DNA片段 ,其大小与预期的相一致。与其他两种方法相比 ,本研究所建立的一步法更为简便快速、价格低廉 ,为进一步组装这些病毒的检测试剂盒奠定了基础。
- 邓永强于曼秦鄂德范宝昌杨保安司炳银祝庆余
- 关键词：甲病毒基因组序列脑炎病毒
- 登革2型病毒NS3基因的扩增及序列测定
- 1999年
- 采用热酚法从登革２ 型病毒４３ 株（Ｄ２４３） 感染的Ｃ６／３６ 细胞中提取了病毒ＲＮＡ，以病毒ＲＮＡ 为模板，进行Ｄ２４３ 株ＮＳ３ 基因ｃＤＮＡ 片段的反转录ＰＣＲ 扩增，片段长度为１１７６ ｂｐ。将扩增的ｃＤＮＡ 片段克隆到Ｔ 载体ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔｋｓⅡ（ ＋ ） 中。通过双脱氧法测定了ｃＤＮＡ片段序列，与国际标准株ＮＧＣ株序列一致。
- 袁志宏杨佩英伊纯德秦鄂德
- 登革2型病毒衣壳蛋白在哺乳动物细胞中的表达与鉴定
- 2005年
- 从构建的重组质粒pLEX-C中高保真PCR获得编码登革2型病毒43株C基因(D2C)的DNA片段,通过基因重组的方法将其克隆入真核表达载体pcDNA6/V5-His获得了重组真核表达载体pc/D2C。经电穿孔的方法转染BHK21细胞后,分别通过RT-PCR、免疫荧光和Western印迹鉴定表达的蛋白。结果重组蛋白在BHK21细胞中获得表达,表达的蛋白主要存在于胞浆中,并具有较好的抗原性,能够被抗登革病毒衣壳蛋白单克隆抗体特异识别。此研究为深入了解登革病毒衣壳蛋白在病毒复制及组装过程中的生物学功能奠定了基础。
- 秦成峰秦鄂德
- 关键词：登革病毒衣壳蛋白真核表达
