公共文化服务平台

孟宪敏: 作品数：74 被引量：306H指数：9; 供职机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金“九五”国家科技攻关计划国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学机械工程经济管理更多>>

合作作者

凝胶内长片段基因克隆的实验方法研究: 2018年; 目的量少、片段长的目的基因受纯化回收效率低的影响而难于克隆,本实验的目的是探索快速高效克隆量少,片段长DNA的实验方法。方法以lnc RNA AL110200 5’RACE大片段PCR产物为目的基因,应用高纯度、高分辨率的低熔点琼脂糖,分离得到含5.0 kb和2.0 kb的凝胶,直接用于连接和转化反应,通过克隆PCR和Sanger测序法鉴定克隆的正确性。结果经测序验证了5.0 kb和2.0 kb重组克隆的正确性,说明应用高纯度的低熔点琼脂糖凝胶可以快速克隆长达5.0kb基因片段。结论该方法是一种省时、高效、易行的长片段基因克隆方法。; 宋莉刘鲁滨孙莹莹肖宁宋燕张银辉孟宪敏陈敬洲; 关键词：基因克隆

反义凝血酶受体和p21双基因共表达对损伤的大鼠颈总动脉的影响: 2001年; 目的 :观察反义凝血酶受体 (ATR)和 p2 1双基因治疗对WKY大鼠颈总动脉损伤后新生内膜的抑制效果 ,探寻基因治疗再狭窄的有效途径。　　方法 :将 42只雄性WKY大鼠随机分成基因治疗组 (导入rAAV/AP组 ,n =18)、载体对照组 (导入rAAV/GFP组 ,n =18)和正常对照组 (n =6 )。构建含有ATR和 p2 1双基因及含有绿色荧光蛋白 (GFP)基因的腺病毒伴随病毒(AAV)载体pSNAV/AP和 pSNAV/GFP ,用重组单纯疱疹病毒 (rHSV )生产体系包装重组腺病毒伴随病毒 (rAAV ) :rAAV/AP和rAAV/GFP。将rAAV/AP或rAAV /GFP导入拉伤的WKY大鼠的颈总动脉。分别于术后 2、 4、 6周取材 ,用半定量—逆转录多聚酶链反应和免疫组织化学方法检测凝血酶受体 (TR)和 p2 1在动脉壁中的表达。图像分析和统计学检验双基因的疗效。　　结果 :逆转录多聚酶链反应和免疫组织化学结果显示外源基因已导入血管壁的新生内膜和中膜并获得稳定表达。图像和统计学分析说明 :基因治疗后 2、 4和 6周 ,双基因治疗组 ( p2 1和ATR)的颈总动脉内膜厚度分别较载体对照组组内膜减少 5 9 2 %、 5 8 7%、 6 4 1%;中膜厚度分别减低 7 8%、 10 8%、 8 3%;中膜细胞密度减低 30 0 %、2 9 4 %、 2 6 2 %。　　结论 :ATR和p2; 米立国孟宪敏赵秀文刘冬青王学礼吴小兵丁金凤; 关键词：P21 基因治疗重组腺病毒血管成形术

人细胞骨架调节蛋白基因Nelin N端片段的原核表达被引量：2: 2003年; [目的 ]构建Nelin基因N端片段的原核表达载体并表达此蛋白 .[方法 ]设计带有BamHI/EcoRI酶切位点的引物 ,以已构建好的质粒pGEX 5X Nelin为模板 ,用PCR扩增Nelin基因N端片段 ,并用BamHI/EcoRI酶切PCR产物和原核表达载体 pGEX 5X 1,然后用T4DNA连接酶将其连接 ,得到重组表达质粒 pGEX 5X Nelin 1,经双酶切鉴定和测序验证 .重组表达质粒转化大肠杆菌BL 2 1,用异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导 ,以SDS PAGE进行分析 .[结果 ]成功构建并表达了分子量约为 43KD的NelinN端片段的融合蛋白 .[结论 ]所表达的蛋白为蛋白纯化。; 尤昕曹慧青时娜王震赵秀文丁金凤孟宪敏; 关键词：基因表达原核表达抗体

猪急性心肌梗死再灌注后氧化应激损伤及通心络的保护作用被引量：34: 2010年; 目的:评价猪急性心肌梗死(AMI)再灌注后氧化应激损伤在心肌无再流中的作用以及中药通心络的保护作用和机制。方法:中华小型猪30只,随机分成假手术组、模型组、小剂量(0.05g·kg-1.d-1)、中剂量(0.2g·kg-1.d-1)和大剂量(0.5g·kg-1.d-1)通心络治疗组,每组6只。冠状动脉阻断3h,再灌注1h建立AMI再灌注模型。测定并对比AMI前、后3h和再灌注后1h血清及再灌注后正常、再灌注和无再流区心肌组织中氧化应激指标总抗氧化能力(T-AOC)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量的变化。结果:(1)与假手术组相比,模型组冠脉结扎3h,血T-AOC、T-SOD和GSH含量均显著降低(均P<0.01),而MDA含量显著增加(P<0.01),再灌注后,上述指标降低和升高更显著(均P<0.01)。(2)与假手术组和正常区心肌组织相比,模型组再灌注区心肌T-AOC、T-SOD和GSH含量均显著降低(均P<0.01),MDA含量则显著升高(P<0.01),而无再流区上述指标降低和升高比再灌注区更显著(均P<0.01)。(3)与模型组相比,中剂量通心络能显著提高AMI3h血T-AOC、T-SOD含量,降低MDA含量(均P<0.05),并显著提高再灌注1h血T-SOD含量(P<0.05);大剂量通心络能显著提高AMI3h和再灌注1h血T-AOC、T-SOD含量,抑制MDA生成(均P<0.05)。(4)中剂量通心络仅能显著提高再灌注区T-AOC含量(P<0.05),降低MDA含量(P<0.05);而大剂量则显著增加再灌注区T-AOC、T-SOD和GSH含量(均P<0.05),抑制MDA的合成(P<0.01),并显著增加无再流区T-AOC和T-SOD含量(均P<0.05),降低MDA的含量(P<0.01)。结论:机体抗氧化防御功能降低和心肌局部氧化还原稳态失衡,可能是AMI再灌注后无再流发生的重要机制。中药通心络可能通过提高机体抗氧化防御能力,抑制心肌局部的氧化损伤,起到了减少无再流的作用。; 段炼杨跃进张海涛程宇彤康晟赵京林孟亮田毅叶珏孟宪敏; 关键词：通心络氧化性应激无再流心肌梗死

通心络预给药2小时对猪急性心肌梗死再灌注后心肌微血管内皮结构完整和无再流的保护作用: 目的：评价冠脉再通前2 h给予不同剂量通心络对猪急性心肌梗死(AMI)缺血再灌注后心肌微血管结构完整和无再流变化的疗效。<br>　　方法：中华小型猪40只,分成假手术组、AMI对照组、通心络治疗组：小剂量(0...; 张海涛叶珏孟宪敏杨跃进吴以岭程宇彤康晟赵京林孟亮田毅张燕婉; 关键词：心肌梗死实验药理

探索实验室生物安全管理的有效途径被引量：5: 2010年; 实验室生物安全管理是实验室从业人员以及管理人员都在探讨的一个持久性的话题^[1-4]。在2003年抗击SARS、2008年北京奥运会、2009年国庆60周年庆典，以及预防甲型H1N1流感期间，实验室生物安全管理问题都被提到了空前的高度。北京市卫生局曾多次下发文件，要求在京单位各实验室要加强管理，避免实验室生物安全事件的发生。; 曹也丁孟宪敏丑承璋朱曼路; 关键词：实验室生物安全生物安全管理抗击SARS 北京奥运会 H1N1

论实验室仪器设备的管理被引量：4: 2007年; 仪器设备的管理是实验室的重点工作内容之一,如何进行管理,不同实验室有自己独特的方式。本文仅就如何对仪器设备进行分类管理进行了初探。; 叶珏刘冬青时娜宋莉王来元孟宪敏; 关键词：分类表

专科医院科研平台的建设与管理被引量：6: 2006年; 中国医学科学院阜外心血管病医院是集医疗、教学、科研于一身的心血管病专科医院。根据院所发展目标和科研体制改革方案，本着安全、科学、规范、和谐的原则组建了我院的科研平台-中心实验室。在以人为本的理念指导下，探索合理的管理模式，使中心实验室在科学研究、人才培养中发挥双重作用，成为连接临床与基础的桥梁。; 孟宪敏时娜刘冬青王来元曹也丁

瑞苏伐他汀不同给药方式对猪心肌缺血再灌注后无再流及血管内皮结构和功能的影响: 2009年; 目的对比瑞苏伐他汀单次及多次给药对猪心肌缺血再灌注后无再流及血管内皮结构和功能的影响。方法19只中华小型猪分为安慰剂组、瑞苏伐他汀单次及多次给药组。开胸冠状动脉结扎1.5 h,松解3 h制备急性心肌梗死再灌注模型。术中监测动脉血压、心室压、心率及冠脉血流量。手术结束前经左房、室分别注射硫磺素S、伊文思蓝染料鉴别无再流、缺血区域。心肌组织以红四氮唑染色,用面积求积法测定心肌的缺血、梗死及无再流面积。以比色法测定再流区及无再流区心肌组织中的固有型一氧化氮合酶(cNOS)活性,并以免疫印迹法测定血管内皮钙黏附分子(VE-cadherin)含量。结果各组缺血前血压和心率的乘积无统计学差异;再灌注180 m in时瑞苏伐他汀多次给药组冠脉血流量明显高于安慰剂组和单次给药组(P<0.05);瑞苏伐他汀多次给药组梗死区面积与心肌缺血面积的百分比值、无再流面积与心肌缺血面积的百分比值、心肌再流区、无再流区cNOS活性与安慰剂组比较均有统计学差异(P<0.05)。瑞苏伐他汀多次给药组无再流区VE-cadherin含量明显高于安慰剂和单次给药组。结论在急性心肌梗死急性期,瑞苏伐他汀可以减轻心肌缺血再灌注损伤,但给药方式会影响其疗效。; 程宇彤罗富良张海涛钱海燕赵京林孟宪敏杨跃进; 关键词：他汀

CD/TK单、双自杀基因重组腺病毒的制备及初步应用被引量：1: 2002年; 为制备表达大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶 (cytosinedeaminase ,CD)和单纯疱疹病毒 1 胸苷激酶(herpessimplexvirustype 1thymidinekinase ,TK)双自杀基因的重组腺病毒载体 ,为再狭窄基因治疗的应用奠定基础 ,首先构建了含单、双自杀基因的腺病毒穿梭载体 ,细菌内同源重组法获得重组腺病毒质粒 .脂质体介导下转染 2 93细胞进行包装并大量扩增得到Ad TK、Ad CD、Ad TK CD、Ad LacZ 4种重组腺病毒 .氯化铯 (CsCl)梯度离心法纯化后利用报告基因绿色荧光蛋白 (GFP)测定病毒滴度 ,可达 10 9pfu ml .PCR和Western印迹法对外源基因进行鉴定 ,证明单、双自杀基因均已整合入腺病毒基因组并表达 .重组腺病毒感染血管平滑肌细胞后 ,用MTT法比较了单、双自杀基因的杀伤作用 ,发现在感染复数≤ 2 0时 ,双自杀基因对细胞的抑制作用明显高于单基因 .成功地构建腺病毒双自杀基因共表达载体 ,为进一步的体内外实验奠定了基础 .; 曹慧青赵勇孟宪敏赵秀文刘冬青丁金凤; 关键词：双基因共表达自杀基因重组腺病毒

孟宪敏

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

孟宪敏

合作作者

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈