张玉稚
- 作品数：19 被引量：33H指数：4
- 供职机构：美国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中美新发和再发传染病合作项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Rett综合征患儿甲基化CpG结合蛋白2基因和细胞周期依赖性激酶样5蛋白基因的突变被引量：1
- 2009年
- 目的了解Rett综合征（RTT）患儿甲基化CpG结合蛋白2基因（MECP2）和细胞周期依赖性激酶样5蛋白基因（CDKL5）突变及热点突变，建立适合临床诊断的检测方法和策略。方法对1987至2007年北京大学第一医院儿科神经专业组诊断的177例散发RTT患儿抽取外周抗凝血提取DNA，用PCR—DNA测序方法对MECP2的全部外显子进行突变筛查，如未发现突变，用多重连接依赖的探针扩增（MLPA）法进行基因剂量分析。对MECP2未发现突变的患儿用变性高效液相色谱法（DHPLC）进行CDKL5突变筛查。结果在177例患儿中发现145例MECP2突变，1例CDKL5突变，总的突变率82％。MECP2突变中错义突变频率最高（39％）；其后依次为无义（28％）、移码（17％）和大片段缺失突变（14％）。所有突变中8种最常见突变依次为P．T158M（13％）、pR168X（12％）、c．806delG（7％）、p.R255X（6％）、p.R270X和p.R133C各（5％）、p.R306C（4％）、p.R106W（3％）。11％的患儿存在一个或多个外显子的缺失。结论中国R1T患儿MECP2突变谱和国外报道相似，有热点突变。c．806delG是中国人群特有的一个热点突变。
- 李美蓉潘虹包新华朱兴旺曹广娜张玉稚吴希如
- 关键词：RETT综合征细胞周期蛋白质依赖激酶类突变
- RNA干扰技术及其在神经科学研究中的应用被引量：1
- 2003年
- RNA干扰 (RNAi)是指生物体内由双链RNA介导同源序列mRNA的特异性降解 ,从而导致基因沉默的现象。近年来 ,随着对RNAi研究的不断深入 ,其作用机制正在逐步被阐明 ;同时作为阻断基因表达的新手段 ,RNAi技术也日趋完善和成熟。以其高效性和特异性 ,RNAi为反向遗传学在神经科学研究中的应用提供了有力的工具。本文仅就RNAi技术的有关研究进展及其在神经科学研究中的应用作一概述。
- 王汉森张玉稚潘虹吴希如
- 关键词：RNA干扰技术神经元神经科学反向遗传学
- 大鼠Mecp2-shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定
- 甲基化CpG结合蛋白2(MeCP2)是特异与甲基化DNA结合的转录抑制因子,在神经发育性遗传病 Rett综合征存在该基因突变,一些其它的神经系统疾病也有MECP2突变,但MeCP2,在神经系统的作用及其调控的靶基因目前尚...
- 金婧包新华潘虹张玉稚吴希如
- 文献传递
- 大鼠Mecp_2基因的RNA干扰有效序列筛选
- 2006年
- 目的：以RNAi技术寻找抑制大鼠Mecp2基因表达的有效序列。方法：首先构建大鼠Mecp2基因与红色荧光蛋白（RFP）的融合基因表达质粒，然后分别与针对大鼠Mecp2基因的4个备选小干扰RNA（siRNA，small interference RNA）共转染HEK293T细胞，构成外源基因系统，以此对于4个备选的siRNA对大鼠Mecp2基因的抑制有效性进行筛选。然后将筛选到的有效序列siRNA转染自身表达大鼠Mecp2基因的PC12细胞，以免疫荧光染色显示大鼠Mecp2蛋白的表达情况，通过内源大鼠Mecp2基因表达被抑制的情况验证所筛选序列的RNA干扰有效性。结果：针对大鼠Mecp2基因mRNA918—936位核苷酸的siRNA（序列：5＇-GCUGUGAAGGAAUCUUCUA-3’）是对大鼠Mecp2基因进行RNA干扰的有效序列。此有效siRNA序列所在的位置相当于大鼠Mecp2基因第4外显子，推测可同时抑制大鼠Mecp2α和大鼠Mecp2β的表达。且此靶序列位于大鼠Mecp2基因编码区，推测可同时抑制1．9kb和10kh的大鼠Mecp2基因mRNA的表达。结论：本研究为建立稳定的大鼠神经元Mecp2基因表达敲低的神经细胞模型和研究脑发育过程中Mecp2基因的功能打下了基础。
- 张玉稚王汉森潘虹李美蓉包新华金靖吴希如
- 关键词：DNA结合蛋白质类DNA甲基化RNA小分子干扰
- Rett综合征与MECP2基因被引量：4
- 2004年
- Rett综合征是一种严重影响儿童精神运动发育的神经遗传病 ,诊断主要依靠国际上根据临床表现制定的标准 ,包括典型和非典型Rett综合征两类。该病的遗传方式尚无定论。致病基因是位于染色体Xq2 8的MECP2基因 ,编码甲基化结合蛋白 2。推测致病机制为MECP2基因突变导致蛋白结构和功能异常 ,使胚胎发育时期应当转录静止的基因继续转录 ,而这种“转录噪音”对神经系统的生长和发育具有致病作用。典型Rett综合征患儿MECP2基因主要有 8种热点突变。MECP2基因作用的下游靶基因尚不清楚。
- 张玉稚潘虹包新华吴希如
- 关键词：基因突变
- 新生儿缺血缺氧性脑病血液酸碱失调的分析与处理
- 2001年
- 张玉稚
- 关键词：缺血缺氧性脑病血液酸碱失调新生儿
- 大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体的构建与鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的构建并鉴定大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体,以便应用RNAi技术进一步研究MeCP2功能。方法设计针对大鼠MeCP2mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成双链后,与酶切后的pLentiLox3.7载体片段进行连接、转化。用菌落PCR法、酶切及DNA测序鉴定重组克隆。结果重组克隆经菌落PCR及酶切证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确。结论两个大鼠MeCP2-shRNA慢病毒表达载体的成功构建为应用RNAi研究大鼠MeCP2功能打下了基础。
- 金婧包新华潘虹张玉稚吴希如
- 关键词：RNA干扰MECP2慢病毒载体
- 中国人群Rett综合征患儿MECP2和CDKL5基因的突变分析
- 目的:Rett综合征是一个X连锁的神经发育性遗传病,主要累及女孩,发病率为1／10．000- 15．000。1999年,Amir等通过定位功能候选的方法发现甲基化CoG结合蛋白2基因(methyl-CpG- bindin...
- 李美蓉潘虹包新华张玉稚吴希如
- 文献传递
- 26例不典型Rett综合征MECP2基因的突变分析被引量：6
- 2006年
- 目的了解不典型Rett综合征患儿MECP2基因的突变频率、突变类型、是否存在突变热点,寻找基因型和表型的相互关系。方法取26例不典型Rett综合征患儿外周静脉抗凝血,采用Miller′s蛋白酶K氯化钠盐析法提取基因组DNA,采用PCR方法扩增MECP2基因的外显子及结合区,1%的琼脂糖凝胶电泳鉴定目的PCR产物,然后进行DNA直接测序。DNA测序结果与人基因组序列(GeneBankAF030876)比较。结果26例不典型Rett综合征患儿中有12例存在突变。突变类型包括错义突变,由于单个碱基缺失导致的移码突变和剪切位点的突变,其中错义突变为最常见类型。c·397C>T为3例,c·473C>T、c·916C>T、c·806delG各为2例,c·397A>G、c·1005G>A、c·IVS2-2A>T各为1例。结论不典型Rett综合征患儿存在MECP2基因突变,R133C、T158M和R306C为其热点突变。基因突变类型和表型之间有一定的相关性。
- 李美蓉潘虹包新华张玉稚姜胜玲吴希如
- 关键词：RETT综合征非组蛋白DNA结合蛋白质类
- Rett综合征患儿MECP2基因型和表型关系研究被引量：1
- 2009年
- 目的寻找中国Rett综合征（RTT）患儿甲基化CpG结合蛋白2基因（MECP2）突变的基因型和表型之间的相互关系，为临床诊断和治疗提供帮助。方法对126例经分子遗传学方法诊断的RTT患儿的临床表型参照Kerr等和Scala等评分标准进行打分，采用SPSS12．0软件包进行统计分析。结果分析MECP2突变类型、基因功能区和表型的关系显示，位于基因不同功能区的突变：甲基化CpG结合区（MBD）、转录抑制区（TRD）和C末端（CTS）对RTT表型的影响差异无统计学意义（P〉0．05）；不同突变类型：错义、无义、移码和大片段缺失突变对RTT表型的影响差异无统计学意义（P〉0．05）。分析MECP2突变类型和基因功能区共同对表型的影响显示：同位于MBD的无义和错义突变相比较，前者临床严重性评分高于后者，差异有统计学意义（P=0．016），而位于TRD的无义和错义突变临床严重性评分之间差异无统计学意义（P〉0．05）；位于MBD和TRD的错义突变的临床严重性评分之间差异无统计学意义（P〉0．05），位于MBD和TRD的无义突变的临床严重性评分之间差异无统计学意义（P〉0．05）。分析MECP2最常见突变类型和表型的关系显示：P．T158M、P．R168X、c．806delG和P．R255X对RTT表型总的影响差异无统计学意义（P〉0．05），但在语言功能的受累程度上，以上4种突变之间差异有统计学意义（P=0．028），且语言能力受损的发生率差异也有统计学意义（P=0．019）。结论MECP2基因型和表型之间存在一些相互关系：位于MBD的无义突变病情较严重；在〈5岁组中发生频率较高的4种突变对语言功能和语言能力受损发生率方面存在不同，其中P．R168X受损最重。
- 李美蓉潘虹包新华朱兴旺曹广娜张玉稚吴希如
- 关键词：RETT综合征基因型表型
