李亚明
- 作品数:16 被引量:7H指数:1
- 供职机构:西北农林科技大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家科技基础条件平台建设计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生政治法律更多>>
- 酮康唑水分散软颗粒剂的制备及体外溶出度考察
- 2007年
- 姜成李引乾冯桂芬李亚明薛芬邱刚
- 关键词:酮康唑体外溶出度细胞膜通透性抗真菌药物真菌感染
- EIAV基因转移载体启动子的比较
- 为了比较鸡β-actin启动子和人巨细胞病毒启动子(HCMVp)在哺乳细胞和禽源细胞上的启动能力,在已构建的马传染性贫血病毒(EIAV)基因转移载体pcPPTWPRE(HCMVp)的基础上,参考人巨细胞病毒增强子(CMV...
- 韩凌霞李亚明曲连东司昌德姜骞刘家森
- 文献传递
- 兔出血症病毒抗原捕获ELISA检测方法的建立被引量:6
- 2008年
- 用兔出血症病毒(RHDV)单克隆抗体包被酶标板,以兔多克隆抗体作为夹心抗体,建立RHDV抗原捕获ELISA检测方法,优化反应条件并对该方法的敏感性、特异性、重复性、稳定性等指标进行了测试和评价。结果表明,单抗最佳包被质量浓度为1mg/L,兔多抗血清最佳质量浓度为4mg/L。本方法可特异性地检测出兔肝脏病料中的RHDV,纯化病毒的最低检出量为26μg/L。对已知阳性样品的检测显示,捕获ELISA检测的病毒滴度是HA试验的3~13倍。对67份可疑病料,捕获ELISA阳性检出率为62.7%,HA试验阳性检出率为55.2%。用不同批次包被的酶标板重复检测已知样品显示出良好的重复性。本方法敏感性、特异性、稳定性良好,可应用于RHDV的快速、批量、特异检测。
- 秦海斌刘怀然曲连东刘家森韩凌霞姜骞李亚明杨增岐
- 关键词:单克隆抗体兔出血症
- 复方甲硝唑泡腾片的研制与药效学研究
- 子宫内膜炎为子宫黏膜的黏液性或脓性炎症,为临床上奶牛的一种常见的生殖器官疾病,可给养牛业造成巨大损失。导致子宫内膜炎的病原微生物多种多样,但以细菌因素为最常见,包括需氧菌和厌氧菌,在适宜的条件下均可造成子宫感染,是引起子...
- 李亚明
- 关键词:甲硝唑泡腾片盐酸土霉素药效学研究正交实验设计生殖器官疾病子宫黏膜
- 文献传递
- EIAV基因转移载体包装盒表达质粒的构建
- 2009年
- 在马传染性贫血病毒(EIAV)基因转移载体成功构建并优化的基础上,构建了EIAV基因转移载体包装盒表达重组质粒。分别根据EIAV驴胎皮肤细胞弱毒疫苗株感染性分子克隆(pLGFD3-8)和驴白细胞弱毒疫苗株感染性分子克隆pOK8266T序列,设计并合成引物,扩增EIAVgag/pol全基因和rev基因的第2个外显子,分别插入真核表达载体pCDNA3.1(+),获得表达载体pCDFGP和pCDREV,与亲本株的核苷酸同源性分别是99.6%和99.8%,编码蛋白Gag、Pol及Rev蛋白的推测氨基酸同源性分别为99.2%、98.3%和100%。利用脂质体法,分别将pCDFGP和pCDREV单独及共转染HEK293细胞,利用EIAV阳性血清分别进行间接免疫荧光抗体试验(IFA)和蛋白免疫印迹试验(westernblot),检测外源蛋白的表达情况。结果表明,双质粒共转染的细胞中转染后48h可检测到特异性荧光,转染后60h的细胞裂解产物中可以检测到55ku的Gag蛋白及26ku的p26蛋白,而单独转染pCDFGP和pCDREV的细胞,IFA和western blot试验结果均为阴性。结果表明同时存在gag/pol和rev基因第4外显子的情况下,EIAV包装盒才能表达。
- 韩凌霞尹岚岚李亚明牛成明高鹏飞曲连东
- 关键词:马传染性贫血病毒
- 多视角下农村禁养差异化管理探析
- 2020年
- 自国家实施农村禁养以来,农村生态环境大为改善。禁养制度的研究有助于促进农村禁养水平,但既有研究多侧重于污染防治和养殖政策,对农村禁养运作、管理有所忽视。通过采取规范分析、实证调查等方法对禁养制度及实施的研究发现:现有禁养制度受理念不清、制度建设不均的影响,存在执法不严、依据相冲突的现象,最终导致制度精准性有所欠缺。而从法律实施角度观察,可以发现:现阶段农村禁养存在行政滥权现象,"一刀切"的环保方式对农村的环境质量、生态经济、农民的生产生活带来一定的影响。对此,从禁养法律思想、禁养范围划定和禁养标准制定三个方面提出构建农村禁养差异化管理思路,以完善多元主体联动机制为前提,立足于本地区实际情况,构建合理的指标体系、实施体系和发展机制,完善农村禁养差异化管理制度的有效性。
- 徐春成李亚明高飞
- 关键词:农村生态环境
- EIAV[hlx1]基因转移载体转录后调控元件的优化
- 目的在马传染性贫血病毒(EIAV)基因转移载体pcPPTPRE(+)的基础上(含有报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)和人乙型肝炎病毒转录后调控元件(HPRE)),对其转录后调控元件进行优化。方法参考登录GenBank的...
- 韩凌霞李亚明曲连东司昌德姜骞刘家森
- 关键词:马传染性贫血病毒基因转移载体
- 文献传递
- 一种由锌指核酸酶介导的哺乳动物内源基因定向敲除的方法和该锌指核酸酶及其表达载体
- 本发明一种由锌指核酸酶介导的哺乳动物内源基因定向敲除的方法和该锌指核酸酶及其表达载体,属于基因工程技术领域。其中所述的方法包括:(1)内源基因靶位点的选择;(2)构建穿梭载体pAdTrack-CMV-T2A;(3)制备重...
- 张智英王令张婷婷李亚明李战伟任刚杨涵江张存芳雷洁王瑞麻丽霞
- 文献传递
- EIAV基因转移载体的优化
- 2008年
- 本研究在马传染性贫血病毒(EIAV)基因转移载体pcPPTPRE(+)的基础上[含有报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)和人乙型肝炎病毒转录后调控元件(HPRE)],对其转录后调控元件和外源基因启动子进行优化。参考土拨鼠肝炎病毒(Woodchuck hepatitis virus,WHV)基因组序列和人巨细胞病毒增强子/鸡β-actin启动子序列(CAGp),设计合成2对引物,分别扩增WHV转录后调控元件(WPRE)和CAGp片段,正向插入pcPPTPRE(+)获得重组质粒pcPPTWPRE和pcPPTWCAG。将获得的EIAV转移载体pcPPTWPRE和pcPPTWCAG以及pcPPTPRE(+),脂质体法分别转染人胚肾细胞HEK293和鸡胚成纤维细胞系DF-1,转染后12 h、24 h、36 h、48 h在荧光显微镜下观察特异性绿色荧光的表达。48 h后收获细胞,利用流式细胞仪检测转染细胞中表达EGFP的阳性细胞。结果表明,在HEK293细胞中pcPPTWPRE和pcPPTWCAG的阳性细胞平均百分率均极显著高于pcPPTPRE(+)(P<0.01),pcPPTWCAG显著高于pcPPTWPRE(P<0.05);pcPPTWCAG的平均道数值极显著高于pcPPTPRE(+)和pcPPTWPRE,pcPPTWPRE显著高于pcPPTPRE(+)。在DF-1细胞中pcPPTWPRE和pcPPTWCAG的阳性细胞平均百分率均显著高于pcPPTPRE(+),而pcPPTWPRE和pcPPTWCAG的平均道数值均极显著高于pcPPTPRE(+),pcPPTWCAG显著高于pcPPTWPRE。本研究利用WPRE和CAGp优化构建了EIAV基因转移载体pcPPTWCAG,获得了较强的基因表达能力,为以鸡为宿主进行转基因研究提供了条件。
- 尹岚岚韩凌霞李亚明司昌德于海波徐佳曲连东冉多良
- 关键词:马传染性贫血病毒基因转移载体绿色荧光蛋白
- 中国环境行政执法研究——基于规范权力运行的视角
- 环境行政执法是困扰国内外学界的重要问题之一,如何有效规范环境行政执法,提升治理成效,推动法治发展,业已成为当今国内外学者的研究重点。受历史、人为及行政管理体制等多因素影响,我国环境行政执法权力运行中存在的理论与实践不契合...
- 李亚明
- 关键词:环境行政执法执法行为权力滥用规范权力运行
- 文献传递