虞游
- 作品数：10 被引量：9H指数：2
- 供职机构：杭州师范大学生命与环境科学学院更多>>
- 发文基金：浙江省“钱江人才计划”浙江省科技厅新苗人才计划国家级大学生创新创业训练计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- pEGFP-IFI16表达载体构建及其表达对Hep-2细胞增殖的影响被引量：1
- 2013年
- RT-PCR扩增的IFI16基因连接到pUCm-T载体并测序鉴定,经测序正确的IFI16基因再连接到pEGFP-C1载体构建pEGFP-IFI16重组质粒,重组质粒pEGFP-IFI16转染Hep-2细胞后用荧光显微镜及半定量RT-PCR分析其表达情况,并用流式细胞仪测定细胞生长曲线分析其表达对Hep-2细胞增殖的影响.结果显示pEGFP-IFI16重组质粒构建正确,转染Hep-2细胞后荧光显微镜下观察到绿色荧光信号,半定量RT-PCR结果显示转染后Hep-2细胞IFI16基因条带亮度明显升高,细胞生长曲线测定结果显示转染后Hep-2细胞从第二天起其增殖速度变慢、至第三天时其增殖速度明显慢于对照细胞的增殖速度.说明成功构建了能在Hep-2细胞中表达EGFP-IFI16融合蛋白的pEGFP-IFI16重组质粒,pEGFP-IFI16重组质粒体表达能抑制Hep-2细胞的增殖.
- 虞游张艳欧赵文铖白坚陈建明
- 关键词：HEP-2细胞
- 姜黄素通过诱导Egr-1基因表达抑制HepG-2细胞的增殖被引量：2
- 2015年
- 利用姜黄素处理肝癌Hep G-2细胞研究其对细胞增殖的影响以及可能的分子机制。姜黄素处理后,半定量RT-PCR分析Hep G-2细胞内肿瘤相关基因的表达水平,对筛选得到的姜黄素诱导表达上调的Egr-1基因作进一步验证。随后,设计Egr-1 sh RNA并构建p Green Puro-Egr-1重组质粒,通过转染细胞,构建稳定干扰细胞系。然后,在干扰细胞系的基础上分析Egr-1表达沉默在姜黄素对Hep G-2细胞增殖影响中的作用。结果发现,不同浓度姜黄素处理24 h或48 h后,Hep G-2细胞增殖明显下降并呈剂量效应关系,20μmol/L姜黄素处理不同时间后,其增殖也明显下降并呈时间效应关系;Egr-1基因在姜黄素处理后表达明显升高;Egr-1表达沉默显著减弱了姜黄素抑制Hep G-2细胞增殖的能力。上述结果提示,姜黄素抑制Hep G-2细胞增殖可能是通过诱导Egr-1基因表达介导的,表明其在肝癌的治疗中具有一定的应用前景。
- 虞游蒋汉伟卢佳伟陈建明
- 关键词：姜黄素HEPG-2细胞EGR-1RNA干扰
- 细胞生物学实验教学的改革与创新被引量：2
- 2014年
- 细胞生物学是21世纪发展最为迅速的前沿学科之一,同时也是生命科学领域的基础学科。细胞生物学实验教学在提高学生的实践动手能力,培养学生的实践创新能力中发挥着不可替代的作用。因此,细胞生物学实验教学的改革与创新是十分必要的。本文分析了细胞生物学实验教学的现状,并对其实验教学的改革措施进行了探讨。
- 陈建明虞游
- 关键词：细胞生物学教学改革
- pEGFP-Egr-1表达质粒构建及其表达抑制HepG2细胞增殖被引量：1
- 2016年
- 将RT-PCR扩增的Egr-1基因连接到pMD-18载体上并测序鉴定,经测序正确的Egr-1基因亚克隆到绿色荧光蛋白真核表达载体pEGFP-C1上构建成重组质粒pEGFP-Egr-1.重组质粒pEGFP-Egr-1转染HepG2细胞后,运用荧光显微镜及荧光定量PCR技术分析其在HepG2细胞中的表达情况,并进一步运用WST-1法分析其表达对HepG2细胞增殖的影响.结果显示,重组质粒pEGFP-Egr-1构建正确,转染后在荧光显微镜下观察可见HepG2细胞发出绿色荧光信号,荧光定量PCR分析发现转染后HepG2细胞Egr-1基因mRNA水平明显升高.WST-1结果表明,与对照组相比,转染pEGFP-Egr-1质粒的HepG2细胞,其增殖速率明显下降.上述结果表明,pEGFP-Egr-1重组质粒构建成功,外来过表达Egr-1基因能够抑制HepG2细胞增殖.
- 黄心怡虞游金韵特陈建明
- 关键词：EGR-1基因HEPG2细胞细胞增殖
- 姜黄素抑制肝癌HepG-2细胞增殖作用及其机制研究
- 肝癌是起源于肝脏的一种常见恶性肿瘤，近年来在我国其发病率和死亡率的逐年升高给人们的健康生活带来了严重的威胁。姜黄素是中药姜黄的主要活性成分，大量的研究表明其具有抑制肿瘤细胞增殖、促进肿瘤细胞凋亡的作用，但其确切的分子机制...
- 虞游
- 关键词：肝脏肿瘤中药治疗生化药理
- 文献传递
- DNA甲基化模式及其在癌症中的作用被引量：2
- 2013年
- 随着对癌症研究的不断深入,表观遗传调控在癌症发生发展中的作用也越来越受到人们的关注。DNA甲基化作为一种重要的表观遗传修饰机制,在基因表达调控中起着十分重要的作用。该文对DNA甲基化模式及其在癌症中的作用作了综述,并对DNA甲基化作为癌症早期诊断的生物标记以及癌症表观治疗的新策略作了总结和展望。
- 虞游朱涵卢佳伟姚卉卉陈建明
- 关键词：DNA甲基化癌症表观遗传生物标记
- IFI16基因反义干扰表达载体的构建与鉴定被引量：1
- 2014年
- 为了构建可在人喉癌细胞中稳定表达IFI16基因短发夹RNA(shRNA)的表达载体,设计合成的IFI16基因shRNA片段,连接到经BamHI和EcoRI双酶切的pGreenPuroTMshRNA表达载体中,连接产物转化大肠杆菌后挑取几个抗性菌落,用PCR技术初步进行鉴定,经PCR初步鉴定为重组质粒的一个重组子DNA用测序进一步鉴定,测序结果显示成功构建了IFI16基因shRNA的表达载体pGreenPuro-IFI16shRNA.
- 张艳欧虞游赵文铖朱涵卢佳伟姚卉卉陈建明
- Egr-1基因反义干扰表达载体的构建与鉴定
- 2017年
- 为构建可在人肝癌细胞中稳定表达Egr-1基因短发夹RNA(shRNA)的表达载体,设计合成Egr-1基因shRNA片段,连接到经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切的pGreenPuro^(TM)shRNA真核表达载体中,连接产物转化大肠杆菌后挑取阳性菌落扩大培养,经菌液PCR法初步鉴定为pGreenPuro-Egr-1shRNA重组子的重组子DNA,用测序法进一步鉴定,结果显示成功构建了Egr-1基因shRNA的反义干扰表达载体pGreenPuro-Egr-1shRNA.
- 刘锐锐李聪慧虞游陈建明
- 关键词：EGR-1基因SHRNA
- α-硫辛酸增强吡咯烷二硫代氨基甲酸对Hep-2细胞增殖的抑制作用
- 2014年
- 目的：探讨α-硫辛酸（α-LA）对吡咯烷二硫代氨基甲酸（PDTC）抑制Hep-2细胞增殖的影响。方法体外培养人喉癌细胞系Hep-2细胞，加入α-LA、PDTC或α-LA联合PDTC作用12，24和48h后，用WST-1法和软琼脂集落形成法检测细胞增殖，Hoechst33258染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果α-LA5~500μmol·L-1对Hep-2细胞增殖无抑制作用，PDTC5-50μmol·L-1能明显抑制Hep-2细胞增殖（P﹤0.05，P﹤0.01），PDTC5μmol·L-1联合α-LA5，10和20μmol·L-1对Hep-2细胞增殖的抑制率明显高于对照组（P﹤0.01）和PDTC单独处理组（P﹤0.05）。PDTC5μmol·L-1与α-LA5μmol·L-1联合用药，在12~48h内对Hep-2细胞增殖的抑制率呈时间依赖性（r＝0.987，P﹤0.05），24h后软琼脂细胞集落形成数与PDTC单独处理（P﹤0.05）和α-LA单独处理组相比明显减少（P﹤0.01）。Hoechst33258染色和流式细胞仪检测结果表明，与PDTC和α-LA单独处理组比较，PDTC5μmol·L-1与α-LA5μmol·L-1联合用药24h凋亡细胞增加，G2/M期细胞百分率增加（P﹤0.05）。结论α-LA可增强PDTC对Hep-2细胞增殖的抑制作用并诱导Hep-2细胞凋亡。
- 张艳欧虞游陈建明
- 关键词：Α-硫辛酸吡咯烷二硫代氨基甲酸HEP-2细胞细胞增殖
- 姜黄素促进紫杉醇抑制肿瘤细胞的增殖
- 2015年
- 培养的人喉癌细胞Hep-2及肝癌细胞HepG-2,分别用不同浓度姜黄素（CUR,0~50μmol/L）和紫杉醇（PTX,0~5nmol/L）单独处理或联合处理（5μmol/L CUR＋0.5nmol/L PTX、10μmol/L CUR＋0.5nmol/L PTX）.处理48h后,用WST-1细胞增殖试剂盒检测细胞增殖情况,再用结晶紫染色检测活细胞的密度,最后用Hoechst 33258凋亡染色试剂盒检测细胞凋亡情况.结果显示：姜黄素或紫杉醇单独处理对Hep-2细胞和HepG-2细胞的增殖均有抑制作用,并呈现出一定剂量效应关系;姜黄素与紫杉醇联合处理后细胞的增殖速率要比紫杉醇单独处理的明显降低;同时,姜黄素与紫杉醇联合处理后细胞的凋亡要比紫杉醇单独处理的更为明显.上述研究结果说明,姜黄素对紫杉醇抑制肿瘤细胞Hep-2和HepG-2的增殖有促进作用,并能促进紫杉醇诱导细胞的凋亡.
- 虞游卢佳伟姚卉卉陈建明
- 关键词：姜黄素紫杉醇HEP-2细胞HEPG-2细胞凋亡
