谢琦
- 作品数：17 被引量：54H指数：4
- 供职机构：桂林医学院生物技术学院更多>>
- 发文基金：桂林市科学研究与技术开发项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 精子抗原肽P10G和YLP12的合成及在ELISA检测中的意义被引量：1
- 2012年
- 目的人工合成精子肽P10G和YLP12,以此为抗原建立检测抗精子抗体(AsAb)的酶联免疫吸附测定法(ELISA)。方法用PS3全自动合成仪合成精子肽P10G和YLP12,经反相高效液相色谱纯化和质谱鉴定。分别包板制备ELISA试剂盒,用以检测血清中的AsAb。结果成功合成两种目的肽,质谱结果显示其相对分子质量均与理论相对分子质量相吻合,高效液谱法(HPLC)结果显示其纯度为97.5%和97.8%。以该两种合成肽为抗原,建立AsAb的ELISA,与商品化试剂盒比较均显示极好的一致性(Kappa值为0.77和0.79,>0.75)。结论全自动固相多肽合成技术可用于合成高纯度的精子抗原肽,所合成的P10G和YLPl2均具有较好的抗原活性,可作为包被抗原用于AsAb的ELISA检测。
- 白玲谢琦佘尚扬夏红卫刘永明
- 关键词：精子肽类抗体酶联免疫吸附测定固相多肽合成
- 人精子蛋白17抗原肽的合成及其在抗精子抗体检测中的应用研究被引量：1
- 2010年
- 目的:合成人精子蛋白17的线性B细胞表位肽(118-127aa),并以此为抗原建立抗精子抗体(AsAb)检测的ELISA方法。方法:用PS3全自动多肽合成仪合成人精子蛋白17抗原肽,并经反相高效液相色谱纯化和质谱鉴定。该合成肽作为ELISA法的包被抗原来检测血清中的AsAb(IgG)。结果:合成了实验所需要的抗原性肽段,高效液相色谱法(HPLC)结果显示其纯度为95.5%。以该合成肽为抗原建立的检测AsAb(IgG)的间接ELISA方法,与商品化试剂盒相比符合率为93.3%。结论:所合成的人SP17抗原肽具有较好的抗原活性,可作为间接ELISA法的包被抗原用于抗精子抗体的检测。
- 谢琦周先丽白玲佘尚扬曾尚娟叶元杨冰夏红卫刘永明
- 关键词：固相多肽合成精子蛋白17抗原肽抗精子抗体酶联免疫吸附试验
- 精子抗原肽的合成及其在酶联免疫吸附法检测抗精子抗体中的应用价值被引量：2
- 2012年
- 目的:以合成精子抗原肽为抗原建立酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测抗精子抗体(AsAb)。方法:通过PS3全自动合成仪合成精子肽P10G、YLPl2和SP17抗原肽,经反相高效液相色谱(HPLC)纯化和质谱鉴定,分别包板制备ELISA试剂盒,并检测血清标本。结果:成功合成3种目的肽,质谱分析结果主峰分子量与理论值基本一致,HPLC结果显示其纯度为97.5%、97.78%和95.5%。以3种合成肽为抗原建立ELISA检测AsAb,与商品化试剂盒比较,均显示极好的一致性(Kappa值>0.75)。结论:全自动固相多肽合成技术可用于高纯度的精子抗原肽合成,所合成的P10G、YLPl2和SP17抗原肽均具有较好的抗原活性,可作为ELISA的包被抗原用于AsAb检测。
- 白玲谢琦佘尚扬夏红卫刘永明
- 关键词：抗精子抗体固相多肽合成酶联免疫吸附测定法
- pGEX-4T-1/Tα1-TP5原核表达载体的构建及表达被引量：1
- 2011年
- 旨在构建胸腺融合肽Tα1-TP5原核表达载体,并在大肠杆菌中表达。化学合成Tα1-TP5基因,与原核表达载体pGEX-4T-1融合并转化至E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,用SDS-PAGE电泳和A lphaEase凝胶电泳图像分析系统对工程菌表达的蛋白进行分析鉴定。表达的GST融合蛋白经GST琼脂糖凝胶亲和层析和重组肠激酶切割后,电喷雾质谱(ESI-MS)鉴定胸腺融合肽Tα1-TP5。结果显示,成功构建pGEX-4T-1/Tα1-TP5原核表达载体,工程菌表达的GST融合蛋白占全菌总蛋白的27.8%,且主要以可溶形式表达。经ESI-MS鉴定,胸腺融合肽Tα1-TP5的分子量与理论值相符。胸腺融合肽Tα1-TP5在大肠杆菌中得到了高效表达。
- 谢琦林军王凤山
- 关键词：PGEX-4T-1大肠杆菌原核表达
- 以精子抗原肽为抗原的抗精子抗体ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2010年
- 目的建立组合多个精子抗原肽为抗原的检测抗精子抗体的酶联免疫吸附测定(ELISA)法。方法用PS3全自动多肽合成仪合成4个特异精子肽,并经反相高效液相色谱(RP-HPLC)纯化和质谱鉴定。用ELISA检测4个合成肽的抗原性,基于对这些合成肽抗原活性的评价,将4个精子抗原肽混合后(组合肽)作为抗精子抗体(AsAb)检测用抗原。结果合成了实验所需要的抗原性肽段,RP-HPLC结果显示纯度达95%以上。以组合肽为抗原建立的检测AsAb的间接ELISA方法,与商品化试剂盒相比符合率为95.6%。结论固相多肽合成技术可用于合成高纯度的精子抗原肽,以组合的精子抗原肽作为包被抗原建立的ELISA方法可提高AsAb检测的灵敏度。
- 谢琦白玲佘尚扬叶元夏红卫刘永明
- 关键词：固相多肽合成抗精子抗体酶联免疫吸附试验
- 乳糖诱导重组多价人精子表位肽在大肠杆菌中的表达被引量：4
- 2011年
- 旨在研究用乳糖替代IPTG作为诱导剂进行重组多价人精子抗原表位肽的表达及诱导表达的优化条件。在摇瓶发酵条件下,通过改变培养基组成、诱导时机、诱导温度、诱导剂浓度、诱导时间和诱导方式等条件,利用SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统,研究以上条件改变对GST-重组多价人精子抗原表位肽融合蛋白表达量的影响,并与IPTG诱导结果相比较。结果显示,在摇瓶试验中,最优表达条件为选用TB培养基,在菌体对数生长的中期进行诱导,诱导温度37℃、乳糖诱导终浓度3 mmol/L、诱导时间6 h。GST-重组多价人精子抗原表位肽融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的30.5%,且主要以可溶形式表达,与IPTG的诱导结果相同。分批流加乳糖和一次性加入乳糖诱导,效果一样。乳糖可以替代IPTG作为诱导剂诱导GST-重组多价人精子抗原表位肽融合蛋白的表达,优化条件下可获得与IPTG相同的诱导表达效果。
- 谢琦林军白玲叶元杨冰石青峰刘永明
- 关键词：乳糖IPTG
- 浅谈PBL教学模式在生物化学教学中的重要性被引量：13
- 2017年
- PBL教学法是一种新型教学方法和教学理念,其目的是培养学生自主学习和综合思考问题的能力。为了解决学生在学习生物化学这门课程时面临的困难,需将PBL教学法应用到生物化学的实践教学中。因此,本文对生物化学这门课程的教学现状进行了总结与分析,最后从多个方面提出了PBL教学法在生物化学教学中的重要性。
- 周先丽苏何玲刘永明梁斌梁成钦谢琦
- 关键词：生物化学PBL
- 人精子特异性乳酸脱氢酶-C4潜在B细胞抗原表位预测
- 2013年
- 应用生物软件和互联网服务器对人乳酸脱氢酶-C4（1actate dehydrogenase C4，LDH—C4）的二级结构、可塑性、亲水性、表面可及性及抗原指数等参数进行综合分析，预测其B细胞抗原表位分布．人LDH-C4存在多个潜在的B细胞抗原表位，可能位于第13—22、97—107、216—227位氨基酸区域．运用生物信息学方法确定了人LDH—C4可能存在3个B细胞抗原表位，对进一步研究人LDH—C4的抗原性和研发表位避孕疫苗具有重要意义．
- 谢琦林军白玲刘永明
- 关键词：B细胞表位
- 胸腺素α1-胸腺五肽在大肠杆菌中的表达及表达条件优化被引量：4
- 2011年
- 目的探讨胸腺素α1-胸腺五肽(Tα1-TP5)在大肠杆菌中的表达及表达条件优化。方法将化学合成的Tα1-TP5基因与原核表达载体pGEX-4T-1融合并转化至E.coliBL21(DE3),异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。利用SDS-PAGE电泳和AlphaEase凝胶电泳图像分析系统研究培养基组成、诱导时机、诱导温度、诱导剂浓度及诱导时间等条件对融合蛋白表达量的影响。融合蛋白经GST琼脂糖珠亲和色谱纯化及重组肠激酶切割后,电喷雾质谱鉴定Tα1-TP5。结果选用TB培养基,在菌体对数生长中后期加入终浓度为0.05 mmol/L的IPTG,37℃诱导5 h,GST融合蛋白的表达量最高,占菌体总蛋白的35.8%,且主要以可溶形式表达。Tα1-TP5的分子质量与理论值相似。结论 Tα1-TP5成功在E.coli中表达,并确定了最佳表达条件。
- 谢琦李娟王凤山
- 关键词：GST融合蛋白大肠杆菌
- GST融合蛋白活性测定条件的优化
- 2016年
- 谷胱甘肽硫转移酶（GST,EC2.5.1.18）是一种广泛分布于动植物和微生物体内,具有多种生理功能的同工酶家族.在医学研究中,由于它是生物体内重要的解毒酶系,其在体内活性的高低与代谢环境致癌物和化疗药物能力之间的关系受到人们的关注.
- 梁斌谢琦
- 关键词：谷胱甘肽硫转移酶分光光度法活性测定
