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血清饥饿释放过程中Raji细胞内Skp2与p27^(kip1)的表达变化及意义: 2007年; 目的:探讨血清饥饿释放过程中淋巴瘤细胞株Raji细胞内Skp2与p27kip1的表达变化及意义。方法:采用免疫沉淀方法检测Raji细胞中p27kip1与Skp2的结合情况;采用血清饥饿合并释放同步化处理Raji细胞,经WesternBlot技术检测该过程中p27kip1、Skp2在Raji细胞中的表达变化。结果:免疫沉淀结果显示在Raji细胞中p27kip1与Skp2能够相互结合。在Raji细胞血清饥饿释放过程中,Skp2蛋白总量增加,p27kip1蛋白总量减少。结论:在Raji细胞血清饥饿释放过程中Skp2合成增加,可能通过加快p27kip1的泛素化降解而使细胞中p27kip1显著减少,从而推动了细胞周期的进程。; 邵苏吉陆建新王燏婵沈爱国赵玥铭张冬梅程纯; 关键词：RAJI细胞株 P27KIP1 S期激酶相关蛋白2

p27^(kip1)及其出核相关分子激活蛋白1辅因子在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系: 2007年; 目的探讨 p27^(kip1)及其出核相关分子激活蛋白1(AP-1)的辅助因子 Jab1在淋巴瘤细胞中的表达变化及相互关系。方法采用血清饥饿合并释放方法同步化处理淋巴瘤细胞系 Jurkat 和Raji 细胞,分别采用 Western blot 及 RT-PCR 技术检测 p27^(kip1)、Jab1在淋巴瘤细胞中的蛋白表达水平和mRNA 表达水平变化;采用来普霉素 B(LMB)刺激增殖过程中的淋巴瘤细胞,检测 p27^(kip1)、Jab1的表达变化;构建人 Jab1基因的 pcDNA3.1-myc-Jab1的真核表达质粒,脂质体转染 Jurkat 细胞,配合免疫荧光技术检测 p27^(kip1)的亚细胞定位情况;免疫沉淀检测 Jurkat 和 Raji 细胞中 p27^(kip1)与 Jab1的结合情况。结果血清饥饿导致 Jurkat 和 Raji 细胞生长周期停滞,p27^(kip1)蛋白总量增加,Jab1蛋白总量减少。血清释放后两者的蛋白水平呈现相反的表达变化,而 p27^(kip1)mRNA 水平无明显改变。LMB 可以抑制由血清释放引起的细胞增殖,在此过程中 p27^(kip1)表达上调,Jab1表达下调。转染 Jab1真核表达质粒的 Jar-kat 细胞 p27^(kip1)定位有明显的改变。免疫沉淀结果显示在 Jurkat 和 Raji 细胞中 p27^(kip1)与 Jab1相互结合。结论 Jab1可能通过与 p27^(kip1)结合来介导 p27^(kip1)的核内外分布并影响其表达,进而影响 p27^(kip1)的功能状态,从而参与调控淋巴瘤细胞的生长。; 王燏婵赵玥铭沈爱国陆建新张冬梅何松程纯

Jurkat细胞增殖过程中S期激酶相关蛋白2与p27^kip1的表达变化及意义: 2008年; 目的探讨S期激酶相关蛋白2（skp2）与p27^kip1在淋巴瘤细胞株Jurkat细胞增殖过程中的表达变化及意义。方法采用免疫沉淀法检测Jurkat细胞中p27^kip1与Skp2的结合情况；采用血清饥饿合并释放法同步化处理Jurkat细胞，再分别用Western blot技术、免疫荧光双标技术及核浆分离法检测p27^kip1和Skp2在Jurkat细胞中的表达变化及亚细胞定位。结果p27^kip1与Skp2能够相互结合。在Jurkat细胞增殖过程中，p27““蛋白表达减少，其中在细胞核内的减少更明显；Skp2蛋白表达增加，其中在细胞浆中的增加更明显。结论在Jurkat细胞增殖过程中，Skp2在细胞浆中的合成增加，并可能通过加快p27^kip1的泛素化降解使细胞核内p27^kip1显著减少，从而推动细胞周期的进程。; 陆建新王熵婵沈爱国赵玥铭孙承龙张冬梅程纯; 关键词：JURKAT细胞株 P27^KIP1 SKP2

磷酸化P27^(kip1)的表达与非霍奇金淋巴瘤的恶性相关: 2008年; 目的探讨P27kip110位丝氨酸(Ser10)和187位苏氨酸(Thr187)磷酸化形式的蛋白质表达水平与非霍奇金淋巴瘤(NHL)恶性程度的关系。方法采用免疫组织化学方法检测88例NHL及15例良性增生淋巴结中Ser10、Thr187磷酸化P27kip1和P27kip1蛋白的表达,结合临床及病理资料进行统计分析。结果两种磷酸化位点的P27kip1蛋白在良性增生淋巴结(不包括生发中心)中的阳性率明显低于NHL,随着肿瘤侵袭性的增加,两种磷酸化位点的P27kip1蛋白表达水平增高,与增殖指标Ki-67呈正相关。Thr187磷酸化P27kip1蛋白的阳性率与P27kip蛋白表达水平呈正相关,Ser10磷酸化P27kip1蛋白的阳性率与P27kip1蛋白表达水平表现为负相关。结论磷酸化的P27kip1与NHL的恶性程度有关,联合检测磷酸化P27kip1与P27kip1蛋白的表达水平可为NHL的临床诊断和治疗提供参考。; 何松王燏婵沈爱国张冬梅陆建新赵玥铭程纯; 关键词：淋巴瘤

P27^(kip1)与出核因子CRM1在人淋巴瘤细胞系中的表达及相互关系: 2008年; 目的研究P27kip1与出核因子CRM1在淋巴瘤细胞中的表达及相互关系。方法运用血清饥饿同步化处理淋巴瘤细胞株Jurkat和Raji,10%血清刺激细胞增殖。Western blot分别检测生长阻滞及增殖的淋巴瘤细胞中P27kip1与CRM1的表达。用核浆分离方法检测P27kip1与CRM1分别在胞核、胞质的定位。免疫沉淀检测P27kip1与CRM1在淋巴瘤细胞中的结合。结果在不同状态的淋巴瘤细胞中,P27kip1与CRM1蛋白水平的表达均表现为负相关,并且P27kip1的核内外分布与CRM1的核内外分布一致。免疫沉淀结果验证在淋巴瘤细胞中P27kip1与CRM1相互结合。结论出核因子CRM1可能通过与P27kip1结合而影响P27kip1的核内外分布及表达水平,从而参与调控淋巴瘤细胞的生长。; 王燏婵赵玥铭沈爱国张冬梅黄晓东陆建新何松程纯; 关键词：P27^KIP1 淋巴瘤

全反式维甲酸对人白血病细胞系U937细胞生长的影响及其机制分析被引量：1: 2008年; 目的研究全反式维甲酸（ATRA）作用于人白血病细胞系U937细胞后，对细胞生长的影响及可能的机制。方法收集1 μmoL／L ATRA作用后的U937细胞，利用流式细胞术检测细胞周期分布，Western blot法检测细胞周期相关蛋白（cyclinA、p16、p21、p27及p27相关分子skp2）表达水平的变化，采用免疫沉淀方法检测U937细胞中p27与Skp2的结合情况。结果流式细胞术分析显示，在1 μm0L／L ATRA作用72h后，72％的U937细胞被阻滞在G0／G1期。Western blot分析显示，ATRA能诱导cyclinA、Skp2表达下凋，p21、p27表达上调。免疫沉淀法检测结果显示在U937细胞中p27与Skp2存在相互结合的情况。结论ATRA可能主要通过诱导p27表达上调引起U937细胞生长阻滞，其过程是由p27相关分子Skp2所介导的。; 赵玥铭王燏婵陆牡丹沈爱国张冬梅陆建新程纯; 关键词：维甲酸 U937细胞 P27蛋白 SKP2蛋白

人类S期激酶相关蛋白2表达质粒的构建: 2007年; 目的:克隆人类S期激酶相关蛋白2(Skp2)基因,构建其表达质粒,为今后进一步研究Skp2的生物学功能提供基础。方法:采用RT-PCR技术扩增人类Skp2 eDNA全长序列,运用DNA重组技术将其重组于pcDNA3.1/myc- His A质粒,构建Skp2表达质粒。结果:通过酶切电泳分析及DNA测序分析证实,实验成功构建了Skp2表达质粒。结论:Skp2表达质粒pcDNA3.1/mye-His A-Skp2构建成功,为进一步研究Skp2的生物学功能及其在肿瘤发生、发展、诊断和预后中的作用奠定了基础。; 陆建新孙承龙王熵婵沈爱国赵玥铭刘海鸥程纯; 关键词：S期激酶相关蛋白2 DNA重组技术细胞周期

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赵玥铭

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