张宏鹏
- 作品数:11 被引量:1H指数:1
- 供职机构:重庆医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- RGD-重组葡激酶-人α微球蛋白融合蛋白及其制备与应用
- 本发明提供了一种RGD-重组葡激酶-人α微球蛋白融合蛋白及其制备与应用。本发明所述RGD-重组葡激酶-人α微球蛋白融合蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.12所示。本发明的融合蛋白通过以下制备方法获得:采用重叠延伸PCR...
- 周建中汪德强苟冶然龙小滨陈检杨可白垒雷寒黄爱龙何泉张宏鹏
- 文献传递
- GRP78调控抗乙型肝炎病毒颗粒分泌的抑制剂
- 本发明提供一种基于GRP78的抗乙型肝炎病毒抑制剂。本发明以GRP78蛋白为靶点,通过抑制/阻断乙肝病毒颗粒分泌实现抗乙型肝炎病毒功能。本发明通过质谱鉴定发现GRP78可以与乙肝病毒包膜的preS1相互作用,并证实GRP...
- 汪德强刘俊叶师悦嫄靳鑫吴爽张宏鹏黄爱龙蔡雪飞魏杰阳媛张祥伍晓莉毛胜蓝王雯沈仕梅马园艳
- 一种组织型纤溶酶原激活剂的构建、表达纯化及功能鉴定
- 一种重组组织型纤溶酶原激活剂,即r‑tPA,重组质粒的构建及其原核上清表达及纯化方法,它涉及组织型纤溶酶原激活剂重组质粒的构建、原核表达及纯化技术;本发明在含有人tPA全长基因质粒基础上在N端引入能去除载体上标签的3C序...
- 汪德强周建中龙小滨够怡然白垒黄爱龙张宏鹏杨可陈检
- 文献传递
- 金黄色葡萄球菌表面蛋白SdrE的表达、纯化及晶体生长
- 2014年
- 目的:对金黄色葡萄球菌表面蛋白质(serine-aspartate repeat,SdrE)进行克隆表达纯化及晶体培养,以期解析其三维结构,进而深入分析金黄色葡萄球菌感染的分子机制,为研发新的抗菌药物提供基础。方法:利用PCR技术扩增SdrE基因,构建重组质粒pW28-SdrE,并在大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)B834中表达,用Ni2+-NTA亲和层析柱和DEAE阴离子交换层析柱纯化SdrE蛋白质,再用Hiload Superdex 200凝胶层析柱分析其在溶液中的聚集状态,用Hampton试剂盒初筛晶体及棋盘法优化晶体。结果:(1)构建了重组质粒pW28-SdrE,并在E.coli B834中可溶性表达。(2)获得了纯度较高(85%)的SdrE蛋白质,该蛋白质在溶液中以单体形式存在。(3)培养出晶形较好、衍射能力较强的SdrE蛋白质单晶。结论:利用经典的蛋白质纯化技术和晶体培养技术,可以获得衍射能力较强的SdrE单晶,为其三维结构的解析和基于结构的新型特异性抗菌药物的研发提供了重要的基础。
- 张绍城郭珍张宏鹏苟冶然龙小滨汪德强
- 关键词:金黄色葡萄球菌抗菌药物
- 孕产妇Rh表型分布特征及相容性输血的可行性探讨被引量:1
- 2024年
- 目的:分析重庆地区孕产妇Rh表型分布特征,探讨Rh表型在孕产妇中的临床意义及实行Rh表型相容性输血的可行性。方法:采用微柱凝胶法对65161例孕产妇进行ABO血型和Rh表型检测,以同期48122例男性为对照,通过χ^(2)检验对数据进行比较分析。结果:113283例样本中,RhD+112870例(99.64%),以CCDee(48.39%)和Cc DEe(32.88%)为主要表型,并检出重庆地区首例Rh缺失型D--表型;Rh D-413例(0.36%),以ccdee(52.78%)和Ccdee(33.41%)为主要表型;RhD+组与Rh D-组的Rh表型分布差异有统计学意义(P<0.01)。在65161例孕产妇中,Rh5种抗原的阳性率由高到低为D>e>C>c>E,与男性相比差异无统计学意义(P>0.05);孕产妇Rh表型分布与男性相比差异无统计学意义(P>0.05);不同ABO血型的孕产妇间Rh表型分布差异无统计学意义(P>0.05)。在孕产妇中,正常妊娠人群、有不良流产史人群、采用人类辅助生殖技术人群和不孕症患者人群间Rh表型分布无明显差异(P>0.05),4个孕产妇人群与本地区综合性三甲医院住院患者和献血者相比,Rh表型分布差异无统计学意义(P>0.05)。RhD阳性孕产妇中,CcDEe表型找到相容性血液的概率为100%,CCDee、CcDee和CCDEe表型找到相容血液的概率为45%-60%,ccDEE、ccDEe、CcDEE表型找到相容血液的概率为5%-10%,其余表型的相容概率均低于0.5%;提供CCDee和ccDEE两个表型的血液即可满足99%以上患者7种Rh表型相容性输血需求。结论:应对孕产妇进行Rh表型检测,对需要输血的孕产妇推行Rh表型相同或相容性输血是切实可行的输血举措。
- 杨桂林张涛李春莉张宏鹏吴盈盈李胜蓝万块杨赟平
- 关键词:孕产妇
- 孕产妇不规则抗体血清学特征和临床意义分析
- 2024年
- 目的:明确不规则抗体在孕产妇人群中的血清学特征,探讨其临床意义。方法:选取2017年1月-2022年3月于重庆医科大学附属妇女儿童医院就诊的孕产妇151471例,采用微柱凝胶抗人球蛋白法进行不规则抗体筛查,对部分抗体筛查阳性标本进一步做抗体特异性鉴定。结果:孕产妇不规则抗体筛查阳性率为0.91%(1375/151471),其中0.23%(355/151471)在孕早期检出,0.05%(71/151471)在孕中期检出,0.63%(949/151471)在孕晚期检出,孕晚期抗体阳性率明显高于孕早期和孕中期,且孕晚期新增阳性例数明显高于孕中期新增例数;分析1375例不规则抗体阳性结果的凝集强度,其中凝集强度为弱阳性占比最高,为50.11%(689/1375),可疑阳性占18.69%(257/1375),阳性占31.20%(429/1375),孕中期凝集强度分布与孕早期相比差异无统计学意义,但孕晚期可疑阳性和弱阳性的比例低于孕早期,阳性比例高于孕早期,比较差异有统计学意义(P<0.001)。不规则抗体阳性孕产妇中,妊娠≥2次孕产妇的占比明显高于≤1次者;进行抗体鉴定的60例孕产妇中,Rh系统占25.00%(15/60),Lewis系统占43.33%(26/60),Kidd系统占3.33%(2/60),MNS系统抗体占16.67%(10/60),P1PK系统抗体占1.67%(1/60),自身抗体占1.67%(1/60),4例无法确认特异性占6.67%(4/60);特异性抗体中以抗-Lea(30.00%)最为常见,其次是抗-E(16.67%)和抗-M(16.67%)。结论:不同地区、具有不同遗传背景的孕产妇人群的不规则抗体血清学特征存在差异,掌握本地区孕产妇不规则抗体的特征,对保证孕产妇输血安全、防治新生儿溶血病具有十分重要的意义。
- 张涛杨桂林张宏鹏吴盈盈李胜蓝万块祁海峰李春莉
- 关键词:孕产妇不规则抗体抗体鉴定血清学特征
- RGD‑重组葡激酶‑人α微球蛋白融合蛋白及其制备与应用
- 本发明提供了一种RGD‑重组葡激酶‑人α微球蛋白融合蛋白及其制备与应用。本发明所述RGD‑重组葡激酶‑人α微球蛋白融合蛋白的氨基酸序列如SEQID NO.12所示。本发明的融合蛋白通过以下制备方法获得:采用重叠延伸PCR...
- 周建中汪德强苟冶然龙小滨陈检杨可白垒雷寒黄爱龙何泉张宏鹏
- 文献传递
- 肺炎链球菌热休克蛋白Grp E的表达、纯化及热稳定性研究
- 2014年
- 目的:肺炎链球菌可引起细菌性肺炎和脑膜炎、发热性菌血症等多种疾病。对肺炎链球菌热休克蛋白Grp E进行克隆表达,纯化及热稳定性测定,以便于进一步分析肺炎链球菌感染的分子机制。方法:利用PCR技术扩增Grp E基因,构建重组质粒p W28-Grp E,并在大肠杆菌(escherichia coli,E.coli)B834中表达,Ni2+-NTA亲和层析柱和DEAE阴离子交换层析柱纯化Grp E蛋白,Hiload Superdex 75凝胶层析柱分析在溶液中的聚集状态,热稳定性(thermal shift assay,TSA)法测定热稳定性。结果:1成功构建重组质粒p W28-Grp E,在表达菌E.coli B834中可溶性表达。2获得高纯度(95.0%以上)Grp E蛋白,发现该蛋白在溶液中以二聚体形式存在。3测定Grp E蛋白在p H 6.0、20 mmol/L盐浓度缓冲液中有较高热稳定性。结论:利用经典的蛋白质克隆表达纯化技术,获得了高表达量高纯度的Grp E蛋白,并初步测定其热稳定性为下一步蛋白晶体培养、三维结构解析及感染机制研究提供重要基础。
- 张宏鹏赵沙沙龙小滨吴爽白垒罗淼黄爱龙汪德强
- 关键词:肺炎链球菌热稳定性
- GRP78调控抗乙型肝炎病毒颗粒分泌的抑制剂
- 本发明提供一种基于GRP78的抗乙型肝炎病毒抑制剂。本发明以GRP78蛋白为靶点,通过抑制/阻断乙肝病毒颗粒分泌实现抗乙型肝炎病毒功能。本发明通过质谱鉴定发现GRP78可以与乙肝病毒包膜的preS1相互作用,并证实GRP...
- 汪德强刘俊叶师悦嫄靳鑫吴爽张宏鹏黄爱龙蔡雪飞魏杰阳媛张祥伍晓莉毛胜蓝王雯沈仕梅马园艳
- 文献传递
- 一种组织型纤溶酶原激活剂的构建、表达纯化及功能鉴定
- 一种重组组织型纤溶酶原激活剂,即r-tPA,重组质粒的构建及其原核上清表达及纯化方法,它涉及组织型纤溶酶原激活剂重组质粒的构建、原核表达及纯化技术;本发明在含有人tPA全长基因质粒基础上在N端引入能去除载体上标签的3C序...
- 汪德强周建中龙小滨够怡然白垒黄爱龙张宏鹏杨可陈检
- 文献传递