张良艳
- 作品数：30 被引量：63H指数：5
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>
- 甲型H7N9流感裂解疫苗制备及免疫保护效果的评价被引量：2
- 2014年
- 目的构建、拯救重配甲型H7N9流感病毒疫苗候选株并制备甲型H7N9流感裂解疫苗,动物实验评价甲型H7N9流感裂解疫苗的免疫原性及免疫保护性效果。方法采用反向遗传学技术将A/Anhui/1/2013(H7N9)疫苗株的HA、NA基因和A/Puerto Rico/8/34(PR8)毒株的PB2、PB1、PA、NP、M、NS基因进行重配,转染细胞后筛选拯救甲型H7N9流感病毒疫苗候选株,制备rgPR8-H7N9流感裂解疫苗抗原。腹腔注射免疫Balb/c小鼠,检测血清IgG、IgG1、IgG2a、HI效价,进一步用野生株攻毒,评价rgPR8-H7N9流感裂解疫苗的免疫保护效果。结果成功拯救甲型H7N9流感病毒疫苗候选株rgPR8-H7N9。制备的重配甲型H7N9流感裂解疫苗对小鼠产生较高的HI抗体效价。IgG1/IgG2a亚型检测结果表明小鼠体内以诱导体液免疫为主。攻毒实验显示甲型H7N9流感裂解疫苗能够有效降低肺部的病毒载量,肺组织病变显著减轻、体质量下降后趋于稳定,疫苗剂量达到15μg即可全部存活。A/Anhui/1/2013(H7N9)野生株流感病毒攻毒,甲型H7N9流感裂解疫苗能够达到保护小鼠效果。结论成功拯救重配甲型H7N9流感病毒疫苗候选株rgPR8-H7N9,制备的甲型H7N9流感裂解疫苗具有较好的免疫原性及免疫保护性,为H7N9流感裂解疫苗的研发及进入临床研究提供了实验依据。
- 陈锐段跃强赵忠鹏张良艳邢丽刘娜张立周娅王希良杨鹏辉
- 关键词：反向遗传学裂解疫苗免疫保护性
- 细菌内毒素导致的天然免疫失衡与凝血障碍的关联研究被引量：2
- 2017年
- 目的探讨天然免疫与凝血相关分子的关系及其理论和其临床意义。方法采用细菌内毒素(LPS)高、低2个剂量分别注射C57BL/6正常小鼠和MyD88基因敲除小鼠,并对正常小鼠注射IL-6、IFN-γ细胞因子抗体,观察小鼠生存率,收获肝组织提取mRNA,RT-PCR的方式检测各相关细胞因子及凝血因子的表达;采用原位孵育实验检测PT(prothrombinase)/PA(plasminogen activator)/PC(protein C)活性;采用Western blot方法检测纤维蛋白沉积,将所有的实验结果使用医学统计软件进行作图分析。结果 IL-6、IFN-γ2种细胞因子抗体通过激活PA活性抑制过量纤维蛋白的生成,延长小鼠存活时间(P<0.003)。结论通过调节天然免疫相关因子的表达来调控凝血系统的功能,控制纤维蛋白适量生成,为治疗败血症提供数据支持。
- 赵琪张英华邢丽张良艳王臣玉杨丽萍王鸿玲鲍翠霞王倩李玮李杰孙成铭罗德炎
- 关键词：天然免疫凝血系统内毒素
- 炭疽AVA疫苗特异性抗体分泌细胞检测方法的建立被引量：1
- 2007年
- 目的 应用酶联免疫斑点（ELISPOT）技术,建立一种检测炭疽AVA免疫后特异性抗体分泌细胞的方法,用于检测和评价炭疽无菌培养滤液抗原特异性抗体形成细胞的功能.方法 无菌分离小鼠脾细胞,建立一系列特异性ELISPOT检测炭疽无菌培养滤液抗原特异性抗体分泌细胞的参数：包括抗原最佳包被浓度、细胞最适孵育时间、反应体系中细胞浓度以及亲和素抗体工作浓度的确定,同时检测上清中抗体效价,并以不相关抗原包被,检验方法的敏感性和特异性.结果 当抗原包被浓度为7.5μg/mL时,不同细胞浓度反应曲线最稳定 细胞数为5×10^6/mL时,不同包被浓度形成的斑点数适量,易于计数 且在抗体稀释度相同情况下,脾细胞孵育时间为3～6 h所获得的斑点数最清晰,背景着色最浅,容易被仪器识别 同时,特异性抗原包被组所获得的斑点频数高于无关抗原包被组（P＜0.01） 反应体系上清中未检测到抗原特异性抗体.结论 该方法敏感、特异,可用于AVA抗原免疫后体液免疫评价.
- 吕进张松乐董梅何蕊江海燕张良艳邢丽杨海荣王希良
- 布鲁杆菌基因工程疫苗免疫保护效率的初步观察被引量：6
- 2006年
- 目的比较布鲁杆菌6种抗原表位所获得的基因工程疫苗的免疫保护效率。方法布鲁杆菌核糖体蛋白L7/L12、胞质蛋白P39、细胞表面蛋白BCSP31、二氧四氢喋啶合成酶BLS、16.5×103的外膜蛋白PAL和翻译起始因子IF3的基因片段与真核表达载体pcDNA3.1(+)构建的核酸疫苗及上述6条片段转入pET32a(+)后诱导表达的的重组蛋白免疫小鼠,3次免疫后进行攻毒实验,对其免疫保护效率进行初步观察。结果L7/L12和BLS的重组蛋白疫苗和核酸疫苗都产生了非常显著的保护作用,P39的核酸疫苗、IF3和BCSP31的重组蛋白疫苗也产生了非常显著的保护作用,其中L7/L12核酸疫苗的保护效率最高。结论初步认为布鲁杆菌的优势抗原表位所获得的基因工程疫苗可产生一定的抗布鲁杆菌作用,可作为未来布鲁杆菌新型疫苗的候选者,有进一步研究的价值。
- 高永辉张松乐曾政罗德炎张良艳董梅王希良
- 关键词：基因核酸
- 无针青霉素皮试法取代传统有针皮试的实验研究被引量：2
- 2016年
- 目的:开展无针青霉素皮试法与传统皮试方法的比较研究,为无针青霉素皮试法提供实验依据。方法:建立青霉素致敏豚鼠模型,并以无针和有针皮试法检测致敏豚鼠及对照豚鼠,比较其阳性检出率、假阳性率、漏检率和皮肤病理损伤评价等临床指标。结果:无针及有针皮试法对豚鼠致敏模型的阳性检出率均为100%,无假阳性及漏检;且相较于传统有针皮试,无针皮试阳性结果更明显,造成的皮肤病理损伤更小。结论:无针青霉素皮试对过敏豚鼠检出精确,皮试阳性结果相比于传统有针注射更明显,并且无恐针情绪,造成法人皮肤病理损伤也更小,有望在临床上取代针头青霉素皮试法。
- 张良艳任天宇邢丽孙溢于姝王希良
- 关键词：阳性检出率
- 一种弥漫性血管内凝血的预防方法
- 本发明公开了一种弥漫性血管内凝血的预防方法。本发明保护Factor XI在作为弥漫性血管内凝血预防和/或治疗靶点中的应用。本发明还保护Factor XI在作为败血症预防和/或治疗靶点中的应用。本发明所述的败血症治疗靶点F...
- 罗德炎邢丽张良艳
- 文献传递
- 一种流感病毒通用疫苗及其制备方法与应用
- 本发明公开了一种流感病毒通用疫苗及其制备方法与应用。本发明提供了一种多肽，其氨基酸序列如序列表的序列2所示。本发明还提供了所述多肽在制备流感病毒疫苗中的应用。本发明利用疫苗生物合成技术制备流感病毒通用疫苗，该流感病毒通用...
- 罗德炎邢丽张良艳王希良
- 文献传递
- 无针皮内注射免疫甲型H7N9流感裂解疫苗的免疫效果评价被引量：5
- 2015年
- 目的开展无针皮内注射免疫甲型H7N9裂解流感疫苗的安全性及有效性评价,为无针注射免疫疫苗提供实验依据。方法采用无针皮内注射H7N9裂解流感疫苗免疫小鼠和大鼠,并用有针肌肉注射免疫做对照,通过活体成像技术观察疫苗的分布情况,并采用血疑抑制试验测定疫苗免疫后的血清中和抗体效价、滴鼻攻毒评价免疫保护及DRAIZE评分与病理检测注射损伤情况。结果无针皮内注射免疫疫苗在真皮内呈池状分布,且疫苗驻留时间明显长于在肌肉层的驻留时间。无针皮内免疫3μg抗原的甲型H7N9流感裂解疫苗可起到肌肉免疫15μg抗原的同样血清学保护水平及免疫保护效果。结论无针皮内注射免疫甲型H7N9裂解流感疫苗安全、有效,且抗原用量是有针肌肉注射免疫抗原用量的1/5量,将为流感疫苗免疫防控提供新的技术策略。
- 任天宇张肖邢丽张良艳于姝孙溢张爱军周娅王希良
- 一种流感病毒疫苗的制备方法
- 本发明公开了属于疫苗制备技术领域的一种流感病毒疫苗的制备方法。该方法首先将哺乳动物细胞单克隆化，建立单克隆细胞库，然后筛选流感病毒适应的单克隆化细胞株，然后优化病毒适应性细胞株培养病毒条件，最后将病毒适应性细胞株在生物反...
- 刘坤王希良张良艳姚志东邢丽
- 文献传递
- 治疗用马抗SARS-CoV免疫球蛋白体外抗SARS-CoV的研究被引量：2
- 2005年
- 目的 研究 3个批号的治疗用马抗SARS CoV免疫球蛋白在体外对SARS CoV的抑制作用。方法 确定SARS CoVBJ 0 1株毒力后 ,采用MTT法确定药物对Vero E6细胞的毒性。将一定量的SARS CoVBJ 0 1株病毒液加入培养好的Vero E6细胞中 ,置 37℃ ,5 %CO2 孵箱中培养不同时间后加入以最大无毒浓度开始的不同浓度的药物继续培养 ,采用MTT法检测药物对病毒的抑制作用。结果 3个批号的治疗用马抗SARS CoV免疫球蛋白不同时间点的治疗指数 (TI) :2h组 >6h组 >1 2h组 >2 4h组 ;2 0 0 30 7批 >2 0 0 30 6批 >2 0 0 30 8批。结论 治疗用马抗SARS CoV免疫球蛋白在体外均有抗SARS CoV作用 ,其中 2 0 0 30 7批的抗病毒效果最好 ,为其用于SARS治疗提供了实验依据。
- 赵光宇纪晓光石辛甫刘建源李岩张庶民王军志张良艳张松乐王希良
- 关键词：抗SARS-COV体外VERO-E6细胞MTT法检测抗病毒效果SAILS
