陈孝康
- 作品数:15 被引量:23H指数:3
- 供职机构:复旦大学更多>>
- 发文基金:国家高技术研究发展计划国家科技攻关计划更多>>
- 相关领域:化学工程生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>
- 产分泌蛋白酶酵母菌株的筛选被引量:9
- 1999年
- 用含有脱脂奶粉平板上点种培养的方法,从分属93个属,492个种的2 129个酵母菌株中进行筛选,发现有分属27个属,87个种的165个酵母菌株可产生不同程度的分泌蛋白酶。
- 高卜渝陈孝康徐波李育阳H.Fukuhara
- 关键词:酵母
- 链霉菌噬菌体1010和P13启动子在大肠杆菌中的克隆和表达
- 1990年
- 将螺旋链霉菌噬菌体1010和红霉菌噬菌体P13的San3A和HindⅢ酶切片段分别插入启动子探测质粒pGA46的BgIⅡ和HindⅢ位点,在大肠杆菌中获得了氯霉素抗性、四环素抗性的重组质粒。限制性内切酶酶切产物的电泳分析和DNA分子杂交分析结果表明重组质粒确由载体pGA46和噬菌体酶切片段连接而成。以限制性内切酶HindⅢ、BamHⅠ、EcoRⅠ、PstⅠ、SolⅠ等对重组质粒进行酶切分析,并应用限制性内切酶和核酸酶BAl-31酶切重组质粒pSS31中的噬菌体DNA插入顺序。得到分子量由1.2Kb缩短至0.25Kb而仍保留启动子功能的片段,用大肠杆菌的启动子探测质粒pGA46作为载体分别克隆于San3A和HindⅢ酶切的大肠杆菌的启动子和探测质粒,在含有抗生素的培养基上分别选择T_c^r和C_m^r转化子。
- 王筠陈孝康周健明朱逸忻沈仁权盛祖嘉
- 关键词:启动子克隆
- 绛红色小单孢菌噬菌体启动子在大肠杆菌中高水平表达
- 1995年
- 绛红色小单孢菌噬菌体启动子在大肠杆菌中高水平表达福建中医药研究院张恩平复旦大学遗传学研究所陈孝康启动子结构与功能的研究对于基因工程中产物的高水平表达具有重要意义。放线菌启动子,有的既可在放线菌表达,也可在大肠杆菌表达[1]。已克隆的放线菌噬菌体的启动...
- 张恩平陈孝康
- 关键词:噬菌体启动子大肠杆菌
- 嗜热脂肪芽孢杆菌313-1启动基因在枯草杆菌中的克隆和表达
- 1991年
- 以启动子探测质粒pPL603为载体,克隆了嗜热脂肪芽孢杆菌313-1染色体中有启动功能的DNA片段。经酶切、连接,转化枯草杆菌,获得了6株氯霉素抗性水平达100 μg/ml的转化子。将重组质粒pPL603-2的插入片段(1.2 kb)移到载体pPL703中,仍能表现出启动功能。经同源性分析表明,重组质粒的插入片段确实来自嗜热脂肪芽孢杆菌。EcoR I,Bgl II,Hind III等11种限制性内切酶对该片段均不能酶切。经Bal-31酶切,将此插入序列缩小到0.54 kb后仍具有启动功能。
- 江行娟崔玉良杨庆云吴琳杨树青陈孝康
- 关键词:芽孢杆菌枯草杆菌克隆
- 用降红小单孢菌发酵生产庆大霉素的方法
- 本发明是一种微生物发酵庆大霉素的方法。;本发明从改变菌种特性出发,通过筛选抗甲硫氨酸结构类似物突变型菌株,得到绛红色小单孢菌A<Sub>2</Sub>(Micromonospora purpurea A<Sub>2</S...
- 陈孝康沈仁权盛祖嘉周健明周菁
- 绛红色小单孢噬菌体MPh1在大肠杆菌中有启动子功能的DNA片段的克隆及顺序测定
- 1995年
- 从绛红色小单孢噬菌体Mph1DNA中,用大肠杆菌启动子探测质粒pGA46克隆到在大肠杆菌中具有启动子功能的DNA片段,筛选到的启动子功能片段具有抗四环素能力达100μg/ml以上。对这些活性片段进行分子杂交,证明确实来自绛红色小单孢噬菌体Mnh1。在此基础上,对其中一个250bp长的片段从克隆位点的一端进行了DNA序列分析,其结构类似于大肠杆菌启动子。并进行了G+C百分比的统计和限制性内切酶位点分析。
- 周健明陈孝康杜艳王建红汪训明王顺德江行娟杨庆云
- 关键词:噬菌体克隆DNA测序
- 螺旋链霉菌溶源性菌株的确证及生物学特性被引量:2
- 1991年
- 用螺旋链霉菌噬菌体1010、1012、P11、4031分别感染S.spiramyceticus n.sp.298-36,培养后经分离得到了四株不同品系的溶源菌,并且对其生物学特性进行了研究。经多次单菌落分离试验及用抗血清处理溶源菌菌丝,在培养过程中发现这些菌株仍具有释放噬菌体的能力,并对其自身释放的噬菌体具有免疫性。溶源菌所释放的噬菌体经增殖后抽提DNA并酶切和电泳,结果表明这些噬菌体DNA的酶切位点及片段大小与相应的用于溶源化的噬菌体DNA的酶切位点及片段大小完全相同。溶源菌合成螺旋霉素的能力发生了很大的变化。用紫外线或丝裂霉素C诱导噬菌体P11的溶源化菌株,结果表明噬菌体的释放量没有显著增加。
- 杜艳陈孝康周健明王建红
- 关键词:生物学特性
- 螺旋链霉菌一个菌株14^#的特性被引量:1
- 1994年
- 用紫外光诱导螺旋链霉菌的溶源化菌株,得到一个不释放噬菌体的品系。这个品系。14°对温和噬菌体P11还有免疫性。瑟慎吸印-分子杂交的结果表明菌株14°染色体DNA和温和噬菌体P11的DNA有同源性。推测茵株14°可能是一个缺陷溶源性菌株。
- 周健明陈孝康杜艳王建红
- 关键词:菌株
- 螺旋链霉菌转化的研究被引量:4
- 1989年
- 以细菌质粒pBR322、pBR325、pPS108、pSS31、RP4等对螺旋链霉菌(Streptomycesspiramyceticus n.sp.298-36)成功地进行了质粒DNA的转化,转化效率达10~4转化子/μgDNA。研究了菌龄、菌丝分散状况、两价阳离子等因素对转化的影响,建立了螺旋链霉菌的转化系统。
- 王筠陈孝康周健明朱逸昕毛世红沈仁权盛祖嘉
- 关键词:DNA转化
- 螺旋霉素链霉菌噬菌体的分离和鉴定被引量:2
- 1989年
- 从螺旋霉素的异常发酵液及土壤样品中分离到19株螺旋霉素链霉素噬菌体,对每一噬菌体进行了纯化,根据血清中和反应,这些噬菌体可分为4种血清型(P_(11)型、1010型、1012型及4031型)。P_(11)型和1012型噬斑小而清晰,4031型和1010型大而不清晰。观察了4种血清型的代表性噬菌体形态和它们的DNA的限制性内切酶酶切片断长度,多态性。
- 周健明朱逸忻陈孝康刘玉顺朱建华沈仁权盛祖嘉
- 关键词:螺旋霉素链霉菌噬菌体