高博
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 供职机构：中国热带农业科学院热带生物技术研究所更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 昆虫杆状病毒杀虫剂研究与应用综述被引量：6
- 2008年
- 综述了对野生型昆虫杆状病毒和重组昆虫杆状病毒杀虫剂的研究进展,以及我国昆虫杆状病毒杀虫剂的应用研究现状。
- 高博邓柳红易小平肖苏生张春发
- 关键词：昆虫杆状病毒
- AcNPV polyhedrin与cry3Aa基因的重组与重组融合蛋白在大肠菌中的表达
- 2008年
- 目的:将cry3Aa基因与斜纹夜蛾多角体蛋白(AcNPV Polyhedrin)基因重组,构建重组蛋白原核表达载体并在大肠杆菌中表达。方法:首先以PHT305a载体质粒DNA为模板,PCR扩增cry3Aa基因。再以PET30a-ph-1a载体质粒DNA为模板,PCR扩增多角体蛋白基因。将两基因片段分别连入PMD18-T克隆载体,测序鉴定。表达载体的构建分为两步,先将SacI和XhoI双酶切下来的cry3Aa基因连入表达载体pET30a,再将PMD18T-Ph经BglⅡ和SacI双酶切,所获得的ph基因片段与具有BglⅡ/SacI末端的pET30a-cry3Aa相连接,构建表达载体pET30a-cry3Aa-ph,表达载体转化进入大肠杆菌BL21(DE3)。IPTG诱导蛋白表达并纯化,SDS-PAGE分析结果。结果:cry3Aa和AcNPV Polyhedrin基因序列与报道完全一致。1mmol/LIPTG诱导4h表达的外源蛋白,经SDS-PAGE分析显示在大约103kDa处有表达产物特异条带。结论:获得cry3Aa与polyhedrine基因的重组蛋白工程菌株,为此基因应用于杀虫剂奠定了基础。
- 高博邓柳红易小平张春发
- 关键词：BTACNPVPOLYHEDRIN
- 杀鱼爱德华氏菌新型抗酸系统GadBCD的抗酸作用与致病作用
- 2024年
- 本研究鉴定了鱼类重要致病菌杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida)抗强酸系统GadBCD及其功能。通过序列分析和共转录实验表明:GadBCD系统由1个谷氨酸脱羧酶、1个谷氨酰胺酶和3个转运体组成,它们组成1个操纵子。qRT-PCR发现强酸和高温刺激细菌时gadBCD表达基本不变,但过氧化氢和宿主血清刺激时gadBCD表达显著上调。利用同源重组构建了GadBCD系统缺失突变株ΔgadP,通过比较野生株和ΔgadP的生长曲线以及酸性压力下存活率等实验,发现GadBCD系统不仅是杀鱼爱德华氏菌抗中强酸的重要参与者,也是抗强酸所必需的;通过比较野生株和ΔgadP在生物膜形成、运动性、抗宿主血清杀伤、感染细胞等方面的差异,发现GadBCD参与了细菌的毒力。综上所述,GadBCD系统是杀鱼爱德华氏菌重要的抗强酸系统,并参与了细菌的致病作用。
- 高博高博宫春光张杉杉李静林胡永华
- 关键词：抗酸性致病作用
