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严馨蕊: 作品数：10 被引量：18H指数：3; 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划国家杰出青年科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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抑制人肿瘤坏死因子活性的寡聚核苷酸: 本发明涉及一组新的抑制人肿瘤坏死因子α(TNFα)活性的寡聚核苷酸序列，包括DNA序列和RNA序列。该寡聚核苷酸序列即适配子能与TNFα特异性地结合，并能有效抑制TNFα对L929细胞的杀伤作用。因此，本发明适配子可以用...; 张智清严馨蕊郭克泰徐春晓; 文献传递

与细胞因子特异结合的寡聚核苷酸适配子及其在诊断和治疗中的应用被引量：1: 2004年; 寡聚核苷酸适配子 (Aptamer)是用指数富集式配基系统进化方法 (SELEX )筛选出的寡聚核苷酸 ,它能与靶分子特异性结合 ,具有识别和抑制靶物质生物学活性的作用。将体外筛选到的寡聚核苷酸适配子作为在动物或人体内应用的药剂 ,还需要进行化学修饰来提高它的生物利用度和在血浆中的稳定性。 2 氟、2′ 烷氧基或 2′ 氨基修饰可以提高适配子的稳定性 ,使适配子的体外半衰期延长 ;5′端交联一个高分子量的PEG分子或脂质体分子 ,可以使它的血浆清除率由 1小时提高到几小时至 1天。修饰后仍保持生物学活性的适配子可用于治疗相应靶细胞因子引起的疾病。目前 ,国内外已经筛选到了十几种细胞因子的适配子 ,其中血管内皮生长因子已经用于临床疾病的治疗。除了用于临床治疗外 ,适配子还可以用于细胞因子的诊断 ,凡是涉及抗体的诊断领域 ,几乎都可以用寡聚核苷酸适配子代替。应用大规模机械化筛选技术 ,可以在短期内筛选到大量的高特异性、高亲和力适配子。; 严馨蕊高绪文张智清; 关键词：SELEX APTAMER 细胞因子寡聚核苷酸

应用酵母双杂交系统筛选与CIKS(151-574)相互作用的蛋白质: 2003年; CIKS(ConnectiontoIKKandSAPK JNK)是最近发现的细胞蛋白 ,能激活IKK和SAPK JNK。应用酵母双杂交系统 ,将CIKS(15 1 5 74)插入载体pAS2 1作为诱铒 ,筛选人HeLa细胞MATCHMAKERcDNA文库 ,以期为阐明NFκB及JNK活性调控的分子机理提供新的线索。筛选得到 6个阳性AD 文库质粒 ,并用酵母双杂交实验验证了阳性AD 文库质粒与CIKS的相互作用。将阳性AD 文库质粒测序并对测序结果做BLAST分析 ,发现它们分别是RIKENcDNA 473340F0 3,PLAC8,CD2 7BP (Siva 1) ,CDC5L ,SnRNPsmB ,DVL2。CIKS能与这些功能各异的蛋白质相互作用 ,表明CIKS在细胞的多种生理活动中发挥作用。; 黄国锦张智清姚立红陈爱珺徐春晓朱宏建柴映爽严馨蕊金冬雁; 关键词：CDNA文库蛋白质相互作用酵母双杂交系统细胞蛋白

重组人肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(sTNFRⅡ)的纯化被引量：1: 2002年; 目的从大肠杆菌破碎液中纯化可溶性肿瘤坏死因子受体Ⅱ,获得能够中和TNF活性的受体蛋白。方法菌体破碎液经热沉淀处理后,用金属鳌合层析柱纯化重组蛋白。并对蛋白的理化特性和生物学活性进行分析。结果纯化的重组蛋白纯度大于95％,并且能中和TNF的生物学活性,抑制其对细胞的杀伤作用。结论该工艺能简便有效地纯化出TNF受体蛋白,为进一步深入研究奠定了基础。; 徐春晓姚立红祖东黄国锦严馨蕊柴映爽陈爱珺张智清; 关键词：重组人肿瘤坏死因子纯化大肠杆菌生物学活性

抑制人肿瘤坏死因子活性的寡聚核苷酸: 发明涉及一组新的抑制人肿瘤坏死因子α(TNFα)活性的寡聚核苷酸序列，包括DNA序列和RNA序列。该寡聚核苷酸序列即适配子能与TNFα特异性地结合，并能有效抑制TNFα对L929细胞的杀伤作用。因此，本发明适配子可以用来...; 张智清严馨蕊郭克泰徐春晓; 文献传递

抗TNFα的RNA适配子的筛选、鉴定及其活性研究: 本论文在应用SELEX技术从随机寡聚核苷酸库中筛选与TNFα有高亲和力的RNA适配子,并将其序列优化,鉴定其拮抗TNFα的生物学活性.对具有高亲和力的适配子进行化学修饰,以增强其稳定性及生物利用度.在此基础上,建立一套简...; 严馨蕊; 关键词：SELEX TNFΑ 适配子佐剂型关节炎; 文献传递

靶向毒素DT-VEGF的构建、表达与活性分析被引量：3: 2004年; 肿瘤的快速生长依赖于新生血管的形成。血管内皮生长因子 (VEGF)是血管发生和形成过程中的主要介质 ,其特异性受体在正常组织和肿瘤组织的表达率存在数个数量级的差异 ,因此可以将毒素分子转运至增生的肿瘤上皮组织中抑制肿瘤血管增生 ,从而抑制肿瘤的生长。将白喉毒素的前 3 89个氨基酸基因片段与VEGF165通过一短肽相连构建为融合蛋白基因 ,在大肠杆菌中表达 ,获得纯化蛋白。实验证实该融合蛋白对血管内皮细胞有特异性杀伤作用。; 柴映爽程新姚立红陈爱珺喻宏严馨蕊贾润清黄国锦张智清; 关键词：血管内皮生长因子白喉毒素融合蛋白活性肿瘤

应用酵母双杂交系统筛选hTNFα特异性结合肽: 2005年; Tumor necrosis factor (TNF) is a key cytokine in immunology system and is well known to be related with many human diseases. In order to inhibit the activity of TNF, a screening protocol was set up and 5 specific hTNFα binding peptides were obtained from yeast two-hybrid random peptide library, which lay a solid foundation for the further large scale screening and application.; 徐春晓喻宏严馨蕊黄国锦姚立红陈爱王君张智清; 关键词：酵母双杂交系统结合肽

抑制肿瘤坏死因子-α的DNA适配子的筛选与鉴定被引量：6: 2003年; 应用SELEX技术筛选能与TNF结合的DNA适配子。化学合成随机寡聚DNA库 ,以TNF为靶蛋白 ,经过12轮SELEX筛选 ,将所得产物克隆、测序。根据所测序列化学合成寡聚DNA适配子 ,用生物素_亲和素_辣根过氧化物酶显色系统检测适配子与TNF的结合活性 ;用鼠L92 9细胞检测适配子拮抗TNF活性。结果显示 ,所筛选到的寡聚DNA能与TNF_α高亲和力结合 ,并能在细胞培养中拮抗TNF_α的细胞毒活性。; 郭克泰严馨蕊黄国锦徐春晓柴映爽张智清; 关键词：肿瘤坏死因子-Α

应用核酸适配子检测细胞因子的新方法-ELONA法被引量：8: 2004年; 以人肿瘤坏死因子 (Humantumornecrosisfactor,hTNF α)特异性的核酸适配子为检测分子建立了酶联寡聚核苷酸吸附试验 (Enzyme linkedOligonucleotideassay ,ELONA)方法 ,用于hTNF α的检测。通过SELEX(SystematicEvolutionofLigandsbyExponentialEnrichment)方法从随机RNA库中筛选到与hTNF α特异结合的RNA适配子。根据其序列 ,用体外转录方法合成生物素标记的RNA适配子 ,并对其进行了氨基修饰以增加其稳定性。以hTNF α的单克隆抗体为捕获分子 ,生物素标记的hTNF α特异性RNA适配子为检测分子建立了ELONA方法 ,并对这种检测方法的灵敏度、精密度和准确度等进行了分析。同时用ELONA和ELISA方法检测了正常人血清中的hTNF α水平 ,并对检测结果进行比较。结果显示 ,ELONA方法的灵敏度为 10 0pg mL ,具有较好的精密度和准确度。ELONA法的检测结果与ELISA法检测结果基本一致。该方法适用于血清。; 严馨蕊高绪文姚立红张智清; 关键词：人肿瘤坏死因子细胞因子生物素标记