于少雄
- 作品数：11 被引量：5H指数：2
- 供职机构：中国农业科学院兰州兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划甘肃省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 羊痘病毒复制过程中脱壳机理的研究
- 张强赵志荀颜新敏吴国华王建科马维民朱海霞朱彩珠李健于少雄王曼
- 该成果包括以下几个方面的内容： 1.初步确定病毒进入宿主细胞后开始复制的时间。接种不同的羊痘病毒后，通过免疫荧光技术分析病毒感染不同时间点的的复制水平，初步确定初病毒进入宿主细胞后开始复制的时间。 2．完成羊痘病毒8个R...
- 关键词：
- 关键词：羊痘病毒药物设计
- 用于绵羊痘病毒检测的E3蛋白及其高免血清
- 本发明公开一种绵羊痘病毒检测的E3蛋白及其高免血清制备方法及用途。本发明的重组E3蛋白的制备方法是：分别采用SEQID1和SEQID2的序列为上下游引物，以绵羊痘病毒基因组DNA为模板进行PCR扩增，再通过与载体连接等得...
- 张强于少雄颜新敏赵志荀吴国华岳华李应国张光培聂福平周晓黎芦晓立李健朱海霞卢昌
- 文献传递
- 绵羊痘病毒TaqMan-MGB荧光定量PCR快速检测方法的建立
- 2016年
- 为建立快速检测绵羊痘病毒(SPPV)快速检测方法基因的方法,本研究参照SPPV ORF068基因设计并合成一对特异性引物和一条MGB探针,经条件优化,建立了SPPV TaqMan-MGB荧光定量PCR快速检测方法。结果显示,该方法可以特异性检测SPPV,而对羊口疮病毒和猪水疱病病毒等扩增结果均为阴性;而且检出下限为10拷贝/μL;组内组间重复性试验的变异系数均小于3%。上述结果显示本研究建立的TaqMan-MGB qPCR方法特异性强、灵敏度高、重复性好,能够对SPPV进行快速准确的检测。
- 李杨于少雄颜新敏吴国华李健叶奕优赵志荀朱海霞张志东张强
- 关键词：绵羊痘病毒荧光定量PCRTAQMAN-MGB探针
- 山羊痘病毒L1蛋白的原核表达及其功能分析被引量：3
- 2014年
- 为了探究山羊痘病毒L1蛋白在病毒感染Vero细胞过程中的作用,将山羊痘病毒L1蛋白基因亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体并转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,用SDS-PAGE和Western-blot分析表达产物。表达的目的蛋白经镍亲和柱纯化后免疫家兔制备了抗血清,通过蛋白封闭试验和血清抑制试验研究了纯化蛋白及其抗血清对山羊痘病毒感染的抑制作用。结果显示,成功表达了山羊痘病毒的L1蛋白,表达产物为48ku左右的重组蛋白,它能被山羊抗山羊痘病毒阳性血清识别。加入L1蛋白封闭,可使山羊痘病毒感染细胞的病变时间推迟12h,病毒与L1蛋白抗血清作用后效价下降了87.8%。结果表明,L1蛋白可能是山羊痘病毒的受体结合蛋白,并能在病毒侵入宿主细胞的过程中发挥重要作用。
- 高顺平吴国华颜新敏赵志荀于少雄朱海霞李健张强
- 关键词：山羊痘病毒L1蛋白原核表达受体结合蛋白
- 绵羊痘病毒E3L基因在Vero细胞中的表达
- 2014年
- 为了构建组成型表达绵羊痘病毒E3蛋白的真核表达载体,并检测E3蛋白在Vero细胞中瞬时表达的情况,将绵羊痘病毒E3L基因亚克隆至pcDNA3.1(+)表达载体,构建重组质粒pcDNA3.1(+)-E3L,经酶切和测序鉴定正确后转染至Vero细胞,利用Western-blot和间接免疫荧光试验(IFA)对E3蛋白的表达水平进行鉴定。结果显示,转染后第48小时可检测到E3L基因高水平的表达。这一研究结果为进一步研究绵羊痘病毒E3蛋白的生物学功能奠定了基础。
- 于少雄颜新敏赵志荀吴国华叶奕优卢昌王曼吴娜朱海霞李健张强
- 关键词：绵羊痘病毒VERO细胞真核表达
- 一种猪水疱病检测试剂盒
- 本发明公开一种用于猪水疱病检测的试剂盒。本发明的猪水疱病检测试剂盒中包括两对引物，分别是上游外引物SEQ№1，下游外引物SEQ№2，上游内引物SEQ№3和下游内引物SEQ№4。本发明与现有技术相比具有检测时不需要任何特殊...
- 张强朱海霞吴国华赵志荀颜新敏李健芦晓立于少雄卢昌王曼朱彩珠
- 文献传递
- E3蛋白:一个重要的痘苗病毒抗干扰素免疫逃避因子被引量：2
- 2013年
- 痘苗病毒能够对抗宿主的抗干扰素作用是其致病机理中的一个重要方面。E3蛋白是由痘苗病毒编码的一类重要的抗干扰素免疫逃避因子,它通过其羧基末端的dsRNA结合域与dsRNA作用后抑制干扰素产生系统中的PRK、2′,5′-OAS/RNaseL系统和RNA聚合酶Ⅲ介导的抗病毒通路,还能通过抑制ISG15的修饰活性、ADAR1催化腺苷酸转化为次黄嘌呤的编辑活性以及IRF3/7的功能进一步逃避宿主的免疫监控。本文就E3蛋白介导的抗干扰素免疫逃避策略做一简要综述。
- 于少雄颜新敏张强
- 关键词：痘苗病毒免疫逃避
- 一种猪水疱病检测试剂盒
- 本发明公开一种用于猪水疱病检测的试剂盒。本发明的猪水疱病检测试剂盒中包括两对引物，分别是上游外引物SEQ№1，下游外引物SEQ№2，上游内引物SEQ№3和下游内引物SEQ№4。本发明与现有技术相比具有检测时不需要任何特殊...
- 张强朱海霞吴国华赵志荀颜新敏李健芦晓立于少雄卢昌王曼朱彩珠
- 绵羊痘病毒E3蛋白对PKR调节作用的初步研究
- 绵羊痘由绵羊痘病毒（Sheeppox virus, SPPV）引起，以在皮肤上产生特异的痘疮为特征，发生时严重影响家畜及畜产品国际贸易，是绵羊的重要疫病之一。对SPPV全基因组测序发现，第34号开放阅读框编码与痘苗病毒（...
- 于少雄
- 关键词：绵羊痘病毒干扰素PKR
- 文献传递
- 绵羊痘病毒E3L基因的克隆和表达及其结构分析被引量：1
- 2013年
- 以绵羊痘病毒古浪株基因组DNA为模板,经PCR扩增,获得绵羊痘病毒E3L基因,将其克隆至pGEX4T-1表达载体,以大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株为宿主菌进行了诱导表达。结果显示,重组菌可以表达出大小约为46ku的重组融合蛋白,表达的蛋白绝大部分以可溶形式存在于菌体中;表达产物经GST结合树脂纯化后可得到纯度较高的目的蛋白,经Western-blot分析,所纯化的蛋白能与绵羊痘病毒阳性血清进行特异的免疫印迹反应,证明表达的蛋白具有良好的反应原性。用纯化的蛋白免疫BALB/c小鼠获得鼠抗血清,经间接ELISA测定效价为1∶100 000。
- 于少雄颜新敏吴国华赵志荀卢昌叶奕优朱海霞李健张强
- 关键词：痘苗病毒绵羊痘病毒
