刘洪良
- 作品数：14 被引量：48H指数：4
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- 慢性硬膜下血肿术后复发的相关因素分析
- 目的探讨影响慢性硬膜下血肿(CSDH)术后复发的因素。方法回顾我科自2006年3月至2010年9月手术治疗243例CSDH患者的临床特点,影像学表现,手术方法,术后治疗,Logistic回归分析术后复发相关因素。结果术后...
- 杨彬刘洪良刘振林
- 关键词：慢性硬膜下血肿复发
- 文献传递
- 亚低温对脑缺血大鼠海马神经元中类泛素蛋白表达的调控被引量：2
- 2015年
- 目的 研究亚低温对大鼠海马神经元中类泛素蛋白（SUMO）表达的调控作用,探索亚低温对脑缺血后神经元的保护机制.方法 原代培养孕龄18 dSD大鼠的海马神经元,培养后12 d,分为对照组、氧糖剥夺（OGD）组、OGD＋亚低温组.37℃或亚低温（33℃）条件下培养OGD神经元24h.采用Western blot法检测SUMO-1和SUMO-2/3的表达水平,ELISA法检测乳酸脱氢酶（LDH）含量,原位凋亡法检测凋亡细胞数量.取SD大鼠36只,按完全随机化原则分为假手术组、大脑中动脉阻塞（MCAO）组及MCAO＋亚低温组,每组12只.线栓法建立MCAO模型,比较3组模型制作后第1、7、14及21天的神经功能缺损评分;免疫荧光法检测海马区神经元中SUMO-1和SUMO-2/3的表达定位.结果 （1）对照组、OGD组及OGD＋亚低温组的LDH分别为（9.85±2.47） pg/L、（586.29±51.56） μg/L、（317.54 ±42.33） pg/L,细胞凋亡率为（0.27±0.05）％、（29.25 ±6.07）％、（17.44±4.59）％,P值均＜ 0.01.3组间游离及共轭SUMO-1蛋白表达水平差异均无统计学意义;与OGD组比较,OGD＋亚低温组游离SUMO-2/3的表达水平降低（P＜0.05）,共轭SUMO-2/3表达水平升高（P＜0.01）,且均高于对照组（P＜0.01）.（2）第7、14天MCAO＋亚低温组神经功能缺损评分均低于MCAO组（P＜0.05）,至第21天两组差异无统计学意义.MCAO组脑梗死面积为（34.51±7.44） mm2,MCAO＋亚低温组为（23.67-±5.49） mm2 （P ＜0.05）;假手术组、MCAO组及MCAO＋亚低温组SUMO-1的表达相近;与假手术组比较,MCAO组细胞核的SUMO-2/3表达明显增高,MCAO＋亚低温组增高趋势更明显.结论 大鼠亚低温神经保护机制可能与提高脑缺血后SUMO-2/3与靶蛋白的结合能力有关.
- 刘洪良王彤宇刘振林陈镭杨巍盛华新姜忠敏刘晓智
- 关键词：脑缺血海马神经元
- 外周血泌乳素水平与T淋巴细胞亚群的相关性研究
- 2010年
- 目的本通过研究外周血PRL水平与T淋巴细胞亚群变化的相关性,以探讨泌乳素(PRL)与免疫系统变化的关系。方法检测100例垂体腺瘤患者及56例体检健康人外周血中CD4+CD25+、CD3+、CD3+CD4+及CD3+CD8+的T淋巴细胞水平;并测定其外周血中PRL水平。结果病例组外周血CD3+T淋巴细胞显著低于健康人组(P<0.0001);外周血CD3+CD4+T淋巴细胞及CD3+CD8+T淋巴细胞病例组与健康人组均无显著差异(P>0.05);病例组外周血CD4+CD25+T淋巴细胞为显著高于健康人组(P<0.0001)。其中病例组中PRL<100ng/ml组外周血CD3+T淋巴细胞及CD3+CD4+T淋巴细胞均显著低于PRL>100ng/ml组(P<0.05);外周血CD3+CD8+T淋巴细胞及CD4+CD25+T淋巴细胞,病例组与健康人组均无显著差异(P>0.05)。结论 CD3+T淋巴细胞的减少可能是垂体肿瘤细胞本身刺激CD4+CD25+T淋巴细胞的增生,导致外周血IL-2减少,从而抑制了T淋巴细胞的活化和增殖。外周血PRL>100ng/ml组外周血PRL显著升高,通过刺激各种细胞因子的分泌,而进一步促进T淋巴细胞的活化及增殖,同时,外周血中高PRL可直接抑制外周血T淋巴细胞的凋亡。
- 于晶陈镭苏治国刘洪良赵玉军刘振林
- 关键词：泌乳素T淋巴细胞垂体腺瘤
- ts-SV40LT抗原转基因干细胞增殖活性的温度调控机制分析被引量：2
- 2012年
- 目的:研究温度敏感性猿猴病毒40大T抗原(ts-SV40LT)转基因干细胞增殖活性的温度调控机制。方法:用含ts-SV40LT抗原的表达质粒转染脐带间充质干细胞(UCMSCs),将其分别置于33℃和37℃培养,细胞免疫荧光方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)活性,PCR-ELISA端粒酶检测法检测端粒酶活性及细胞周期,WesternBlot法检测周期素(Cyclin)D1、CyclinE、周期素依赖性蛋白激酶(CDK)2、CDK4、CDK6、P16和P21的蛋白表达情况,免疫荧光方法检测巢蛋白(Nestin)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果:细胞在33℃时培养24、48、72h的PCNA阳性表达百分率均高于37℃时,差异有统计学意义(P<0.01)。转染tsSV40LT抗原基因后,细胞在33℃培养箱时的端粒酶活性和PIx值高于37℃时,差异有统计学意义(P<0.01)。33℃时的CyclinD1、CyclinE、CDK2、CDK4、CDK6及Nestin表达量高于37℃时,P16、P21、NSE和GFAP的表达量低于37℃时,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:通过tsSV40LT抗原基因的有效转染可实现干细胞在不同温度环境下的增殖调控。
- 刘洪良刘晓智刘振林姜忠敏盛凤李罡
- 关键词：间质干细胞转基因周期细胞周期蛋白质依赖激酶类磷酸丙酮酸水合酶神经胶质原纤维酸性蛋白质
- 脑源性神经营养因子对低温移植干细胞的环境营养与促神经分化作用被引量：2
- 2011年
- 我们利用脑源性神经营养因子（BDNF）的营养神经及其易于诱导干细胞向神经元分化的双重作用机制，观察BDNF对亚低温环境下移植干细胞的环境营养作用以及其促进向神经元分化的体内实际效果。
- 姜忠敏刘晓智刘振林刘洪良李宝江宋军赵玉军
- 关键词：脑源性神经营养因子移植干细胞分化作用促神经神经元分化营养神经
- 胶质瘤中miR-34a靶向作用于MAPK13 mRNA并抑制其表达被引量：1
- 2011年
- 目的预测并验证miR-34a与促分裂原活化蛋白激酶13(MAPK13)的靶向作用关系,寻找胶质瘤基因治疗的新方法。方法将miR-34a相似物转染入胶质瘤细胞A172中,实时定量PCR检测miR-34a在胶质瘤中的表达。目的基因的mRNA水平用实时定量PCR来评估,蛋白水平分别用荧光素酶试验和蛋白印迹来评估。miR-34a与目的基因3'非翻译区(3'UTR)的结合用MAPK13报告实验确认。结果 miR-34a相似物转染入胶质瘤细胞A172后在A172细胞中大量表达,实时定量PCR、蛋白印迹和免疫荧光证明miR-34a降低MAPK13的表达量,MAPK13荧光素酶报告实验显示,MAPK13荧光素酶活性被miR-34a降低。结论 miR-34a通过与MAPK13 3'UTR区的特异结合作用发挥对胶质瘤责任基因MAPK13的靶向沉默作用,可能成为未来胶质瘤基因治疗的新选择。
- 王亮黄凯刘晓智李罡苏治国王骏飞赵玉军刘洪良陈镭
- 关键词：神经胶质瘤基因治疗
- 慢性硬膜下血肿术后复发的相关因素分析被引量：15
- 2012年
- 目的探讨影响慢性硬膜下血肿(CSDH)术后复发的因素。方法回顾我科自2006年3月至2010年9月手术治疗243例CSDH患者的临床特点、影像学表现、手术方法及术后处理,Logistic回归分析术后复发相关因素。结果术后复发37例,复发率为15.23%。复发的37例患者平均年龄70岁。其中因凝血功能障碍复发者28例;头颅CT血肿为高密度者复发6例,等密度者复发14例,低密度者复发4例,混杂密度者复发13例;因术后大量颅内积气复发者3例;血肿位于单侧复发19例,双侧复发18例。结论患者的年龄,凝血功能障碍,血肿的性质、部位,术后颅内积气和引流量的多少影响CSDH患者的预后。
- 杨彬刘洪良刘振林
- 关键词：慢性硬膜下血肿复发
- 小脑血管畸形的诊断分析(附14例报告)
- 2001年
- 我院外科自1998年以来经手术治疗证实的小脑血管畸形14例,对小脑血管畸形的诊断分析报告如下.
1 资料与方法
1.1 一般资料本组14例,男9例,女5例.年龄11～66岁,平均31岁.病程3小时～3年,急性发病7例,亚急性发病4例,缓慢而进行性加重3例.
- 刘洪良
- 关键词：小脑脑动静脉畸形CT病例报告
- 叶酸/聚酰胺-胺作为miR-7基因载体的胶质瘤靶向性研究被引量：1
- 2012年
- 目的检测叶酸/聚酰胺-胺(FA/PAMAM)作为miR-7基因载体的细胞转染效率及其胶质瘤靶向功能,为研发高效小分子靶向投递药物奠定基础。方法透析法制备FA/PAMAM络合物,透射电子显微镜观察粒子形貌;以其为载体转染miR-7至人脑胶质瘤细胞系U251,荧光显微镜观察络合物转染效率,qRT-PCR方法检测miR-7水平;制作去胸腺小鼠颅内U251胶质瘤模型,分别经尾静脉、颈内动脉及肿瘤原位进行络合物移植,48 h后取脑制作冰冻切片,荧光显微镜观察络合物在肿瘤内的聚集程度;蛋白印记(Western blot)法检测miR-7靶基因EGFR和细胞增殖活性抗原(PCNA)的蛋白表达。结果粒子形貌规整,与U251细胞共培养48 h后可获得高效转染,并显著提高miR-7水平。经尾静脉、颈内动脉及肿瘤原位三种途径移植后获得的冰冻切片中均可发现络合物粒子在肿瘤部位的聚集,但聚集程度为尾静脉<颈内动脉<肿瘤原位。Western blot结果示EGFR和PCNA水平较对照组均有不同程度下降(P<0.05)。结论 FA/PAMAM能够高效投递miR-7基因至体内、外胶质瘤细胞,有望成为一种新的高效小分子靶向投递药物进行胶质瘤基因治疗。
- 刘振林李罡苏治国王骏飞赵玉军陈镭刘洪良姜忠敏刘晓智
- 关键词：胶质瘤微小RNA表皮生长因子受体
- miR-7沉默EGFR/PI3K通路逆转脑胶质瘤U251细胞的恶性表型被引量：11
- 2011年
- 目的:探讨利用微RNA(microRNA-7,miR-7)靶向沉默表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)/磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol kinase-3,PI3K)通路途径逆转脑胶质瘤的恶性表型。方法:利用脂质体转染法将带有miR-7基因序列的表达质粒转入人脑胶质瘤细胞株U251中;采用实时荧光定量-PCR(real-time fluorogenic quantitative-PCR,RFQ-PCR)方法检测转染细胞中miR-7的表达水平;免疫细胞化学法和蛋白质印迹法检测EGFR、PI3K和AKT2蛋白的表达情况;绘制细胞生长曲线,FCM法检测细胞周期变化,Transwell小室法检测瘤细胞迁移能力,软琼脂克隆形成实验检测肿瘤细胞致瘤性。结果:RFQ-PCR结果显示,miR-7基因转染组细胞中miR-7水平明显高于对照组和无义序列组;蛋白质印迹法检测结果显示,转染组U251细胞中EGFR、PI3K和AKT2蛋白的水平较对照组均有明显降低(P<0.05);U251细胞增殖速度减慢,处于S期的细胞所占比例减少,细胞迁移及软琼脂克隆形成能力均有明显降低(P<0.05)。结论:转染miR-7可有效沉默胶质瘤U251细胞中EGFR/PI3K通路主要成员蛋白的表达,进而逆转其恶性表型,有望成为一种新的胶质瘤基因治疗方法。
- 刘晓智姜忠敏陈镭刘洪良史万超张合亮刘振林
- 关键词：神经胶质瘤U251细胞
