张胤晟
- 作品数：8 被引量：5H指数：2
- 供职机构：苏州大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 快速高效构建小鼠体内成像肿瘤模型的方法学平台被引量：3
- 2013年
- 目的建立小鼠肿瘤模型,并用体内成像的方法进行检测,降低传统方法中的系统误差与人为测量错误,提高模型的准确性与客观性。方法构建萤火虫素酶的慢病毒表达载体,体外包装能表达萤火虫素酶的慢病毒颗粒。用病毒颗粒转染目标细胞,筛选出稳定表达萤火虫素酶的目标细胞系。体外运用双荧光素酶分析系统进行质控检测,通过后建立小鼠肿瘤模型,最后使用活体成像的方法对小鼠肿瘤模型中肿瘤的大小进行定量分析,以评估小鼠肿瘤模型的恶化程度。结果成功构建含有萤火虫素酶基因的慢病毒质粒;包装能正确表达具有功能活性萤火虫素酶的慢病毒颗粒;使用病毒颗粒感染目标细胞并筛选出能表达萤火虫素酶的稳转细胞系;建立小鼠皮下肿瘤模型,并利用活体成像的方法对肿瘤大小进行定量分析。结论通过该种方法可以建立表达萤火虫素酶的稳转细胞系,利用体内成像的检测方法可以准确的对肿瘤模型的发生发展进行评估。
- 张胤晟林丹丹雷蕾胡博王仲娟刘海燕
- 关键词：慢病毒活体成像
- 入核型IL-1αpropiece分子调控机制研究
- 第一部分 IL-1α表达系统的构建 目的：IL-1α基因的N端含有核定位序列，能够进入细胞核，但入核型IL-1α具体功能机制并不清楚。研究表明白血病细胞中IL-1α水平异常升高。为了探寻入核型IL-1α propiec...
- 张胤晟
- 关键词：急性淋巴细胞白血病生物学功能
- 文献传递
- 辐照对水流动力学注射介导的小鼠体内基因表达的影响
- 2011年
- 目的探寻辐照对水流动力学注射(HGT)介导的荧光素酶报告基因在小鼠体内的表达影响,从而评估水流动力学注射方法在小鼠造血干细胞移植模型中应用的有效性。方法将实验鼠分为辐照组和非辐照组,尾静脉大体积快速注射带有荧光素酶报告基因的真核表达质粒PGL3-luc。于注射后6h腹腔注射荧光素酶底物,并通过活体动物体内光学成像系统检测基因表达的初始水平。将辐照组小鼠进行700c Gy非清髓性全身照射,并于水流动力学注射后12、24、48、72、96、120 h通过活体动物体内光学成像系统对两实验组小鼠体内目的基因的表达水平进行监测。结果通过尾静脉进行水流动力学注射的PGL3-luc质粒在注射后6h于小鼠肝脏大量表达,其平均表达水平为(3739±924.8)相对荧光单位(RLU)/(sec·mg)蛋白。在各个时间监测点辐照组与非辐照组相比实验鼠体内基因表达水平差异均有统计学意义(均P>0.05),其表达水平均于水流动力学注射72 h后显著降低。结论小鼠移植前的辐照预处理对水流动力学注射介导的基因在小鼠体内的表达并无影响,该种新型基因转移表达方法可以有效地应用于小鼠造血干细胞移植模型中。
- 包光明胡博张胤晟赵雷卞士中刘海燕
- 关键词：辐照造血干细胞移植
- IL-1α不同功能亚型表达系统的构建及其在急性淋巴细胞白血病细胞系中的生物学功能研究
- 第一部分，IL-1α不同功能亚型表达系统的构建 目的：IL-1α为IL-1家族的主要成员，它在炎症与肿瘤发生中都可能发挥重要的作用。然而，其免疫调节作用及机制还不十分明确。有研究发现IL-1α前体可以入核，但其具体的功...
- 张胤晟
- 关键词：生物学功能
- 文献传递
- 小鼠白细胞介素15慢病毒载体的构建和表达被引量：2
- 2010年
- 目的:克隆小鼠白细胞介素15(IL-15)基因,并构建可表达小鼠IL-15基因的重组慢病毒。方法:根据小鼠IL-15基因序列以及慢病毒穿梭载体相应的酶切位点设计合成PCR引物;提取小鼠脾脏总RNA,逆转录PCR扩增小鼠IL-15基因的编码区;克隆小鼠IL-15基因的编码区,并进行基因测序;构建含有IL-15基因的慢病毒穿梭质粒,并与其它包装质粒一起感染293T细胞;获得病毒颗粒并感染人慢性髓系白血病细胞MEG,Western Blot检测IL-15基因在MEG细胞中的表达。结果:含有小鼠IL-15基因编码区的慢病毒穿梭质粒构建成功,基因测序结果完全正确;含有小鼠IL-15基因的慢病毒载体包装成功;所得病毒上清可成功感染MEG细胞,流式细胞术检测阳性率可达98%;Western Blot结果证明小鼠IL-15基因在MEG细胞中正常表达。结论:成功扩增、克隆了小鼠IL-15基因,并建立其慢病毒表达系统,从而为后续的基础及应用研究工作奠定了基础。
- 胡博林丹丹张胤晟包光明单琳赵昀刘海燕
- 关键词：白细胞介素15慢病毒载体小鼠
- 羽扇豆醇对白血病细胞株增殖和凋亡作用的影响
- 2011年
- 目的研究羽扇豆醇对人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞的增殖和凋亡作用。方法以不加药物处理为对照组,设置5个羽扇豆醇浓度梯度分别处理人髓系、淋系白血病细胞,采用MTT法检测细胞活力及增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果随着羽扇豆醇浓度的升高,细胞增殖明显受到抑制。当浓度达到150μmol/L时,4种细胞都呈现出明显的增殖抑制作用(均P<0.05);与对照组相比,羽扇豆醇组细胞凋亡率明显增加(P<0.05)。结论羽扇豆醇可显著抑制人髓系K562、NB4、SHI-01及淋系Jurkat白血病细胞增殖并诱导其凋亡。
- 单琳林丹丹张胤晟薛智谋刘海燕
- 关键词：羽扇豆醇髓系白血病细胞增殖凋亡
- 携带TGF-βⅡ型受体及NKG2D融合基因的NK-92细胞生物学特性研究
- 2013年
- 目的构建携带TGF-βreceptorⅡ(TGF-βRⅡ)胞外段跨膜区及NKG2D胞内段融合基因的NK-92细胞,并检测其生物学特性。方法通过RT-PCR从人外周血淋巴细胞中扩增出TGF-βreceptorⅡ胞外段跨膜区及NKG2D胞内段基因;利用PCR的方法将2段基因融合,并构建含有融合基因的慢病毒穿梭质粒;将该质粒与包装质粒共转染293T细胞,获得慢病毒颗粒并感染NK-92细胞系,筛选出稳定转染的NK-92细胞系;采用流式细胞术检测目的基因在转染后的NK-92细胞系中的表达,用CCK-8的方法检测24 h和48 h时NK-92-TN的存活能力,同时用Transwell的方法检测NK-92-TN的迁移能力。结果测序表明,成功获得了TGF-βRⅡ胞外段跨膜区与NKG2D胞内段的融合基因;获得了重组慢病毒;通过筛选得到了可稳定表达融合基因的NK-92细胞系,同时NK-92-TN的存活能力和迁移能力要明显优于对照组。结论成功建立表达TN的NK-92细胞系,并且发现NK-92-TN的存活能力和迁移能力明显优于对照组,从而为NK-92-TN细胞的体内生物学功能的研究工作奠定了基础。
- 王仲娟林丹丹张胤晟赵李祥刘海燕
- 关键词：NKG2DNK-92
- 微环DNA诱导表达方法的优化和体内表达
- 2016年
- 目的通过对微环DNA的表达步骤进行优化来提高微环DNA的诱导表达量以及降低诱导表达后的母环污染,并利用微环DNA构建一个能进行体内活体成像的表达系统。方法通过改变诱导培养基中加入L-阿拉伯糖的次数以及改变培养时间来提高DNA表达量、降低母环污染。通过Furin和2A将靶基因和萤火虫素酶基因(luciferase)连接到微环DNA中,再利用高压水流动力学注射的方法使目的基因在小鼠体内表达,通过活体成像检测萤火虫素酶的表达信号来监控和检测目的基因的表达。结果成功提高了微环DNA的表达量,降低了质粒的母环污染,建立可通过活体成像系统鉴定靶基因表达的系统。结论通过对微环DNA表达过程的优化大大提高了DNA的表达量,并且可以通过构建的微环DNA系统来监测靶基因在体内的表达情况。
- 雷蕾林丹丹张胤晟胡博刘海燕
- 关键词：活体成像
