肖剑文 作品数:108 被引量:396 H指数:10 供职机构: 重庆医科大学附属儿童医院 更多>> 发文基金: 重庆市杰出青年科学基金 重庆市教委科研基金 重庆市科技计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 文化科学 自动化与计算机技术 更多>>
miR-19b在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及临床意义 被引量:7 2012年 目的研究miR-19b在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)中的表达及其与ALL临床特征和PTEN mRNA表达的相关性。方法采用实时定量PCR的方法检测67例儿童ALL(初诊组38例、完全缓解组20例、难治复发组9例)骨髓单个核细胞(BMMNC)中miR-19b的表达,分析其表达与临床特征及PTEN mRNA表达水平的关系。以15例原发性免疫性血小板减少症(ITP)患儿作为对照组。结果 miR-19b在初诊组和难治复发组的表达量显著高于完全缓解组和对照组(P<0.01)。动态观察6例ALL患儿发现完全缓解后miR-19b表达量较初诊时显著降低(P<0.05)。miR-19b高表达与外周血高WBC计数(≥50×109/L)、危险度分型(中、高危)、脾肿大、BCR-ABL融合基因阳性有相关性(P<0.05),与发病年龄、性别、免疫分型、形态学分型、MLL-AF4融合基因、肝及淋巴结肿大、早期泼尼松反应等因素无相关性(P>0.05)。miR-19b与PTEN mRNA表达量无相关性(r=0.107,P>0.05)。结论 miR-19b可能在儿童ALL发生、发展及不良预后中发挥一定作用,未发现miR-19b表达量同PTEN mRNA的表达量存在相关性。 陈飞 宪莹 苏庸春 温贤浩 肖剑文 罗庆 梁绍燕 于洁关键词:微RNAS PTEN 急性淋巴细胞白血病 儿童 再生障碍性贫血患儿骨髓间充质干细胞免疫调节作用的研究 被引量:4 2009年 目的研究再生障碍性贫血(以下简称再障)患儿骨髓间充质干细胞(MSC)体外对淋巴细胞的免疫抑制能力。方法2006年4月至2007年10月重庆医科大学附属儿童医院血液科采集24例再障患儿和11例对照儿童的骨髓标本,分离、培养和扩增MSC,观察细胞形态及增殖能力,计数分析骨髓MSC成纤维细胞集落形成单位;采用混合淋巴细胞反应检测骨髓MSC体外对淋巴细胞的免疫抑制能力;采用逆转录PCR(RT-PCR)的方法检测骨髓MSC细胞内转化生长因子-β1(TGF-β1)和肝细胞生长因子(HGF) mRNA的表达水平;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测骨髓MSC分泌的TGF-β1和HGF的浓度。结果(1)再障患儿骨髓MSC呈典型的成纤维样细胞形态,成纤维集落形成单位(CFU-F)计数显著低于对照组,差异有统计学意义(t=-2.74,P<0.05);(2)再障患儿骨髓MSC免疫抑制率显著低于对照组,差异有统计学意义(t=-3.48,P<0.01);(3)再障患儿骨髓MSC细胞内TGF-β1 mRNA表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(t=-3.34,P<0.01);HGF mRNA表达水平显著低于对照组,差异有统计学意义(t=-2.54,P<0.05);(4)再障患儿骨髓MSC培养上清中TGF-β1浓度显著低于对照组,差异有统计学意义(t=-2.48,P<0.05);再障患儿骨髓MSC培养上清中HGF浓度显著低于对照组,差异有统计学意义(t=-2.46,P<0.05)。结论再障患儿骨髓MSC的免疫抑制能力较对照组显著降低,其发生机制可能与再障患儿骨髓MSC增殖能力减低、细胞表达和分泌TGF-β1、HGF减少有关。 吴艳 于洁 张磊 罗庆 肖剑文 刘筱梅 宪莹 戴碧涛 徐酉华 苏庸春关键词:再生障碍性贫血 间充质干细胞 免疫抑制 肝细胞生长因子 转化生长因子-Β1 71例儿童急性髓系白血病多参数流式细胞术免疫表型分析 被引量:4 2006年 目的为了解儿童急性髓系白血病(acutemyeloidleukemia,AML)免疫表型特征,分析儿童AML不同亚型抗原表达的差异,并探讨其诊断价值。方法采用三色FCMCD45/SSC双参数散点图设门方法,对71例患者幼稚细胞表面及胞浆内分化抗原进行分析,结合FAB分类进行比较分析。结果在儿童急性髓系白血病患者中,CD33和CD13的表达最常见,分别达97.2%和94.4%,其次为HLADR(69%)。57.7%的病例伴有淋系抗原表达,以CD19表达最常见(36.6%),其次为CD7(28.2%),未见CD20的表达。3例M0患儿经免疫分型确诊。结论结合FAB分类,多参数流式细胞术有助于对AML的准确诊断和分型。FAB不同型别具有不同的免疫表型特征。 苏庸春 李欣 于洁 戴碧涛 徐酉华 肖剑文关键词:急性髓系白血病 免疫表型 多参数流式细胞术 儿童 婴幼儿与3岁以上儿童特发性血小板减少性紫癜的临床对比 被引量:10 2009年 目的比较婴幼儿与3岁以上儿童特发性血小板减少性紫癜(ITP)的临床特征、短期治疗反应及疗效。方法收集2006年10月至2008年10月在重庆医科大学附属儿童医院首次诊断并接受相应治疗的ITP患儿190例,按年龄分为婴幼儿组和3岁以上儿童组,回顾性分析比较两组ITP患儿的临床特征和疗效。结果(1)婴幼儿组男性患儿所占比例高于3岁以上儿童组,差异有统计学意义(P=0.031)。(2)婴幼儿组以病毒性肠炎为诱因的比例显著高于3岁以上儿童组,差异有统计学意义(P=0.001);婴幼儿组以疫苗接种为诱因的比例显著高于3岁以上儿童组,差异有统计学意义(P=0.045)。(3)婴幼儿组鼻衄发生率显著低于3岁以上儿童组,差异有统计学意义(P<0.001);婴幼儿组失血性贫血发生率显著低于3岁以上儿童组,差异有统计学意义(P=0.001)。(4)EB病毒(EBV)-IgM和巨细胞病毒(CMV-IgM)血清学阳性率在婴幼儿组与3岁以上儿童组比较,差异有统计学意义(P=0.016,P<0.001)。(5)婴幼儿组骨髓巨核细胞中位数和增高比例均显著低于3岁以上儿童组,差异有统计学意义(Z=2.804,P=0.005;χ2=10.011,P=0.002)。(6)激素组婴幼儿血小板升至正常时间显著短于3岁以上儿童组,差异有统计学意义(P<0.001);激素+丙种球蛋白组(丙球)婴幼儿血小板升至正常时间显著短于3岁以上儿童组,差异有统计学意义(P<0.001);激素组和激素+丙球组中,婴幼儿短期疗效都分别显著好于3岁以上儿童组,差异有统计学意义(P=0.0410,P=0.0075)。结论婴幼儿与3岁以上儿童ITP比较,男性比例高,出血部位单一、出血程度轻。疫苗接种与病毒性肠炎是重要诱因,巨细胞病毒感染可能在婴幼儿ITP的发生中起着重要作用。巨核细胞中位数及增高比例低,治疗后血小板上升速度快、短期疗效好。激素与激素+丙球治疗均能有效的提升血小板的数量,激素+丙球治疗血小板上升速度快于单用激素治� 刘巧 宪莹 戴碧涛 徐酉华 肖剑文 王世一 陆玲玲 于洁关键词:特发性血小板减少性紫癜 婴幼儿 病毒 液相色谱-质谱联用法监测急性淋巴细胞白血病患儿中甲氨蝶呤血药浓度及临床应用 被引量:1 2012年 目的:建立以液相色谱-质谱联用(LC/MS)法测定血清中甲氨蝶呤(MTX)的方法并用于临床适时监测,进一步探讨MTX剂量-血药浓度与药物不良反应(ADR)发生的相关性。方法:建立以ESI离子源,SCI(+)扫描方式,离解电压1.1 KV,雾化氮气1.5 L·min-1,干燥氮气15 L·min-1,干燥温度200℃,模块加热温度400℃,加氢目标离子m/z455,碎片离子455,456的LC/MS法测定血清中MTX的方法并进行方法学验证,对59例临床ALL患儿接受大剂量甲氨蝶呤(HD-MTX)化疗后48,72,96 h时间点271例次MTX血药浓度监测和ADR发生情况观察。结果:方法的回归方程Y=(6.139 28E7)X-528120(n=6,r=0.999 7),MTX血清浓度在0.01~160μmol·L-1范围线性良好,最低定量限0.01μmol·L-1(S/N≥3),通过方法学验证符合临床生物样本分析要求;对HD-MTX患儿化疗后48 h与72 h点血药浓度监测。结果组内两监测点血药浓度变异较大(CV%>97%),经独立样本t检验存在显著性差异(P=0.000),然而不同病理诊断分组间两时间点血药浓度无显著性差异(P>0.05);MTX剂量与ADR发生经多元变量非参数的偏相关分析结果相关系数rs=0.133。结论:该检测方法具有快捷、准确、痕量测定血中MTX浓度的特点,可用于临床及科研MTX血药浓度的监测;四氢叶酸钙(CF)的救援应通过监测MTX血药浓度并根据结果调整剂量,监测C48h和C72h点用于预判MTX蓄积中毒并指导CF救援有一定的临床实际意义;通过MTX监测血药浓度制定个体治疗方案,ADR发生与MTX剂量之间并非强相关。 刘彬 王刚 何翠瑶 吴青 袁拥华 李思 肖剑文关键词:血药浓度监测 急性淋巴细胞白血病 大剂量甲氨蝶呤 干扰素γ受体1缺陷患儿的临床特征及功能、基因分析 被引量:3 2014年 目的探讨1例疑似孟德尔遗传易感分枝杆菌病(Mendelian susceptibility to mycobacterial disease,MSMD)患儿的临床特征,检测IL-12/23-IFN-γ通路的完整性,并进行IFN-γ受体1(IFNGR1)基因分析。方法根据患儿的临床表现及常规的免疫学筛查试验排除常见原发性免疫缺陷病,Q-RT-PCR在mRNA水平检测患儿及健康对照者IL-12/23-IFN-γ通路的完整性,通过PCR及RT-PCR分别对患儿及其父母的IFNGR1基因进行扩增并测序。结果患儿有播散性卡介苗(BCG)病及全身多系统损害的表现。患儿全血经BCG和IFN-γ共同刺激48 h后IL-12B的表达水平与单独BCG刺激后比较明显降低(P〈0.05);基因测序发现患儿IFNGR1第6外显子818-821位杂合缺失4个碱基(c.818-821 del TTAA),使第276位脯氨酸突变为终止密码(p.Asn274fsX276),父母此位点正常。结论 MSMD患儿临床特征为BCG病及全身多系统损害。Q-RT-PCR检测IL-12/23-IFN-γ通路完整性是一种有效的筛查MSMD的手段;IFNGR1突变是引起本例患儿发生上述临床特征的根本原因。 胥焕 蒋利萍 邢超 刘霞 肖剑文关键词:卡介苗 5例儿童A型血友病合并凝血因子Ⅷ抑制物生成临床回顾性分析 被引量:2 2022年 目的:通过回顾性分析5例血友病A(HA)合并凝血因子Ⅷ(FⅧ)抑制物生成的病例资料,以指导制定HA治疗方案。方法:回顾性分析5例HA合并FⅧ抑制物临床特征,采用聚合酶链式反应(PCR)技术及DNA测序分析检测血友病相关基因突变情况。结果:5例患儿均为男性,均于外院接受基因重组FⅧ按需治疗。5例均进行患儿及母亲HA基因检查,为母亲遗传所致。发现抑制物时中位年龄24个月。出血停止后5例均不愿诱导免疫耐受治疗。病例1小剂量艾美赛珠单抗预防,病例3及病例4接受四因子凝血酶原复合物按需治疗,病例2继续第三代基因重组FⅧ标准预防,病例5第三代基因重组FⅧ低剂量预防治疗。随访至2021年1月,随访时间(7.60±1.75)月,3例高滴度患儿抑制物仍>5 BU/mL,2例患儿抑制物已恢复正常。结论:重型HA患儿接受FⅧ治疗后均可能出现抑制物,抑制物的产生与遗传及治疗因素均有密切关系。HA伴抑制物患儿发生出血事件后,应根据患儿出血情况、家庭具体情况尽可能选择恰当的止血方案,降低残疾及死亡风险。 易维佳 郭玉霞 曾星 屈泽欣 肖剑文关键词:血友病A 造血干细胞移植治疗Wiskott-Aldrich综合征一例报告及文献复习 被引量:10 2009年 目的Wiskott—Aldrich综合征(WAS)是一种原发性免疫缺陷性疾病,严重病例预后不良。采用人类白细胞抗原(HLA)全相合的同胞骨髓移植成功治疗1例,特此总结并进行文献复习。方法采用流式细胞仪检测WAS蛋白(WASP)表达和基因分析确诊WAS。患儿姐姐为人类白细胞抗原全相合骨髓供者,所采集骨髓单个核细胞数为4.38×10^8/kg,CD34^+细胞3.78×10^6/kg患儿体重。采用白消安/环磷酰胺全清髓的预处理方案,环孢菌素单用预防移植物抗宿主病。移植后检测WASP表达和短串联重复序列(STR)作为植入证据。结果患儿诊断:WAS,WASP(-IVS9+2T〉C,WASP阴性)。白消安/环磷酰胺预处理后骨髓回输;移植13d中性粒细胞(ANC)绝对值0.8×10^9/L,移植15d起血小板〉50×10^9/L,1个月后正常。移植50d起患儿WASP表达阳性,STR显示为供者DNA完全嵌合;随访至移植后510d,患儿健康,WASP稳定表达。结论结合病例和文献复习,人类白细胞抗原相合同胞骨髓移植治疗典型WAS近期预后较好。 于洁 管贤敏 戴碧涛 蒋莉萍 苏庸春 肖剑文 刘筱梅 宪莹 徐酉华 杨锡强 赵晓东关键词:造血干细胞移植 基因 儿童急性髓系白血病免疫表型分析 目的:流式细胞术免疫表型分析已成为白血病诊断和分型的重要工具。FCM CD45/侧散射(SSC) 双参数散点图设门方法可清楚地识别白血病细胞克隆,排除了正常细胞对免疫分型的影响,使得白血病免疫分型结果更为准确可靠。本研究... 苏庸春 李欣 于洁 戴碧涛 徐酉华 肖剑文文献传递 163例儿童急性髓系白血病临床和诊治分析 目的:分析重庆医科大学附属儿童医院新诊急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)病例资料,初步评估中华医学会儿科学分会血液学组AML-2006诊疗建议的疗效.
方法:对重庆医科大学附... 于洁 张银娟 宪莹 肖剑文 苏庸春 温贤浩 管贤敏关键词:长期生存率 文献传递