马亮
- 作品数：13 被引量：18H指数：2
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省卫生厅面上基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 检测巨细胞病毒UL54和UL97基因耐药突变的巢式PCR引物和方法
- 本发明属于病毒基因组学和药物基因组学领域，具体涉及一种检测巨细胞病毒UL54和UL97基因耐药突变的巢式PCR引物和方法。首先公开了一种用于巢式PCR方法检测巨细胞病毒的引物组，包括长引物组、短引物组和通用测序引物组；所...
- 丁子轩陈苏宁沈宏杰解珺丹姚红马亮邱桥成江艾蕊王曼
- CD40及MMPs在CEA斑块中的表达及对斑块稳定性的研究
- 张白惠品晶国风马亮吕琦颜燕红黄亚波惠国桢
- 关键词：颈动脉内膜剥脱术斑块稳定性CD40
- 续断皂苷抗白血病作用的机制探讨被引量：6
- 2012年
- 目的探讨续断皂苷(akebia saponinD,ASD)抗白血病细胞及其作用机制。方法用不同剂量(10、30、50、100μg/mL)皂苷处理人急性白血病细胞株U937细胞和人早幼粒白血病细胞株HL-60细胞,采用MTT比色法观察ASD对白血病细胞的作用。以Annexin-Ⅴ染色法检测细胞凋亡并以PCR法检测凋亡相关基因的表达。采用Westernblot法检测P53蛋白的变化。采用Griess分光光度法检测样品中一氧化氮(NO)的代谢产物亚硝酸盐的含量。结果与未处理组相比,50μg/mLASD能明显抑制U937细胞和HL-60细胞的生长并呈剂量依赖性,同时伴随bcl-2mRNA表达的明显下调。Western blot检测结果显示,P53蛋白的表达水平随ASD作用而升高。另外,ASD可以促使U937细胞和HL-60细胞中NO的含量显著提高(P<0.05)。结论 ASD对U937细胞和HL-60细胞具有增殖抑制和诱导凋亡的作用,其机制与bcl-2基因的下调,p53蛋白上调,以及促进白血病细胞内NO含量提高相关。
- 周鹏马亮周珺国风
- 关键词：白血病细胞凋亡P53一氧化氮
- 前列腺癌细胞中核因子κB家族成员调控乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂表达的机制
- 2012年
- 目的探讨核因子κB（NF—κB）家族成员（RelA、pSO、RelB和p52）调控抑癌基因乳腺丝氨酸蛋白酶抑制剂（Maspin）表达的可能机制。方法采用Westernblot法检测前列腺癌细胞株DUl45、PC-3和LNCaP中NF-κB家族成员和Maspin蛋白的表达情况。采用RNA干扰技术结合Westernblot法，检测RelB或RelA沉默对前列腺癌DUl45细胞中Maspin蛋白表达的影响。采用流式细胞术检测RelB沉默后前列腺癌DUl45细胞的死亡情况。通过转染RelB表达质粒并建立稳定表达细胞株，观察过表达RelB对前列腺癌PC-3细胞中Maspin蛋白表达的影响。结果RelA、pSO、RelB和p52蛋白在雄激素非依赖型前列腺癌细胞株DUl45和PC-3中呈持续性高表达，其中RelB蛋白在DUl45细胞中的表达最为显著。Maspin蛋白在LNCaP和DUl45细胞中低表达，而在PC-3细胞中高表达。在DUl45细胞中，沉默RelB可以诱导Maspin蛋白表达上调，同时促进细胞死亡[死亡率为（13．3±4．2）％]。在PC．3细胞中，过表达RelB可抑制Maspin的内源性表达。RelA沉默对DUl45细胞中Maspin蛋白的表达无显著影响。结论在雄激素非依赖型前列腺癌细胞株中，NF-κB经典与非经典通路蛋白持续性活化，RelB与Maspin的表达呈负相关性。RelB负性调控了内源性Maspin的表达，进而影响了前列腺癌细胞的存活。RelA并不参与对Maspin表达的调控。
- 马亮沈雅颖周鹏周珺国风
- 关键词：核因子ΚB
- TRAF1在霍奇金淋巴瘤细胞中的表达和作用机制的探讨被引量：1
- 2010年
- 目的探讨肿瘤坏死因子受体相关因子（TRAF）1以及CD30-TRAF1信号通路在B细胞性霍奇金淋巴瘤细胞中的作用。方法分别采用荧光定量RT—PCR和Westernblot法检测B细胞性霍奇金淋巴瘤细胞株TRAF1mRNA和蛋白质表达水平，并进一步研究CD30信号活化对TRAF1表达的作用。采用RNA干扰技术研究TRAF1沉默对霍奇金淋巴瘤细胞存活的影响，并通过TransAM方法定量分析核转录因子（NF）-κB的DNA结合活性的变化。通过Westernblot法测定NAPK／ERK信号通路中JunB蛋白的表达。结果B细胞性霍奇金淋巴瘤细胞株IA28和KM—H2细胞中TRAF1在mRNA和蛋白质水平均表达。CD30配体作用后IA28细胞中TRAF1mRNA相对表达水平自3．50±0．20上调至7．26±0．23；蛋白相对表达水平自2．31±0．35上升至4．53±0．55。TRAF1沉默后凋亡细胞百分率由（5．7±1．2）％上升至（27．7±5．8）％，并伴随p50和RelA活力的下降。JunB的表达在TRAF1沉默细胞中未发生明显变化。结论TRAF1在B细胞系来源的霍奇金淋巴瘤细胞中表达增加，并受到CD30信号通路活化的调控。TRAF1为介导经典性NF—κB活性的关键性调节分子，参与霍奇金淋巴瘤细胞的抗凋亡活性。
- 王文娟国风孙爱宁周鹏马亮
- 关键词：霍奇金病CD30
- FLT3-ITD突变高灵敏度检测方法及试剂盒
- 本发明提供了一种FLT3‑ITD突变高灵敏度检测方法及试剂盒，该试剂盒包括上游引物和下游引物，所述上游引物核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，该引物所扩增的核苷酸序...
- 沈宏杰陈苏宁邱桥成丁子轩解珺丹马亮
- 文献传递
- Maspin在前列腺癌PC-3细胞生物学行为中的作用被引量：1
- 2012年
- 目的:探讨maspin影响前列腺癌细胞生物学行为的作用机制。方法:设计并合成靶向maspin基因的特异性shRNA,构建靶向maspin的shRNA慢病毒表达质粒并进行细胞转染。采用qRT-PCR和Western blot-ting法检测PC-3细胞转染重组质粒后maspin mRNA和蛋白质水平的变化以建立稳定转染maspin-shRNA的细胞系。采用qRT-PCR检测转染重组质粒对PC-3细胞中凋亡相关基因的影响。采用xCELLigence系统实时动态观察转染重组质粒前后细胞的生长并计算倍增时间,结合流式细胞术检测蛋白酶体抑制剂细胞毒性作用在细胞转染前后的变化。采用Western blotting法检测蛋白酶体抑制剂对核因子κB家族成员RelA和RelB表达的影响。结果:成功构建靶向maspin的shRNA慢病毒表达质粒pLL3.7-siMaspin。利用慢病毒表达系统转染并通过极限稀释法得到单克隆转染细胞PC-3-siMaspin。PC-3-siMaspin细胞的倍增时间为26.83 h,而PC-3-control细胞为37.95 h。PC-3-siMaspin细胞中bcl-2和A20 mRNA表达水平上调;而bax和bim的表达水平下调。蛋白酶体抑制剂MG-132作用PC-3-control和PC-3-siMaspin细胞8 h后细胞死亡率分别为27.1%±5.6%和7.5%±2.3%,24 h为24.2%±3.7%和8.2%±2.5%,36 h为28.7%±3.7%和7.6%±2.5%。PC-3-control细胞在MG-132作用下RelA的表达逐渐下调,而PC-3-siMaspin细胞中RelA的表达无明显变化。结论:在雄激素非依赖型前列腺癌细胞株PC-3中maspin呈高表达。Maspin表达沉默显著缩短了前列腺癌细胞的倍增时间,加快了细胞的生长与增殖。Maspin表达沉默显著下调了PC-3细胞对MG-132的敏感性,并与RelA降解的缺失相关。
- 刘美琴周珺马亮国风
- 关键词：前列腺肿瘤MASPIN蛋白耐药性
- 一种肿瘤融合基因的靶向捕获探针及其应用
- 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种肿瘤融合基因的靶向捕获探针及其应用。利用本发明探针组合，结合高通量测序技术，能够检测转录水平BCR、ABL1、RUNX1、CBFB、PML、RARA和KMT2A相关的融合基因，检出...
- 沈宏杰王曼陈苏宁邱桥成丁子轩解珺丹马亮姚红江艾蕊
- 检测巨细胞病毒UL54和UL97基因耐药突变的巢式PCR引物和方法
- 本发明属于病毒基因组学和药物基因组学领域，具体涉及一种检测巨细胞病毒UL54和UL97基因耐药突变的巢式PCR引物和方法。首先公开了一种用于巢式PCR方法检测巨细胞病毒的引物组，包括长引物组、短引物组和通用测序引物组；所...
- 丁子轩陈苏宁沈宏杰解珺丹姚红马亮邱桥成江艾蕊王曼
- FLT3-ITD突变高灵敏度检测方法及试剂盒
- 本发明提供了一种FLT3‑ITD突变高灵敏度检测方法及试剂盒，该试剂盒包括上游引物和下游引物，所述上游引物核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，所述下游引物核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，该引物所扩增的核苷酸序...
- 沈宏杰陈苏宁邱桥成丁子轩解珺丹马亮
