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排序方式：

乳腺癌干细胞富集及其特异性多肽的筛选被引量：1: 2013年; 目的:无血清培养法富集乳腺癌干细胞(breast cancer stem cell,BCSC)并采用噬菌体展示技术,筛选能特异性结合乳腺癌干细胞的噬菌体多肽。方法:无血清培养法富集乳腺癌MDA-MB-231细胞株中干细胞并以此为靶标,以hs578bst人正常乳腺细胞及普通培养的MDA-MB-231细胞为减性筛选细胞,对噬菌体随机肽库进行双重减性筛选,选取富集后的阳性噬菌体单克隆,ELISA及DAB染色鉴定阳性噬菌体特异性并测序。结果:经过3轮筛选,噬菌体得到约500倍的富集,随机挑选10株单克隆噬菌体。ELISA显示,6号噬菌体单克隆对乳腺癌干细胞的亲和力是对照的6.14倍;DAB鉴定亦显示,其对乳腺癌干细胞的特异性及亲和力最高,对阳性噬菌体DNA测序翻译得到十二肽氨基酸为GYSASRSTIPGK。结论:通过干细胞富集及噬菌体展示技术,成功筛选出能够特异性结合乳腺癌干细胞的特异性噬菌体多肽,为乳腺癌的干细胞靶向治疗和深入研究奠定基础。; 孔冕戴淑琴李宝江王军业林雨臧林泉曹开源; 关键词：乳腺肿瘤肿瘤干细胞噬菌体展示

乳腺癌原代细胞特异性多肽的筛选: 2013年; 目的利用噬菌体展示技术从噬菌体随机十二肽库中筛选出能够特异性结合乳腺癌原代细胞的噬菌体多肽。方法以乳腺正常细胞为减性筛选细胞、乳腺癌原代细胞为靶细胞,对从商业购买的噬菌体随机十二肽库进行筛选,选取富集后的单克隆噬菌体,ELISA鉴定阳性噬菌体的特异性及亲和力,扩增阳性噬菌体克隆并提取DNA,测序后进行比对。结果经过3轮筛选,噬菌体得到近100倍富集,随机挑选11株单克隆噬菌体,ELISA鉴定显示2号噬菌体对乳腺癌细胞具有较高特异性及亲和力,测序结果显示其表达的多肽序列为未知序列。结论利用噬菌体筛选技术成功筛选出能够特异性结合乳腺癌原代细胞的特异性多肽,为进一步合成多肽应用于靶向治疗乳腺癌奠定基础。; 孔冕王红月刘志勇侯传强李宝江; 关键词：乳腺癌噬菌体展示多肽 ELISA

肋间神经冷冻术对胸腔镜辅助手术患者C反应蛋白的影响被引量：3: 2013年; 目的探讨肋间神经冷冻止痛方法在电视胸腔镜辅助小切口胸科手术后C反应蛋白(CRP)的变化。方法回顾性分析2012年1月至2012年12月期间行胸腔镜下开胸手术并行肋间神经冷冻术镇痛的50例患者病例资料,以同期电视辅助胸腔镜手术并患者静脉自控镇痛的50例患者为对照,观察两组患者在使用不同镇痛方式后C反应蛋白在围手术期内的变化。结果所有患者都安全渡过手术期,两组患者术后C反应蛋白都有大幅升高,行肋间神经冷冻术镇痛的实验组患者手术前后C反应蛋白变化幅度低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸腔镜辅助下小切口手术同期行肋间神经冷冻术镇痛,C反应蛋白升高幅度明显小于患者自控静脉镇痛组,炎症反应轻,应激反应小,有利于术后恢复。; 孔冕王军业戴淑琴李宝江; 关键词：肋间神经冷冻术电视胸腔镜辅助 C反应蛋白镇痛

乳腺癌干细胞富集及其特异性多肽的筛选: 目的:无血清培养法富集乳腺癌干细胞(BCSC，breast cancer stem cell)并利用噬菌体展示技术，筛选能特异性结合乳腺癌干细胞的噬菌体多肽，为从干细胞角度靶向治疗乳腺癌奠定基础。　　方法:首先无血清培养...; 孔冕; 关键词：乳腺癌噬菌体展示靶向治疗; 文献传递

MDA-MB-231乳腺癌细胞特异性多肽的初步筛选: 2014年; 目的利用噬菌体展示技术,从噬菌体随机十二肽库中筛选出能够特异性结合MDA-MB-231乳腺癌细胞的噬菌体克隆.方法以人正常乳腺细胞为减性筛选细胞、MDA-MB-231乳腺癌细胞为靶细胞,对噬菌体随机十二肽库进行筛选,挑取富集后的阳性单克隆噬菌体,酶联免疫吸附试验（ELISA）及DAB染色鉴定阳性噬菌体的特异性及亲和力.结果经过3轮筛选,噬菌体得到约113倍的富集,随机挑选11株单克隆噬菌体,ELISA显示8号噬菌体单克隆对乳腺癌细胞的亲和力是对照的6.5倍,DAB鉴定亦显示其对乳腺癌细胞的特异性及亲和力最高,命名为LK-8.结论利用噬菌体筛选技术成功筛选出能够特异性结合MDA-MB-231乳腺癌细胞的特异性噬菌体单克隆LK-8,可为进一步合成特异性多肽用于早期诊断和靶向治疗乳腺癌奠定基础.; 孔冕李宝江王军业曹开源林雨戴淑琴; 关键词：乳腺肿瘤酶联免疫吸附测定生物学标记噬菌体展示

噬菌体特异性结合肽对乳腺癌干细胞生物学行为的影响: 2016年; 目的检测GY-1(GYSASRSTIPGK)与乳腺癌干细胞的亲和性及特异性,探讨其对乳腺癌干细胞体外生物学行为的影响,评估GY-1作为乳腺癌干细胞靶向治疗载体的临床价值。方法根据前期噬菌体肽库筛选实验获得的十二肽GY-1(GYSASRSTIPGK)序列,人工合成GY-1,同时合成随机氨基酸序列十二肽GY-2(GSAYITRSGPSK)作阴性对照,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)及细胞免疫荧光法分别鉴定两者与乳腺癌干细胞231-SC(分离自MDA-MB-231细胞株)的亲和性及特异性;通过生长曲线及侵袭迁移实验检测十二肽GY-1对乳腺癌干细胞231-SC恶性生物学行为的影响。结果 ELISA结果显示,GY-1组231-SC吸光度为0.501±0.009,高于MDA-MB-231细胞(0.147±0.038)和hs578bst细胞(0.152±0.036),F=262.25,P<0.001;GY-2组中三组细胞的吸光度分别为0.148±0.003、0.146±0.005和0.149±0.001,F=0.63,P>0.05。细胞免疫荧光法显示GY-1对231-SC有高度亲和特异性,生长曲线结果显示,GY-1组231-SC细胞增殖能力显著低于GY-2组和PBS空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。侵袭实验中GY-1组231-SC细胞透过Transwell上室的细胞数为(22±2)个,低于GY-2对照组[(41±4)个]和空白对照组[(43±6)个],F=9.03,P=0.003。迁移实验中GY-1组231-SC细胞透过Transwell上室的细胞数为(66±7)个,低于GY-2对照组[(134±11)个]和空白对照组[(141±14)个],F=14.59,P<0.001。GY-2对照组和空白组差异比较均无统计学意义(P=0.78和P=0.66)。结论十二肽GY-1对靶细胞231-SC具有高度亲和特异性,并且能够抑制231-SC的生长、侵袭迁移,有可能成为乳腺癌干细胞靶向治疗的理想载体。; 亓春玲刘飞赵书平孔冕刘婷婷李宝江孟潘庆; 关键词：乳腺癌干细胞生物学行为

乳腺癌干细胞分选及其异质性: 2013年; 乳腺癌干细胞的成功分选是进行乳腺癌干细胞研究的基础，目前人们可以通过多种方法使乳腺癌干细胞得到一定程度的富集。然而，在越来越多乳腺癌干细胞表面标志物被发现的同时，其异质性也成为人们关注的热点。如何最大程度地富集乳腺癌干细胞及解释其异质性，将为乳腺癌的干细胞治疗提供新思路。; 孔冕林雨王军业李宝江; 关键词：乳腺肿瘤干细胞生物学标记遗传异质性

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孔冕

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