张立行
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 供职机构：南昌大学医学院泌尿外科研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 昆明鼠胚胎干细胞系的建立及其特性(英文)被引量：1
- 2009年
- 背景:到目前为止,国际上通用的动物胚胎干细胞细胞系大多是从129品系和C57BL/6系小鼠中获得的,少部分来自BALB/C系,来自于中国昆明鼠则鲜有报道。目的:分离培养昆明系小鼠胚胎干细胞,并对其生物学特性进行初步鉴定。设计、时间及地点:以细胞为对象的观察性实验,于2006-05/2007-06在南昌大学第一附属医院泌尿外科研究所完成。材料:昆明小鼠3.5d胚龄的囊胚。方法:自昆明系小鼠3.5d胚龄的囊胚分离内细胞团细胞,接种于小鼠原代胚胎成纤维细胞饲养层上,对分离的内细胞团细胞进行扩增、传代培养。主要观察指标:观察胚胎干细胞集落的生长情况,对其碱性磷酸酶表达进行染色分析,采用免疫荧光法检测其阶段特异性胚胎抗原1表达,以反转录-聚合酶链反应检测其特异性表达因子c-Myc,Nanog,Oct3/4和Sox2的基因表达情况,并对其体内外分化能力对进行鉴定分析。结果:分离、培养自内细胞团的细胞呈典型的胚胎干细胞集落样生长,碱性磷酸酶染色及阶段特异性胚胎抗原1荧光染色阳性,细胞表达c-Myc,Nanog,Oct3/4和Sox2等基因,细胞在体内外均能分化成来源于不同胚层的多种细胞类型。结论:成功从昆明小鼠囊胚中分离并建立一株胚胎干细胞系,其生物学特性与其他胚胎干细胞株相符。
- 谢安汪泱娄远蕾张立行冯年花
- 关键词：胚胎干细胞昆明小鼠细胞培养
- 后肾细胞微环境诱导胚胎干细胞向肾系细胞分化的实验研究被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨胚胎后肾细胞微环境诱导胚胎干细胞(ESCs)分化为肾系细胞的作用。方法:小鼠D3系胚胎干细胞通过悬滴法制备拟胚体(EBs),将EBs细胞与取自孕12.5 d小鼠胚胎的后肾细胞通过间接共培养以诱导其分化,即为共培养诱导组,设EBs细胞自然分化为对照组;采用免疫荧光染色法检测共培养第3、5、7 d后的EBs细胞Pax2、WT-1蛋白表达情况,通过逆转录PCR法检测诱导3 d后的EBs细胞Pax2、WT-1、Lim1、Sall1、Emx2、GDNF、Wnt4、BMP7、Nephl、Nephrin、KSP和CD24 mRNA的表达情况。结果:EBs细胞在诱导的第3 d即出现了全部肾发育相关基因的表达,其中共培养组Pax2、WT-1、Emx2、GDNF、Nephl、Nephrin、KSP和CD24的表达强于对照组;免疫荧光结果显示在诱导3 d后的EBs细胞中可观察到Pax2阳性细胞,阳性细胞数在共培养第5、7 d增多;诱导5 d后可观察到WT-1阳性细胞,对照组未见Pax2或WT-1蛋白阳性细胞出现。结论:后肾细胞微环境可促进ESCs分化为肾系细胞。
- 汪泱张立行王共先谢安娄远蕾阮琼芳崔苏萍杨阳
- 关键词：胚胎干细胞
- 小鼠胚胎干细胞在胎肾微环境中共培养后表达肾标志物(英文)被引量：1
- 2008年
- 胚胎干(ES)细胞是一种多潜能细胞具有分化成为来自三个胚层各种细胞甚至包括生殖细胞的能力。最新的研究表明,胚胎干细胞在与胚胎脏器细胞共培养后可以定向分化为多种特定细胞表型,他们包括肝细胞、心肌细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞,并在某些情况下甚至可能形成成熟的器官组织结构。已有研究报道说明ES细胞通过在体外环境中直接形成拟胚体(EBs)可以分化成为肾细胞,并且最新的研究成果表明分离自这些EBs的细胞移植入体内后可以形成肾近端小管样结构并且未在其周围发现畸胎瘤形成。但是ES细胞是否可以通过和胎肾细胞相互作用继而获得定向分化并未见诸报道。在实验中我们发现,在与小鼠胎肾细胞共培养后,ES细胞分化成为了肾系细胞。处理后的ES细胞可以检测到与肾发育相关的特征基因,如WT-1、exm-2和Wnt-4基因的表达,我们也发现了终末分化的肾细胞标志物,如podocalyxin、Nephl和RSOR基因的表达。在实验前后,我们同样探寻了ES细胞多分化潜能标记分子的基因表达情况,结果显示共培养后分化的ES细胞Oct-4、Nanog和Klf-4基因表达明显减弱。综上,胎肾细胞微环境可能促使ES细胞定向分化为肾系细胞,提示胚胎器官细胞微环境在ES细胞转分化过程中可能扮演了重要作用。
- 汪泱张立行谢安娄远蕾刘玉霞
- 关键词：胚胎干细胞分化
- 胚胎干细胞向肾脏细胞分化的研究进展被引量：1
- 2008年
- 胚胎干细胞可以分化成为成体器官内不同胚层的所有细胞，具有广阔的研究和应用前景。近几年，胚胎干细胞向肾脏细胞分化方面的研究逐年增多，但仍有许多问题尚未解决。本文将就胚胎干细胞向肾脏细胞分化的文献以及其应用前景进行综述。
- 张立行汪泱
- 关键词：干细胞胚胎细胞分化
