杨能
- 作品数：8 被引量：17H指数：3
- 供职机构：上海交通大学医学院上海市免疫学研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会资助项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用RNA干扰阻抑小鼠L929细胞MHCⅡ类基因表达及功能的研究被引量：1
- 2009年
- 为了探讨RNA干扰技术对小鼠CⅡTA(II类反式激活因子)以及MHC Ⅱ类基因表达和功能的影响。我们首先设计并合成4条小干扰RNA(small-interfering RNA,siRNA)(siRNA-1、siRNA-2、siRNA-3和siRNA-4)序列,在阳离子脂质体的介导下转染小鼠L929细胞。48h后,用半定量RT-PCR和定量PCR方法检测CⅡTA mRNA的变化;流式细胞仪检测I-Ab分子表达的变化。接着构建了CIITA特异的短发夹状干扰RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体,通过在靶细胞内转录形成具有特异干扰作用的shRNA,高效、特异的阻断CⅡTA基因的表达,形成Ⅱ类基因功能缺陷或使其表达降低。进一步混合淋巴细胞反应观察同种异基因CD4+T细胞对稳定转入RAN干扰载体的L929细胞的免疫应答强度,结果证实该L929细胞对不同受者CD4+T细胞的刺激能力分别下降73.90%和76.34%。以上结果为减低同种异体/异种器官细胞性排斥提供了新的思路和手段。
- 路丽明丁庆杨能周晓荣周芸周光炎
- 关键词：SIRNA
- 自体角朊细胞通过B7-H1介导对异种混合淋巴细胞增殖的抑制作用
- 2009年
- 为了探讨自体角朊细胞诱导免疫抑制的机制,我们利用已建立的MELR体外增殖系统,采用三色标记流式细胞术及定量PCR方法检测了自体角朊细胞共信号分子B7-H1和HLA II类分子的表达情况,观察其对角朊细胞所诱导的免疫抑制的影响。结果发现,自体而非异体角朊细胞可有效抑制MELR。在抑制系统中检测到B7-H1和II类分子高表达于自体角朊细胞表面。单抗封阻B7-H1,可逆转自体角朊细胞诱导的免疫抑制作用。结论:自体角朊细胞通过B7-H1介导对异种混合淋巴细胞增殖的抑制作用。
- 周芸焦志军辛利军汪四七路丽明丁庆周晓荣杨能周光炎
- 关键词：免疫抑制B7-H1
- 天花粉蛋白合成肽通过激活抑制性CD8^+ T细胞诱导免疫抑制被引量：3
- 2008年
- 为了探讨天花粉蛋白合成肽(M-Tk)诱导免疫抑制的机制,应用小鼠针对可溶性抗原OVA的增殖系统,检测M-Tk处理后对淋巴细胞增殖的抑制作用和细胞因子格局的变化,以及M-Tk激活的T淋巴细胞亚群的表型及功能。结果表明,M-Tk可诱导一群CD8+ T抑制性细胞,其表型为CD8+CD28-CTLA4+,采用双层非接触共培养系统发现,该群抑制性细胞主要依赖于细胞因子IL-10、IL-4和细胞间接触发挥免疫抑制作用。
- 杨能路丽明周芸周晓荣焦志军马妍慧周光炎
- 关键词：天花粉蛋白免疫抑制
- 膜型B7-H1分子诱导产生的T抑制细胞及其免疫学特性的初步研究被引量：1
- 2008年
- 为了探讨B7-H1分子诱导产生的T抑制细胞免疫生物学特性,我们首先构建了人B7-H1基因,筛选出细胞膜表面稳定表达B7-H1蛋白的人ECV304细胞系,并在体外建立了由这种非专职抗原提呈细胞系刺激诱导纯化的CD4+T细胞,并使其具有抑制功能的新方法。通过检测其增殖效应和上清细胞因子水平的变化,观察到这群细胞对同种异体混合淋巴细胞反应(MLC),具有明显抑制作用,该作用与大量产生IL-10、TGF-β细胞因子有关。实验表明,ECV304/B7-H1可有效诱导具有免疫抑制的功能T细胞,为其进一步应用于临床治疗打下基础。
- 路丽明丁庆杨能周晓荣周芸周光炎
- 关键词：B7-H1ECV304T抑制细胞
- 天花粉蛋白及其肽段诱导的免疫抑制依赖APC表面Notch配体的表达被引量：3
- 2006年
- 新近发现,Notch信号途径参与调节外周成熟T细胞及其亚群的分化和功能发挥。本研究应用天花粉蛋白及其衍生肽处理骨髓来源的小鼠树突状细胞(DC),检测Notch配体家族分子的表达及DC对CD8+T细胞分泌细胞因子的影响。结果表明,天花粉蛋白或其衍生肽PB处理DC可使Notch配体Jagged1、Delta1分子表达明显增加,并改变CD8+T细胞细胞因子分泌格局,明显抑制Th1相关细胞因子IFN-γ的分泌,而Th2相关细胞因子IL-4和IL-10分泌明显增加。Notch信号的阻断剂可以部分逆转Tk及肽段的抑制作用。表明天花粉蛋白及其衍生肽可诱导一群具有抑制能力的CD8+T细胞,该作用依赖于DC表面Notch配体的表达。
- 焦志军周芸辛利军路丽明丁庆周晓荣杨能周光炎
- 关键词：天花粉蛋白树突状细胞NOTCH配体
- 自体角朊细胞通过诱导分泌IL-10的T细胞亚群抑制异种混合淋巴细胞增殖反应被引量：2
- 2009年
- 为了探讨自体角朊细胞体外对人-猪异种混合血管内皮细胞-淋巴细胞反应(MELR)的影响及作用机制,我们从mR-NA;蛋白水平观察淋巴细胞的增殖;细胞因子的分泌及胞内细胞因子的变化,并用IL-10单抗进行封阻,观察其对角朊细胞诱导免疫抑制效应的影响。结果发现在MELR中引入自体角朊细胞后,细胞因子分泌格局呈现由IFN-γ主导转变为由IL-10主导的动力学变化;IL-10单抗能有效地阻断角朊细胞所诱导的免疫抑制效应。表明自体角朊细胞可诱导一群分泌IL-10的调节性T细胞,从而抑制Th1亚群所介导的细胞免疫及异种移植物排斥反应。
- 周芸焦志军汪四七辛利军路丽明丁庆周晓荣杨能周光炎
- 关键词：角朊细胞调节性T细胞IL-10
- 天花粉蛋白合成肽通过诱导CD8抑制性T细胞治疗实验性自身反应性脑脊髓炎被引量：4
- 2008年
- 为了探讨天花粉蛋白合成肽(M-Tk)治疗实验性自身反应性脑脊髓炎(EAE)的可能性及其作用机制,应用自身抗原MBP衍生肽MOG35-55免疫C57BL/6小鼠成功地诱发EAE后,以流式细胞术测定小鼠淋巴结细胞及脾细胞T亚群及细胞因子的表达,并通过临床评分观察M-Tk治疗EAE的有效性,包括以HE和LFB染色观察髓鞘病变。结果发现,M-Tk可抑制MOG35-55特异性T细胞的增殖反应,选择性诱导CD8+CD28-T调节细胞的扩增,明显提高IL-10的分泌和降低IFN-γ的产生,并有效改善EAE小鼠神经功能评分。采用M-Tk诱导的CD8 T细胞作体内输注可取得相似甚至更好的治疗效果(P>0.01)。提示M-Tk在体内诱导产生CD8+CD28-抑制性T细胞并上调IL-10分泌降低IFN-γ产生,是对EAE取得疗效的关键。
- 杨能史桂英路丽明周芸马妍慧周光炎
- 关键词：天花粉蛋白实验性变态反应性脑脊髓炎
- 天花粉蛋白免疫抑制作用的功能性肽段筛选及其作用机制被引量：6
- 2006年
- 在人工合成天花粉蛋白(Tk)多个重叠肽段的基础上,采用前期工作中筛选出的天花粉蛋白高敏感(C57BL/6)和低敏感(C3H/He)小鼠近交系,建立OVA特异的体外二次应答增殖系统,检测各肽段抑制能力,并通过细胞剔除及过继试验确认发挥作用的细胞,采用ELISA方法检测细胞因子分泌格局的改变。结果筛选到5条具有明显免疫抑制功能的Tk衍生肽,其中PE和PS对两个品系皆显示抑制活性,而PQ、PB及PJ仅在C57BL/6小鼠中诱导抑制。Tk衍生肽段改变了OVA特异性增殖系统中细胞因子分泌的格局,使得以Th1/Tc1型细胞因子为主状态向Th2/Tc2偏移,表现为IL-4和IL-10分泌增加,而IFN-γ分泌减少。剔除CD8+T细胞明显解除Tk及其肽段的抑制作用。表明Tk的某些肽段与全蛋白一样具有免疫抑制功能,其机制可能与诱导T细胞向CD8+Tc2方向偏移有关。
- 焦志军周芸路丽明丁庆周晓荣杨能辛利军周光炎
- 关键词：天花粉蛋白抗原肽免疫抑制
