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沈心亮: 作品数：91 被引量：262H指数：8; 供职机构：北京生物制品研究所有限责任公司更多>>; 发文基金：国家科技支撑计划甘肃省自然科学基金国家民委科研基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学化学工程更多>>

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鼠疫菌V抗原基因在大肠杆菌中的克隆及表达被引量：5: 2003年; 从鼠疫杆菌野毒株总DNA中利用PCR方法扩增出V抗原编码基因 ,将此基因克隆到大肠杆菌的表达质粒pET 42b( + )中 ,经IPTG诱导后 ,在大肠杆菌BL2 1 (DE3)细胞中成功地表达出鼠疫菌V抗原蛋白。目的蛋白表达量占菌体总蛋白的 32 8%。; 傅林锋王秉翔李启明雷清蒋琳沈心亮; 关键词：鼠疫菌大肠杆菌克隆

中国疫苗应用现状与发展趋势被引量：6: 2003年; 本文从不同角度和层面对中国疫苗应用现状与发展趋势进行了分析和比较。随着现代生物技术的发展 ,疫苗产品一直在更新换代 ,从我国正在研究和使用的疫苗来看 ,理论研究有一定的差距 ,应用研究与国际先进水平差距不大。我国正在使用的疫苗 ,正在更新换代的疫苗和正在研发的新疫苗。; 沈心亮蒋韬; 关键词：疫苗生物技术

Sabin株脊髓灰质炎病毒在Vero细胞上的传代稳定性: 2009年; 目的探讨Sabin株脊髓灰质炎病毒在Vero细胞上的传代稳定性。方法用Sabin株脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型分别以0.01、0.1和1MOI接种Vero细胞,进行传代培养,共传13代。采用微量细胞病变法测定病毒滴度;双抗体夹心法测定D抗原含量;免疫Wister大鼠,采用微量中和试验测定病毒的免疫原性。结果Sabin株脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型在Vero细胞上连续传13代,病毒滴度基本稳定;D抗原含量呈下降趋势;免疫原性下降迅速。结论用Sabin株脊髓灰质炎病毒制备灭活疫苗,在Vero细胞上传代的代次越低越好。; 李懿宁海京张冲支惠陈明宋冬梅马淑花赵敏王红燕石慧颖沈心亮; 关键词：脊髓灰质炎病毒 VERO细胞传代稳定性

甘露糖结合凝集素与疾病的关系被引量：3: 2007年; 甘露糖结合凝集素是一种钙离子依赖性糖结合蛋白,属凝集素家族,在肝细胞内合成后分泌到血液中,其基因型和血清水平异常与多种疾病相关。本文对甘露糖结合凝集素与某些疾病的相关性作一综述。; 刘立峰张庶民沈心亮; 关键词：甘露糖结合凝集素艾滋病心血管疾病自身免疫病肝病白血病

肠病毒71型空斑检测方法的建立被引量：4: 2009年; 目的建立肠病毒71型(EV71)空斑检测方法,为EV71生物学特性及疫苗的研究提供手段。方法将不同稀释度的5株EV71分别接种至单层RD细胞和Vero细胞,加入甲基纤维素覆盖,计数空斑,并计算病毒滴度。通过3次连续检测,验证空斑法的精密性,并对空斑法与微量细胞病变法检测病毒滴度的结果进行比较。结果采用RD细胞和Vero细胞,通过空斑法对EV71病毒滴度进行检测,96h后均能规律地出现边缘整齐、清晰的空斑,RD细胞和Vero细胞检测的空斑直径分别为1～2mm和0.5～1mm。连续3次重复试验结果显示,试验间变异系数的平均值Vero细胞为2.52%,RD细胞为4.49%。空斑法与微量细胞病变法比较,其检测结果具有良好的线性相关性,相关系数为r=0.972,P=0.006。结论已建立了精密性好、出斑规律的EV71病毒空斑检测方法。; 郝春生赵敏张晨何薇薇王潇潇杨永娟张中洋沈心亮李秀玲; 关键词：肠病毒71型

人肿瘤坏死因子-α突变体在大肠杆菌中的表达及活性测定被引量：1: 1999年; 目的构建一种新型人肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）分子，测定其蛋白表达和生物学活性。方法在详细分析ＴＮＦα结构及其结构与功能关系的基础上，设计并人工合成了一对ＴＮＦα结构基因点突变引物。应用ＰＣＲ分子克隆技术构建了一种新型ＴＮＦα分子的编码基因，将该编码基因插入表达质粒，转化大肠杆菌，通过温度诱导获得了表达蛋白，对表达产物进行免疫学检测和生物活性检测。结果新构建的突变体ＴＮＦαΝ１与ＴＮＦαＥＬＩＳＡ试剂盒有免疫学反应，其含量为０．５μｇ／ｍｌ；在体外有生物学活性，为１０７ＢＵ／ｍｌ，比活为２．１×１０５ＢＵ／ｍｇ；理化性质与天然原型ＴＮＦα有所不同。结论得到了一种具有生物学活性的新型ＴＮＦα分子。; 王潇吴敏沈心亮应莲芳翟雷郑荣梁; 关键词：肿瘤坏死因子 PCR 大肠杆菌

人巨细胞病毒疫苗研究进展被引量：1: 2002年; 人巨细胞病毒 (HCMV)因其在优生优育方面的重要作用 ,一直受到人们的广泛重视。迄今 ,随着免疫缺陷病人的增多 ,HCMV感染对人体健康的危害也日趋严重 ,发展有效、安全的疫苗即成为防治HCMV疾病的重要手段。; 蒋韬沈心亮; 关键词：人巨细胞病毒疫苗 HCMV PP65

人乳头瘤病毒类病毒颗粒的制备方法和外源蛋白表达盒、表达系统: 本发明涉及一种人乳头瘤病毒类病毒颗粒的制备方法，该方法使人乳头瘤病毒的结构蛋白L1和L2在同一双缺陷型甲醇酵母菌表达系统中共表达，所述表达系统使用包含以下元件的外源蛋白表达盒：a)标记基因序列；b)源自甲醇酵母菌的启动子...; 李启明张靖陈实靳玉琴马智静梁宇张学峰于洁卫江波沈心亮; 文献传递

大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的克隆、表达及初步纯化被引量：4: 2005年; 为研究大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的佐剂活性。从大肠杆菌中调出LTB的原始基因,将该基因克隆、构建pET21b-LTB表达载体、转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,并对表达产物进行初步纯化;经DNA测序、SDS-PAGE、ELISA检测,结果表明成功构建了能够稳定表达可溶性LTB的菌株,并获得初步纯化LTB的方法。为今后LTB的研究及应用奠定了基础。; 黄思扬马超雷清蒋琳沈心亮王锐; 关键词：纯化粘膜佐剂

冻干水痘减毒活疫苗的安全性和免疫原性研究被引量：12: 2011年; 目的观察长春祈健生物制品有限公司生产的冻干水痘减毒活疫苗(Varicella Attenuated Live Vaccine,Freeze-dried;VarV-Fd)的临床反应及免疫原性。方法选择年龄在3～9岁的托幼机构儿童和在校小学生作为观察对象。按照随机双盲对照临床试验原则,将入选的5192名观察对象分为试验组和对照组,其中试验组2593人,接种VarV-Fd;对照组2599人,接种麻疹-流行性腮腺炎联合减毒活疫苗。于接种后30min和6、24、48、72h及7、14、21、28d进行随访,并记录一般反应和异常反应。采用膜抗原免疫荧光抗体试验检测77名儿童血清水痘抗体,计算抗体阳性率、抗体几何平均滴度(Geometric MeanTiter,GMT)及增长倍数。结果接种VarV-Fd的2593人中,有2人注射部位局部出现轻微红晕,其他受种者无其他反应或不适;77名受种者在接种时和接种后1个月采集了静脉血,血清水痘抗体全部阳转或≥4倍升高,阳转率100%;免疫前抗体GMT为1:2.64,免疫后GMT为1:52.98,差异有统计学意义。结论长春祈健生物制品有限公司生产的VarV-Fd具有良好的安全性和免疫原性。; 肖作奎过琴媛宋立志付方李明杨倩陈海平许青吕静静张洪祥沈红杰徐爱强沈心亮; 关键词：冻干水痘减毒活疫苗随机双盲对照临床试验安全性免疫原性