蒋琳
- 作品数：79 被引量：178H指数：6
- 供职机构：兰州生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：甘肃省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学化学工程更多>>
- 恶性疟原虫膜蛋白Pfs25在毕赤酵母中的组成型表达被引量：6
- 2011年
- 目的:Pfs25蛋白是传播阻断型恶性疟疾疫苗的侯选抗原,在毕赤酵母中表达Pfs25蛋白,并对表达产物进行鉴定。方法:参照GenBank中公布的pfs25基因序列,通过毕赤酵母喜好密码子分析人工合成目的基因;采取定向克隆策略构建重组表达质粒pfs25/pGAPZαA,经BstXⅠ线性化,电转染法转化酵母菌株GS115,在Zeocin抗性的筛选培养基上获得表达目的基因的pfs25/pGAPZαA/GS115重组酵母菌,SDS-PAGE和Western印迹检测表达产物;通过在YPD培养基上传代培养和目的基因表达,验证重组菌株的遗传稳定性。结果:在毕赤酵母中表达了Pfs25蛋白,且重组菌株遗传性质稳定。结论:为研制基于Pfs25蛋白的传播阻断型恶性疟疾疫苗奠定了基础。
- 陈勇雷清刘晓马亚茹卜晓萍蒋琳
- 关键词：毕赤酵母组成型表达
- 用基因工程重组的HBcAg制备抗HBc单克隆抗体及临床应用被引量：1
- 1994年
- 用基因工程重组的ＨＢｃＡｇ制备抗ＨＢｃ单克隆抗体及临床应用蒋琳，谢溱，杨宗模，刘新铭（卫生部兰州生物制品研究所，７３００４６）我们用基因工程重组ＨＢｃＡｇ作为免疫原，制备了５株抗ＨＢｃ单克隆抗体，用于临床诊断，取得了较好的效果。１材料和方法１．１抗Ｈ...
- 蒋琳谢溱杨宗模刘新铭
- 关键词：基因工程单克隆抗体
- 毕赤酵母表达戊型肝炎病毒ORF-2结构蛋白
- 目的：克隆HEV-ORF-2基因，构建酵母整合型表达质粒，在巴斯德毕赤酵母表达系统里表达，并对发酵工艺进行优化。
方法：从戊肝病毒基因库中，用PCR方法获取目的基因，克隆至表达载体pPIC9和pPICZαB，并...
- 谢溱杨军卜晓萍辛芳蒋琳
- 关键词：毕赤酵母戊型肝炎病毒发酵工艺工程菌
- 文献传递
- 鼠神经生长因子的制备方法
- 本发明公开了一种鼠神经生长因子(NGF)的制备方法,它将传统工艺中的层析介质CM－52改为CM－FF。线性流速可提高到200cm/h,流速快,大大缩短了生产周期,适用于规模化生产。在颌下腺匀浆液离心后,使用CDR去脂,既...
- 沈心亮应莲芳卜晓萍蒋琳翟雷周敏毅
- 文献传递
- 中华仓鼠卵巢(CHO)工程细胞无血清培养的研究被引量：7
- 2004年
- 以DMEM∶F12(1∶1)为基础培养基,通过观察细胞生长状态和检测乙肝表面抗原的表达量作为评价指标,筛选适合于CHO工程细胞生长的生长因子,如胰岛素、转铁蛋白、氢化可的松、硒酸钠,丁二胺等。并且建立了J5SFM培养基。该培养基与商品化的无血清培养基比较,能够使细胞生长维持较长的时间,表达产物分泌量也相对较高。
- 李萍蒋琳黄思扬杨军李薇沈心亮
- 关键词：无血清培养基乙肝表面抗原
- RP-HPLC法检测CN_(10)蛋白的PEG化修饰率及含量被引量：3
- 2015年
- 目的建立一种简单有效的测定CN10蛋白PEG化修饰率的方法 ,用于PEG化修饰工艺中的质量控制。方法采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法,以TSKgel Octadecyl-4PW作为色谱分离柱,以含0.12%三氟乙酸(TFA)、5%乙腈的水溶液作为A相溶液,以含0.1%TFA的乙腈作为B相溶液,在50℃柱温条件采用分段线性洗脱的方式分离蛋白,并考察CN10蛋白以及PEG化修饰后CN10蛋白的量效关系,根据外标法检测CN10和CN10-PEG的蛋白含量,根据PEG化修饰前后CN10蛋白量效关系的变化推断CN10蛋白的PEG化修饰率。结果 PEG化修饰前后的CN10蛋白经TSKgel Octadecyl-4PW色谱柱层析均能达基线分离,当用214 nm波长检测时,CN10蛋白浓度以及PEG修饰后的CN10蛋白均与其对应峰面积呈现良好的线性关系(r2=0.999 58;r2=0.999 67)。结论建立了一种简单快速的检测CN10蛋白PEG化修饰率的方法 ,此方法具有较高的准确性及专属性,可用于CN10的PEG化修饰工艺的监测。
- 梁凌宇王婉茹郭玉婷陆俭杨军蒋琳
- 关键词：睫状神经营养因子反相高效液相色谱
- 注射用鼠神经生长因子研制被引量：1
- 2003年
- 神经生长因子(NGF)是一类能促进神经生长的多肽类生物活性特质.国内外许多研究证实NGF具有维持交感神经和感觉神经的生存、影响中枢神经元生长、促进神经细胞的分化、判定轴突生长等方面的生物学功能.我们把鼠神经生长因子作为一种非常有希望的临床药物进行开发,作为国家一类新药进行申报,其完成研究资料40余项,分为生产工艺和检定方法、稳定性试验、临床前药理、临床研究等四个方面.
- 沈心亮应莲芳翟雷蒋琳蒋琳王军志卜晓萍谢溱
- 关键词：神经生长因子NGF神经细胞临床药物
- 人巨细胞病毒糖蛋白gB基因重组腺病毒载体的构建及包装被引量：3
- 2008年
- 目的构建携带有人巨细胞病毒(HCMV)糖蛋白gB基因的重组腺病毒载体,并在HEK293细胞中进行包装。方法将gB基因克隆至穿梭质粒Track-CMV,构建重组质粒Track-CMV/gB,亚克隆至转移载体pAD-Easy-1,构建重组质粒pAD-Easy-1/gB,将该重组骨架质粒转染HEK293细胞,利用HEK293细胞产生重组腺病毒。空斑法及PCR法挑选重组病毒,荧光显微镜观察标志蛋白(绿色荧光蛋白)的表达,利用噬斑法检测病毒滴度。结果重组腺病毒载体经酶切鉴定证明构建正确,转染重组腺病毒载体的HEK293细胞经PCR扩增,可见约700bp的目的基因片段,荧光显微镜观察可见绿色荧光蛋白表达,空斑试验检测病毒滴度为2×106PFU/ml。结论已成功构建了含有gB基因的重组腺病毒载体,为进一步研制重组腺病毒载体HCMV疫苗提供了条件。
- 马超陈勇巩莉郭敏李萍蒋琳
- 关键词：人巨细胞病毒腺病毒载体
- 戊型肝炎病毒基因ORF3编码蛋白在大肠杆菌中的表达及鉴定被引量：4
- 2003年
- 实验以两种不同的表达策略构建了两个以大肠杆菌DE3为宿主的原核表达载体 ,由T7启动子启动外源基因的转录 ,在诱导剂IPTG诱导下成功地进行了戊肝病毒ORF3蛋白的原核表达。并通过SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳、免疫印迹、竞争抑制法酶联免疫等一系列实验对两种表达产物进行了鉴定和分析。综合分析两种表达结果发现 ,在融合型表达中ORF3蛋白与其融合标签蛋白 (谷胱甘肽S一转移酶 )之间存在免疫交叉反应 。
- 李启明沈心亮蒋琳雷清刘鹏
- 关键词：戊型肝炎病毒融合蛋白
- 鼠疫菌V抗原基因在大肠杆菌中的克隆及表达被引量：5
- 2003年
- 从鼠疫杆菌野毒株总DNA中利用PCR方法扩增出V抗原编码基因 ,将此基因克隆到大肠杆菌的表达质粒pET 42b( + )中 ,经IPTG诱导后 ,在大肠杆菌BL2 1 (DE3)细胞中成功地表达出鼠疫菌V抗原蛋白。目的蛋白表达量占菌体总蛋白的 32 8%。
- 傅林锋王秉翔李启明雷清蒋琳沈心亮
- 关键词：鼠疫菌大肠杆菌克隆
