赵俊伟
- 作品数:21 被引量:19H指数:2
- 供职机构:河南中医药大学更多>>
- 发文基金:国家科技重大专项上海市科委科技支撑计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生农业科学自动化与计算机技术更多>>
- 结核分枝杆菌RD5区编码蛋白在结核病血清学诊断中的应用
- 赵俊伟张苗苗玄松花周业成郭晓奎张舒林
- 结核分枝杆菌Rv3914抗原的克隆表达与纯化被引量:1
- 2011年
- 目的构建结核分枝杆菌Rv3914蛋白的重组质粒,并在大肠埃希菌中表达及纯化,为结核病血清学诊断提供候选抗原。方法用PCR方法从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增Rv3914基因片段,插入到pET-28b(+)载体中,构建pET28b-Rv3914重组质粒,转化大肠埃希菌E.coli BL21plysS(DE3),经IPTG诱导表达后,应用Ni-NTA亲和柱纯化重组蛋白。结果 PCR扩增出Rv3914基因序列,重组质粒经测序并经BLAST分析后发现无点突变。pET28b-Rv3914重组质粒在大肠埃希菌E.coli BL21plysS(DE3)中主要以可溶性形式表达,重组蛋白占细胞蛋白总表达量的30%以上,经Ni-NTA柱纯化后,得到纯度超过90%、相对分子质量约为14.7×103的目的蛋白质。结论高纯度结核分枝杆菌Rv3914重组蛋白的获得为研究结核互补特异性抗原组合在结核病血清诊断中的价值奠定了基础。
- 陈永金赵俊伟杨红国孙战强余晓丽张舒林
- 关键词:结核分枝杆菌克隆纯化
- 核分枝杆菌RD区特异性抗原ESXO和Rv3117的重组制备及其免疫原性评估
- 目的 应用免疫蛋白组学从结核分枝杆菌H37Rv基因组中的RD区筛选出两个新的结核特异性抗原,通过肽指纹质谱及其生物信息学的方法鉴定为结核分枝杆菌ESXO和Rv3117,构建重组蛋白ESXO和Rv3117,并对其免疫原性进...
- 叶娟赵俊伟陈翠翠封莉王凤平吴兴福刘文第张舒林
- 关键词:分枝杆菌结核克隆免疫原性
- 文献传递
- 一种Cel-CSO/Taxol NPs纳米药物及应用
- 本发明公开了一种Cel‑CSO/Taxol NPs纳米药物及应用,属于抗癌药物技术领域;制备方法包括以下步骤:将雷公藤红素壳寡糖偶联物Cel‑CSO和紫杉醇Taxol分别溶于甲醇中;将溶解后的雷公藤红素壳寡糖偶联物Cel...
- 曾华辉武香香曾小虎侯益民张婷婷赵俊伟
- 结核分枝杆菌Rv3120的重组蛋白、其制备方法及其在细胞免疫诊断中的应用
- 本发明提供一种结核分枝杆菌特异性标志物Rv3120的重组蛋白,其具有如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列。本发明还提供所述结核分枝杆菌Rv3120重组蛋白的编码核苷酸序列、所述重组蛋白的制备方法及其用途。本发明基于免...
- 张舒林孙战强赵俊伟余晓丽王洪海
- 文献传递
- 结核分枝杆菌蛋白Rv0315的克隆表达及其抗原性研究被引量:6
- 2012年
- 目的评价结核分枝杆菌重组蛋白Rv0315在结核病血清学诊断中的价值。方法采用常规分子克隆方法获得重组Rv0315蛋白,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测84份确诊结核病人血清和48份健康人血清中相应的抗结核抗体水平,并与结核分泌蛋白ESAT-6的检测结果进行比较。结果成功构建了重组蛋白Rv0315,其在E.coli BL21plysS(DE3)中主要以可溶性形式表达,分子量(30.3kDa)与预期相符,ELISA血清学活性评估显示其特异性和敏感性分别为94.0%(45/48)和35.7%(30/84)。结论重组蛋白Rv0315有望成为新的结核病血清学诊断候选抗原。
- 陈苏芳周业成赵静赵俊伟吴兴福孙战强玄松花张舒林
- 关键词:结核分枝杆菌克隆血清学诊断
- 结核分枝杆菌特异性抗原ESXO的重组制备及其免疫原性评估被引量:1
- 2012年
- 目的评估结核分枝杆菌(MTB)重组特异性抗原ESXO在大肠埃希菌中的高效表达,并评价其免疫原性。方法采用常规分子克隆方法获得MTB重组蛋白ESXO。酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测84份确诊结核病(TB)患者血清和48份健康人血清中相应的抗结核ESXO抗体水平,评价血清学抗原活性,并与结核早期分泌蛋白ESAT-6和CFP-10的检测结果进行比较。结果重组特异性抗原ESXO在大肠杆菌中获得成功表达,其在E.coli BL 21 plysS(DE3)中以可溶性和包涵体两种形式存在,相对分子质量(27 300)与预期相符,血清学抗原活性评估结果显示其特异度和敏感度分别为94.0%(45/48)和32.1%(27/84),特异度与ESAT-6和CFP-10相当,敏感度高于ESAT-6。结论结核特异性抗原ESXO有望成为新的TB诊断与疫苗设计的候选抗原。
- 封莉叶娟王凤平赵俊伟吴兴福张舒林
- 关键词:克隆基因表达血清学诊断
- 一种结核分枝杆菌标志物HtdY的重组蛋白及其制备方法和临床应用
- 本发明提供一种结核分枝杆菌标志物HtdY的重组蛋白及其制备方法和临床应用。本发明在筛选一种结核分枝杆菌HtdY蛋白的基础上,建立了一种基因工程制备技术,可应用于结核病临床检测,是一个活性较强的B细胞目标抗原,用于结核病检...
- 张舒林孙战强宋言峥赵俊伟王洪海
- 文献传递
- 7种结核分枝杆菌重组蛋白的纯化及血清学特性被引量:1
- 2013年
- 目的分离纯化结核分枝杆菌重组蛋白38-kDa、16-kDa、Mtb81、ESAT-6、CFP10、Rv3425、Rv3391,并比较7种蛋白的免疫学特性,评价其在结核血清学诊断中的应用价值。方法利用间接酶联免疫吸附试验评价确诊结核病人、非结核病人、健康人血清中7种重组蛋白的抗原性。结果成功分离纯化了7种重组蛋白;酶联免疫吸附试验结果表明,7种抗原均能有效区分确诊结核病人、非结核病人和健康人,其中阳性率最高的是ESAT-6为47.3%,特异性最高的是Rv3391为98.3%。联合抗原中阳性率和特异性最高的是CFP10+ESAT-6+Rv3391抗原组合。结论单一抗原中ESAT-6具有较高的免疫原性,联合抗原中CFP10+ESAT-6+Rv3391抗原具有很高的阳性率和特异性,在结核诊断具有很高的诊断潜力。
- 闫冀焕史玲莉韩伟崔鹰赵俊伟张舒林
- 关键词:结核分枝杆菌重组蛋白抗体抗原纯化
- 结核分枝杆菌特异性抗原Rv3117的克隆表达和诱导小鼠免疫应答的实验研究被引量:2
- 2012年
- 目的克隆表达结核分枝杆菌Rv3117蛋白,并进行诱导小鼠免疫应答的初步研究。方法通过聚合酶链反应(PCR)扩增结核分枝杆菌Rv3117基因,克隆入pET32a载体,构建重组质粒pET32a-Rv3117,转化入大肠埃希菌BL21(E.coli)plysS(DE3),异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍柱亲和纯化,通过SDS-PAGE鉴定其表达情况;以目的蛋白免疫C57BL/6小鼠血清并行Western blotting分析。结果成功构建原核表达载体pET32a-Rv3117,获得纯化的目的蛋白,其在E.coli BL21 plysS(DE3)中主要以可溶性形式表达,相对分子质量(48 100)与预期相符。Western blotting分析结果显示在目标位置有阳性条带。结论成功克隆结核分枝杆菌重组蛋白Rv3117,其能够诱导C57BL/6小鼠的免疫应答。
- 汤俊明陈翠翠王学才赵俊伟张舒林
- 关键词:结核分枝杆菌WESTERNBLOTTING