陈海珍
- 作品数:9 被引量:6H指数:1
- 供职机构:山西省儿童医院更多>>
- 发文基金:中央高校基本科研业务费专项资金上海市科学技术委员会资助项目上海市科学技术委员会科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 结核分枝杆菌5'-甲硫腺苷核苷酶、5'-甲硫腺苷磷酸化酶的表达、鉴定和结构分析
- 目的:克隆、表达、鉴定结核分枝杆菌Rv0091、Rv0535基因编码蛋白,建立酶活性检测方法,分析酶生化特性及活性位点,为进行晶体结构分析和活性位点鉴定奠定基础。
方法:构建Rv0091、Rv0535基因原核表达质...
- 陈海珍
- 关键词:结核分枝杆菌甲硫腺苷磷酸化酶酶活性检测重组蛋白
- 免疫磁珠荧光量子点技术检测结核分枝杆菌的方法学研究和初步评估被引量:1
- 2013年
- 目的建立免疫磁珠荧光量子点技术检测MTB的方法,探讨最佳检测条件并进行初步评估。方法以MTB标准株H37Rv、12种非结核分枝杆菌(NTM)标准株及3种非分枝杆菌为检测对象,免疫磁珠和功能化荧光量子点作用为对照组。利用湿化学方法制备纳米磁珠和荧光量子点,分别与MTB结合肽H8偶联,获得同时与H37Rv作用的免疫磁珠和功能化荧光量子点,形成三元复合物结构,通过测量荧光值及荧光显微镜观察判定样品中是否存在MTB,建立纳米技术检测MTB的新方法,进一步探讨免疫磁珠和功能化荧光量子点的最佳检测浓度及作用时间。利用菌悬液和模拟痰标本,对该检测方法的检测下限和特异度进行初步评估。结果偶联的免疫磁珠和功能化荧光量子点均能与H37Rv结合,镜下可见其与H37Rv作用的三元复合物,实验组与对照组的荧光值比值约为4:1;免疫磁珠和功能化荧光量子点最佳检测浓度均为100mg/L,最佳作用时间为2h;H37Rv菌悬液和模拟痰标本检测下限均为10。CFU/ml;特异度检测结果,3种非分枝杆菌在显微镜下均未见红色荧光,荧光值小于对照组,为阴性;12种NTM菌悬液和模拟痰标本检测时,仅副偶发分枝杆菌、金色分枝杆菌、耻垢分枝杆菌和偶发分枝杆菌在显微镜下可见红色荧光,荧光值与对照组的比值均〉2,判断为阳性,其余均为阴性。结论免疫磁珠荧光量子点技术检测技术有可能成为检测MTB的新方法,但其临床应用价值尚有待进一步评估。
- 马慧胡忠义王祎龙秦莲花陈海珍陆俊梅杨华
- 关键词:分枝杆菌结核量子点免疫磁珠
- 免疫磁珠荧光量子点技术检测结核分枝杆菌被引量:4
- 2013年
- 目的筛选结核分枝杆菌(MTB)免疫磁珠荧光量子点检测方法的最佳配体组合。方法将本室筛选获得的MTB结合肽H8和商业化抗MTB多克隆抗体(Pab)与纳米磁珠偶联,多肽H8、商业化抗MTB单克隆抗体(Mab)和抗热休克蛋白65单克隆抗体(Mabc)与荧光量子点偶联,分别获得2种免疫磁珠和三种功能化荧光量子点,两两组合用于MTB检测,通过显微镜下观察荧光信号以及激光诱导荧光仪测量荧光值,判断不同配体组合与MTB的亲和性及特异性,获得最佳组合及其检测下限。结果偶联Mabc的荧光量子点与免疫磁珠MNP-Pab组合检测MTB结果为阴性,其余5组均为阳性。测量荧光值,检测效果较好的两组组合分别是MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8,阳性荧光值与阴性对照组比值分别是4.394和3.956,检测下限均是102条菌/mL。6组组合与12种非结核分枝杆菌(NTM)的亲和性各异,而与3种非分枝杆菌均不结合。结论 MNP-Pab+QD-H8和MNP-H8+QD-H8两组检测效果较好,与MTB亲和性较高,特异性较好,可作为MTB免疫磁珠荧光量子点检测技术的最佳配体组合。
- 马慧王祎龙胡忠义秦莲花陈海珍陆俊梅王洁柏文娟郭琪高诗会杨华
- 关键词:免疫磁珠分枝杆菌结核配体
- 儿童肾病综合征与免疫球蛋白的关系分析
- 目的探讨原发性肾病综合征患者血中免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)的变化及临床意义。了解肾病的发病机制,指导临床治疗。方法采用免疫比浊法对206例原发性肾病综合征患者血中的免疫球蛋白进行测定并进行统计学处理比较。其中包...
- 陈海珍闫利方
- 关键词:肾病综合征免疫球蛋白
- 文献传递
- 血常规分析仪不能替代显微镜检查被引量:1
- 2007年
- 张士勖陈海珍
- 关键词:镜检血细胞分析仪血涂片
- 高压氧联合轻度全身降温模式治疗脑损伤术后患儿56例疗效观察
- 2024年
- 目的探讨高压氧(HBO)联合轻度全身降温模式治疗脑损伤术后患儿的临床疗效。方法选取2019年7月至2022年2月山西省儿童医院小儿重症监护病房收治的脑损伤术后患儿112例作为研究对象。按照随机数字表法分为观察组和对照组,每组56例。2组患儿常规对症支持治疗后,对照组予以头部降温联合HBO治疗,观察组给予轻度全身降温联合HBO治疗。比较2组患儿治疗前后格拉斯哥昏迷评分(GCS)、功能独立性评定(FIM)评分、动脉血氧分压、经皮血氧饱和度的变化。采用简易智力状态检查量表(MMSE)和Loewenstein认知功能评定量表(LOTCA)对2组患儿治疗前后的认知能力进行评定。采用酶联免疫吸附法检测2组患儿治疗前后血清纤维凝胶蛋白(ficolin-3)水平,采用实时荧光定量PCR实验检测2组患儿治疗前后微小RNA-34a(miR-34a)的相对表达量。随访6个月,比较2组患儿的预后良好率。结果与治疗前比较,2组患儿治疗后GCS、FIM评分、MMSE评分、LOTCA评分、动脉血氧分压、经皮血氧饱和度及血清ficolin-3水平均明显升高(P<0.01),且观察组患儿治疗后均明显高于对照组(P<0.05或P<0.01);血清miR-34a相对表达量明显降低(P<0.01),且观察组患儿治疗后miR-34a相对表达量明显低于对照组(P<0.01)。在随访6个月后,观察组患儿预后良好率(52.83%)明显高于对照组(40.74%),差异有统计学意义(P<0.05)。结论HBO联合轻度全身降温模式治疗脑损伤术后患儿,能提高其脑组织氧含量,有效改善患儿的昏迷程度和认知功能,进一步提高认知能力和预后良好率。
- 刘晓莉刘赵鹤陈海珍吴丽莉王振芳
- 关键词:脑损伤患儿高压氧
- 结核分枝杆菌甲硫腺苷核苷酶的原核表达及活性分析
- 2012年
- 目的克隆、表达、鉴定结核分枝杆菌(MTB)Rv0091基因编码蛋白,分析酶活性,初步鉴定其功能。方法构建Rv0091基因原核表达质粒,在大肠杆菌BL21trxB进行表达,经IPTG诱导,Ni2+-NTA柱纯化后获得可溶性蛋白,通过SDS-PAGE分析目的蛋白纯度、Westernblot进行免疫学活性鉴定、质谱分析重组蛋白相对分子质量、酶耦联法检测酶活性,分析酶学性质。结果成功构建Rv0091基因原核表达质粒,建立了可溶性蛋白最佳表达体系,获得纯度在95%以上的可溶性蛋白,Westernblot结果证实重组蛋白为结核分枝杆菌蛋白,质谱鉴定其相对分子质量与理论值基本一致,酶学活性实验证实重组蛋白能够分解底物5’一甲硫腺苷(MTA),酶学性质分析表明最适缓冲液为磷酸盐缓冲液和Hepes,酶的热稳定性较差,37℃为最适反应温度,最适pH为10~12。结论初步证明该重组蛋白在体外能够分解MTA,发挥甲硫腺苷核苷酶(MTAN)的作用,可能在MTB的代谢中起关键作用。
- 陈海珍杨华胡忠义杨焕森马慧高诗会郭琪柏文娟秦莲花李连青
- 关键词:结核分枝杆菌重组蛋白酶活性分析
- 儿童血细胞复检规则的建立及在临床诊断中的应用被引量:1
- 2019年
- 目的建立适用于儿童血细胞的复检规则,保证血细胞分析结果的准确,确保病理细胞不漏检。方法抽取2018年5至6月在山西省儿童医院就诊的门诊和住院患儿血细胞分析标本共计1420份,采用SYSMEX XN-350和XN-A1全自动血细胞分析仪检测,同时进行血涂片双盲法人工镜检。其中463份用于复检规则的建立,586份用于复检规则的验证,371份用于复检规则的应用效果研究。参照国际血液学复检专家组推荐的41条复检规则,结合儿童生理、病理、疾病特点及血液分析仪异常报警信息,建立适合儿童血细胞的复检规则。结果通过对国际41条复检规则的评估和优化,制定了23条儿童血细胞分析复检规则,复检率25.09%,假阳性率14.16%。定向选取血液病患者标本371份用于复检规则的应用效果研究,假阴性率2.96%,无病理细胞漏检。结论本研究建立的儿童血细胞复检规则经过验证和应用评估,既保证报告质量,又提高了工作效率,为儿童白血病、传染性单核细胞增多症及其他血液系统疾病的诊断和鉴别诊断提供了重要依据。
- 陈海珍赵锐
- 关键词:复检规则血细胞分析儿童血液病
- 噬菌体展示技术在病原体血清学检测中的应用研究进展
- 2013年
- 噬菌体展示技术广泛应用于临床治疗、诊断和科研等诸多领域并在病原体血清学检测新方法的研究方面显示出明显优势。利用该技术研究者可以在短期内筛选获得具有检测及诊断价值的抗原表位、特异性的结合肽以及重组抗体分子,彻底改变了抗体制备的传统途径,使得大量制备多样化的重组抗体分子成为可能。掌握噬菌体展示技术在病原体血清学检测中的特点,为该技术在筛选目标靶分子的血清学检测中寻求新的突破。
- 陈海珍胡忠义李连青杨华
- 关键词:噬菌体展示技术病原体血清学检测