黄朋
- 作品数：6 被引量：8H指数：2
- 供职机构：广西医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广西壮族自治区自然科学基金广西壮族自治区科学研究与技术开发计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 肝癌新标记物用于肝癌早期诊断研究体系的建立和应用研究
- 周素芳蓝秀万凌敏蔡丹昭邓勇李晓龙张鹏林朝群黄朋范升龙涂镇波李玲张胜昌
- 该项目来源于广西科技研究与技术开发项目“肝癌新标记物用于肝癌早期诊断研究体系的建立和应用研究”(桂科攻10124001A-2)。利用改良的SEREX技术从广西肝癌人cDNA文库和人胚胎干细胞cDNA文库中筛选到了30个与...
- 关键词：
- 关键词：肝癌
- 肝癌相关抗原SMP30重组基因的构建、表达及分子伴侣共表达系统的探索被引量：3
- 2012年
- 旨在通过应用基因工程的方法构建、表达和纯化肝癌相关抗原SMP30,研究共表达分子伴侣提高基因工程蛋白表达的可溶性及效率。PCR扩增SMP30 cDNA序列,用基因工程技术构建重组表达质粒,转化E.coliBL21(DE3)pLysS宿主菌。表达蛋白经Ni-NTA亲和柱纯化获得HIS-SMP30融合蛋白;分别将4种表达不同分子伴侣的质粒(pG-KJE8、pGro7、pKJE7、pTf16)转入E.coliBL21(DE3)中;然后再将重组质粒转入含有分子伴侣质粒的细胞中,进行分子伴侣与重组质粒的共表达,SDS-PAGE检测目的蛋白的表达量与可溶性分析。经优化表达条件后,目的蛋白以包涵体形式表达,目的蛋白占总蛋白的60%以上;纯化后纯度高达95%以上;诱导共表达后,目的蛋白在上清含量极少,不到总表达目的蛋白的10%。成功构建出高效表达的SMP30重组质粒;加入到诱导表达体系中的4种分子伴侣质粒不能有效的促进可溶性蛋白的表达,pTf16共表达系统能增加目的蛋白表达量。
- 黄朋范升龙凌敏贺菽嘉周素芳
- 关键词：基因工程共表达
- 保温小室在组织芯片免疫组化中避免“边缘效应”的作用
- 2012年
- 目的探讨保温小室在组织芯片免疫组化中避免"边缘效应"的作用。方法采用常规免疫组化SP两步法,实验分为两组,一组采用保温小室,另一组采用免疫组化PAP笔,同时改良抗体滴加方法。结果 40例肺癌组织芯片采用保温小室,32例肝癌组织芯片、各40例胃癌及鼻咽癌组织芯片使用免疫组化PAP笔,分别计算边缘组织和中央组织平均光密度值。经统计发现不论是采用保温小室或免疫组化PAP笔,4种组织切片边缘与中央部位平均光密度值相比,差异无统计学意义。结论采用保温小室较免疫组化PAP笔更为简单易行,在组织芯片免疫组化染色时避免"边缘效应"方面保温小室可取代免疫组化PAP笔。
- 涂镇波李玲冯安林黄朋李晓龙周素芳
- 关键词：组织芯片免疫组化
- 肝癌相关抗原H2-calponin基因重组质粒的构建与表达
- 2012年
- 目的应用基因工程的方法构建H2-calponin(CNN2)基因工程表达质粒,体外表达、分离、纯化CNN2蛋白。方法以PCR扩增CNN2cDNA序列,用基因工程技术将CNN2基因重组到表达质粒pColdⅢ中,转化BL21(DE3)pLysS宿主菌,以SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate polyacrylamideg elelectrophoresis,SDS-PAGE)检测目的蛋白的表达情况,优化表达条件,以较大体积培养基因工程菌,菌体经超声波破菌后,过Ni-NTA亲和柱纯化,Western-blot检测表达纯化的融合蛋白。结果转化有pColdⅢ-CNN2重组质粒的基因工程菌能诱导表达CNN2蛋白,表达的目的蛋白占总菌体蛋白的35%;SDS-PAGE检测发现菌体上清液和沉淀物中均有目的蛋白片段,证实部分CNN2蛋白以可溶性形式表达;Western-blot检测结果提示表达纯化的蛋白能与抗CNN2抗体发生反应。结论成功构建出表达可溶性CNN2蛋白的重组质粒,诱导表达的蛋白具有CNN2免疫原性。
- 范升龙黄朋涂镇波李玲张胜昌陆巧巧赵赫周素芳
- 关键词：肝肿瘤基因工程纯化
- 分子伴侣促进SMP30蛋白可溶性表达及表达蛋白在HCC血清检测中的作用
- 目的：应用基因工程方法构建、表达和纯化肝癌相关抗原SMP30；探索分子伴侣促进两种重组质粒表达可溶性SMP30蛋白的策略；分离纯化SMP30蛋白,利用SMP30作为抗原检测HCC患者血清中抗SMP30抗体的表达情况。方法...
- 黄朋
- 关键词：HCC
- 文献传递
- 钙结合蛋白S100A13在肝癌组织中的表达及其临床意义被引量：4
- 2011年
- 目的:探索钙结合蛋白S100A13(S100 calcium binding protein A13,S100A13)在肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及其临床意义。方法:收集广西医科大学第一附属医院34例HCC及相应癌旁组织、18例正常肝组织标本,商业购置197例肝癌及相应癌旁高密度组织芯片。应用原位RT-PCR技术检测HCC组织、癌旁组织、正常肝组织中S100A13 mRNA的表达,使用免疫组织化学技术检测HCC组织、癌旁组织、正常肝组织中S100A13蛋白的表达,并用Image-ProPlus软件分析免疫组织化学光密度值。结果:S100A13 mRNA在HCC、相应癌旁和正常肝组织中表达的阳性率分别为70.21%、51.06%和33.33%;S100A13 mRNA定位主要在胞核,多表达于核膜。S100A13蛋白在HCC、相应癌旁和正常肝组织中表达的阳性率分别为55.84%、38.96%及26.32%,HCC组织中的平均D值最高(0.038±0.051),其次是癌旁组织(0.022±0.034),正常肝组织(0.01±0.009)最低(P<0.05);S100A13蛋白主要表达于HCC细胞的胞质中,部分细胞核偶见表达,此外在癌旁次生胆小管中及部分炎细胞中也存在高表达。S100A13蛋白在HCC中的表达与患者的性别、年龄及病理分级无关。结论:HCC组织高表达S100A13蛋白,S100A13可能具有作为肝癌治疗靶点的潜力。
- 张鹏黄朋郭先文雷荣娥岳成思凌敏林文珍蔡丹昭贺菽嘉唐文珏周素芳
