李树民
- 作品数：10 被引量：21H指数：3
- 供职机构：解放军军需大学军事兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家科技攻关计划吉林省科委资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 白喉毒素(Gly_4Ser)_2-人表皮生长因子融合蛋白的纯化及其特异性细胞毒性研究被引量：6
- 2004年
- 张国利吴广谋李俊植岳玉环李树民朱平
- 关键词：白喉毒素特异性细胞毒性DT
- LHRH-PE40对荷瘤BALB/c小鼠抗肿瘤效果的实验研究被引量：4
- 2002年
- 目的 观察LHRH-PE40对小鼠腹水瘤及实体瘤的治疗效果,为确定药理、毒理学实验剂量提供依据。方法 分别给BALB/c小鼠腹腔内和背部皮下接种骨髓瘤SP2/0细胞,接种后第4d和第9d,分别腹腔注射LHRH-PE40,并设空白对照组,停药后第5d处死,观察两组小鼠腹水和腹腔内肿瘤生长情况,称量瘤重,计算抑瘤率。结果 腹水瘤实验组所有小鼠腹部未见腹水,腹腔未见肿瘤。实体瘤实验组抑瘤率为54％。结论LHRH-PE40可以有效地抑制荷瘤小鼠实体瘤的生长。
- 李树民李俊植吴广谋张国利朱平
- 关键词：LHRH-PE40抗肿瘤效果免疫毒素
- 沙门氏菌的研究进展
- 本文就沙门氏菌致病机制以及细菌的主要保护性抗原与免疫机理和一些毒力相关基因的特点进行了评述,以期为研究抗感染治疗和疫苗的研制提供一定的理论基础.
- 李树民李铁征冯书章
- 关键词：沙门氏菌粘附因子保护性抗原免疫
- 文献传递
- LHRH-PE40注射剂对体外培养人肿瘤细胞系的细胞毒作用被引量：6
- 2001年
- 目的 观紊ＬＨＲＨ－ＰＥ４０注射剂对体外培养的人肿瘤细胞的细胞毒作用。方法 用ＭＴＴ检恻 ＬＨＲＨ－ＰＥ４０对体外培养的人肿瘤细胞的细胞毒作用，找出敏感肿瘤细胞系。结果ＬＨＲＨ－ＰＥ４０对体外培养的多 种人肿庙细胞具有细胞毒作用，细胞对药物的敏感程度依次为：ｓｍｍｕｕ７７２１（人肝癌）＜ＨＥＰＧ２（人肝癌）＜ＨＣＴ－８(人结肠癌）＜ＭＣＦ－７（人乳腺癌）＜Ａ５４９（人肺腺癌）＜ＭＧＣ－８０３（人胃癌）。结论 为动物体内的药效学研究和临 床用药提供依据。
- 吴广谋朱平李俊植张国利李树民何畅
- 关键词：LHRH-PE40MTT法癌细胞系细胞毒
- EGF-PE35KDEL重组毒素的基因构建及表达被引量：1
- 2003年
- 目的 构建表达有特异细胞毒性融合蛋白的工程质粒。方法 利用PCR扩增出PE3 5KDEL基因片段 ,经酶切后插入EGF PET2 8A载体 ,并转化至BL2 1(DE3 )中。采用Westernblot对重组毒素进行鉴定。结果EGF PE3 5KDEL重组毒素占菌体总蛋白的 2 0 % ,分子量约为 410 0 0。结论 EGF PE3
- 李树民李丽萍岳玉环李铁征邱业峰朱平
- 关键词：基因构建绿脓杆菌外毒素重组毒素
- EGF-Ang融合蛋白的构建、表达及活性研究被引量：3
- 2002年
- 目的:构建由人表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)和人血管生成素(angiogenin,Ang)组成的人源化的融合蛋白,并检测其对肿瘤细胞的靶向杀伤能力。方法:利用基因工程技术将EGF和Ang基因连接起来,克隆到高效表达载体pET28a(+)中,构建重组表达质粒pEGF-Ang,并在大肠杆菌中表达该融合蛋白(EGF-Ang)。经DEAE-Sepharose FF阴离子交换柱层析纯化后,用MTT法检测复性蛋白的细胞毒性。结果:SDS-PAGE和薄层扫描分析表明外源蛋白的表达量占菌体裂解蛋白总量的18.6％。细胞活性检测表明EGF-Ang重组蛋白能明显地抑制Hep2细胞的生长,而不影响MA104细胞的正常生长。结论:融合蛋白EGF-Ang在体外对过度表达EGFR的Hep2细胞具有明显的杀伤作用。
- 岳玉环朱平朱冬冬张国利李树民李铁征
- 关键词：表皮生长因子血管生成素融合蛋白细胞毒性EGF
- 白喉毒素-(Gly4Ser)2-人表皮生长因子融合蛋白的基因构建与表达纯化及其特异性细胞毒性研究
- 为了获得高活性的白喉毒素与表皮生长因子重组毒素用于肿瘤治疗,在二者之间加入柔性连接Linker,然后在原核表达系统中进行表达并纯化。基本方法是利用PCR技术从克隆有白喉毒素全基因的pGEM-T Vector中扩增出DDA...
- 张国利刘雨玲吴广谋李俊植李树民岳玉环朱平
- 文献传递
- EGF-PE40抗原性检定
- 2001年
- :EGF-PE4 0是由人表皮生长因子 ( EGF)基因与绿脓杆菌外毒素 A( PEA)的跨膜亚单位和毒力亚单位( PE4 0 )基因融合 ,在大肠杆菌内表达的重组毒素。它可以特异性识别 EGF受体过度表达的癌细胞 ,具有特异杀伤癌细胞的作用。该融合蛋白的 Mr为 4 .55× 1 0 4,如作为药物长期静注可能致使病人体内抗体水平增高 ,从而影响其药效。本试验以家兔为模型 ,连续 2 8d( 1个疗程 )静注 EGF-PE4 0纯品 ,应用 ELISA和琼扩分别测定了其血清中结合抗体水平和中和抗体水平的动态变化。结果显示 ,血清结合抗体水平随静注时间的延长而增高 ,2 8d时最高可达 1∶ 2 1 2 ;在静注 EGF-PE4 0的同时 ,静注 2倍于人体剂量的免疫抑制剂环磷酰胺 ,其血清结合抗体水平与不用环磷酰胺组相比虽略有降低 ,但经 F检验 ,二者无显著性差异 ;应用试验 2 8d结合抗体水平最高的兔血清与不同质量浓度 ( 80、4 0、2 0、1 0、5、2 .5mg/ L)的 EGF-PE4 0进行琼扩 ,均无沉淀线产生 ;被检血清、健兔血清和阳性对照血清分别与质量浓度为 1 0 5、35、2 8mg/ L的 EGF作用 2 4 h后 ,再与阳性对照血清进行琼扩反应 ,结果除阳性对照血清与 1 0 5mg/ L EGF-PE4 0的反应物无沉淀生成外 ,其余各孔均有沉淀线生成 ,表明连续 2 8d用药未在兔体内产生可检测到的中?
- 董冰朱平张国利李树民
- 关键词：抗原性中和抗体环磷酰胺
- 抗癌胚抗原单链抗体-PE40免疫毒素基因的克隆与表达
- 2004年
- 目的扩增抗癌胚抗原单链抗体(CEA-ScFv),与绿脓杆菌外毒素(PE40)进行重组及原核表达,旨在进一步研究重组蛋白CEA-ScFv-PFA0的靶向抗肿瘤作用。方法分别扩增抗癌胚抗原单链抗体的重链区、轻链区,用overlap PCR按照VH-VL的顺序连接,克隆至pMD18T载体中。再将VH-VL基因片段与含有.PE40的表达载体pET28a连接,转化B121(DE3),IPTG诱导表达。结果经DNA测序,其结果与设计完全相符。SDS-PAGE分析,在相对分子质量66000处可见明显表达带,表达量可占菌体蛋白总量的13％以上。免疫印迹表明重组蛋白具有PF40的抗原特异性。结论抗癌胚抗原单链抗体-PE40免疫毒素的成功克隆与表达,为进一步研究其生物活性奠定基础。
- 邱业峰孟锐奇李树民李铁征朱平
- 关键词：绿脓杆菌外毒素免疫毒素基因克隆
- 人白细胞介素2-Linker-PE38重组毒素的构建被引量：2
- 2002年
- 目的 构建人白介素 2 linker PE38融合基因 ,为进一步表达具有特异性杀伤作用的融合蛋白奠定基础。方法 用PCR方法扩增绿脓杆菌外毒素 (PEA)衍生物PE38基因及柔性连接肽linker片段 ,并与人白介素 2 (Interleukin2 ,IL2 )基因连接插入质粒pET2 8a中。结果 构建的表达载体经核苷酸测序分析无突变发生。结论 成功地构建了表达质粒pIL2 linker Pe38。
- 赵凯军岳玉环张国利朱平高凤桐李树民李丽萍吴广谋李铁征
- 关键词：人白细胞介素2重组毒素肿瘤免疫导向治疗
