杨秀清
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 供职机构：军事医学科学院微生物流行病研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 鼠源抗B型肉毒毒素Fab抗体库的构建及初步筛选
- 2007年
- 目的:应用重组噬菌体抗体库技术制备抗B型肉毒毒素Fab抗体。方法:用重组B型肉毒毒素重链C端片段(BoNTB/Hc)免疫BALB/c小鼠,从其脾淋巴细胞扩增免疫球蛋白Fd段和κ链基因,克隆至表达载体pComb3中,并将抗体Fab段表达于噬菌体表面,建立容量为5.96×106cfu的噬菌体抗体库。以BoNTB/Hc为抗原对所建抗体库进行4轮亲和筛选,获得与B型肉毒毒素特异性结合的克隆,并进行序列测定。结果:构建了抗B型肉毒毒素Fab抗体库,筛选出特异性克隆1个。结论:从鼠源噬菌体免疫抗体库中初步获得了特异性抗B型肉毒毒素的Fab抗体。
- 杨秀清王慧史晶侯晓军包士中荫俊
- 关键词：B型肉毒毒素FAB噬菌体抗体库
- 抗B型肉毒毒素鼠源中和抗体快速制备及其免疫学活性的初步研究
- 肉毒毒素是肉毒梭状杆菌产生的外毒素，属神经强毒，人类的肉毒中毒主是由A,B和E引起。是目前已知毒性最强的细菌蛋白质之一，是重要的生物战剂。本论文以定向免疫和噬菌体展示技术为平台，探索了一种快速制备及筛选鼠源抗体的技术路线...
- 杨秀清
- 关键词：表达纯化噬菌体抗体IGY生物战剂
- 文献传递
- B型肉毒毒素重链C端基因的表达与保护作用的初步研究被引量：2
- 2005年
- 肉毒毒素是肉毒梭状杆菌产生的外毒素,有7种血清型(A～G),是目前已知的毒性最强的细菌蛋白质。人类肉毒中毒主要是由A、B和E型引起。本研究克隆了B型肉毒毒素重链C端片段(Hc),在大肠杆菌中进行了诱导表达,并用Ni离子亲和柱进行了纯化。Hc蛋白免疫后的BALB/c小鼠可以抵抗6×103LD50B型肉毒毒素攻击。
- 杨秀清荫俊
- 关键词：B型肉毒毒素外毒素免疫保护疫苗
- 肉毒毒素结构及其重组疫苗的相关研究进展被引量：4
- 2005年
- 肉毒毒素是肉毒梭状杆菌产生的外毒素,有7种血清型(A～G)。肉毒毒素属神经强毒,是目前已知的毒性最强的细菌蛋白质。作为重要的生物战剂之一,对肉毒毒素的研究已经相当深入,基本明确了各型肉毒毒素的基因序列、同源性和三维结构及毒素作用的本质和机理。随着国际恐怖活动的日益猖獗,针对肉毒毒素的检测和预防也备受关注,对其疫苗的探索已成为研究的焦点。本文扼要介绍了肉毒毒素的结构、作用机制及其疫苗的相关研究进展。
- 杨秀清荫俊
- 关键词：肉毒毒素重组疫苗外毒素
- 鼠源抗B型肉毒毒素单链抗体噬菌体文库的构建筛选及抗体免疫学活性的初步研究被引量：4
- 2007年
- B型肉毒毒素重链C-端片段(BoNTB/Hc)经金属螯和层析法纯化后免疫Balb/c小鼠,从其脾淋巴细胞中提取总RNA,反转录成cDNA,用抗体可变区混合引物进行全套抗体重、轻链可变区基因的扩增,体外随机装配成单链抗体(scFv)。将其克隆至pCANTAB5E中,构建单链抗体噬菌体抗体库。结果表明经过4轮"吸附-洗脱-扩增"的富集过程,筛选获得高亲和力的克隆。序列测定符合抗体可变区结构特点。
- 杨秀清王慧史晶蔡昆侯晓军包士中荫俊
- 关键词：B型肉毒毒素SCFV噬菌体抗体库
