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硒化合物调控凋亡相关microRNA诱导宫颈癌细胞凋亡: 目的:探讨二氧化硒(SeO2)对宫颈癌细胞凋亡的诱导作用及其表观调控机制,明确硒化合物抗肿瘤作用的机制,为其作为抗癌药物的开发提供实验依据。　　方法:1.细胞培养与分组:选择不同 HPV亚型宫颈癌细胞株 Hela细胞、C...; 熊洁琦; 关键词：宫颈癌细胞凋亡硒化合物; 文献传递

免疫荧光检测核因子-κB活化的定量分析被引量：1: 2015年; 免疫荧光可定性分析细胞内蛋白核转位现象,NF-κB/p65蛋白核转位提示NF-κB信号通路的活化,我们尝试运用自主研发设计的免疫荧光分析软件计算荧光图像中胞核和胞质位置的荧光值变化,定量分析核转位情况,并通过蛋白质免疫印迹法验证软件分析结果。应用该软件分析内毒素诱导0.5、1、2和4h后原代人脐静脉内皮细胞的NF-κB信号通路活化,结果提示2h为核转位高峰期,与蛋白质免疫印迹法验证结果一致,表明自主研发的免疫荧光分析软件可应用于免疫荧光的定量分析。; 修敏何凤娄远蕾徐露熊洁琦王平刘丝荪郭菲; 关键词：免疫荧光 NF-ΚB 人脐静脉内皮细胞内毒素

二氧化硒调控凋亡相关蛋白诱导宫颈癌细胞凋亡的影响被引量：2: 2014年; 目的探讨二氧化硒(SeO2)对宫颈癌细胞株Hela凋亡的诱导作用及其对凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)、P53表达的影响。方法用光学显微镜观察Hela细胞经过SeO2处理24h后的形态学变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测SeO2对Hela细胞增殖及活力的影响;利用流式细胞术(FCM)检测Hela细胞凋亡率;用Western blot检测Hela细胞内caspase-3、P53蛋白表达的变化。结果光学显微镜下SeO2可对Hela细胞生长形态产生明显影响,大量细胞变圆皱缩,失去正常形态,贴壁细胞减少,增殖减慢;MTT结果显示SeO2对Hela细胞的抑制作用呈量效依赖关系,其中7.500、15.000、30.000μmol/L组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);0、1.875、3.750、7.500、15.000、30.000μmol/L SeO2诱导Hela细胞凋亡率分别为3.12%、30.56%、33.42%、37.50%、45.43%、69.38%,呈明显上升趋势。Western blot分析显示SeO2可上调caspase-3与P53蛋白水平,并于7.500μmol/L处达到峰值。结论 SeO2可能通过上调caspase-3、P53的表达诱导宫颈癌细胞凋亡。; 刘丝荪熊洁琦闵庆华郭玲修敏何凤娄远蕾郭菲; 关键词：二氧化硒细胞凋亡半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 P53

硒化合物诱导高危型HPV亚型宫颈癌细胞凋亡: 2017年; 目的探讨二氧化硒(SeO_2)对高危型HPV亚型宫颈癌细胞凋亡的诱导作用及其分子途径。方法不同浓度SeO_2分别作用于高危型HPV亚型宫颈癌细胞He La(HPV18+)和Caski(HPV16+)24 h,光学显微镜下观察细胞形态;四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖及活力;流式细胞计量术(FCM)检测细胞凋亡率;Western blot测定细胞内caspase-3和p53蛋白表达;Stem-loop实时定量PCR检测凋亡相关miRNA LET-7a表达。结果 SeO_2作用后宫颈癌细胞变圆、皱缩;SeO_2呈量效依赖关系抑制宫颈癌细胞增殖,其中He La细胞在7.5~30μmol/L组抑制作用显著;Caski细胞在SeO_2低浓度组即有显著抑制作用(P<0.05)。宫颈癌细胞凋亡率亦随SeO_2浓度升高而升高,在Caski细胞上升更加明显。SeO_2可明显上调宫颈癌细胞系中caspase-3与p53蛋白水平,在He La细胞中二者均于7.5μmol/L处达到峰值。Caski细胞从7.5μmol/L组开始凋亡蛋白表达量显著性升高(P<0.05)。SeO_2还可显著上调两细胞系实验组细胞LET-7a表达水平,且均在7.5μmol/L处出现峰值。结论 SeO_2通过上调高危型HPV亚型宫颈癌细胞中凋亡相关蛋白p53蛋白及miRNA LET-7a的表达,经caspase-3途径诱导细胞凋亡。对于SeO_2诱导宫颈癌细胞凋亡,HPV16+型较HPV18+型宫颈癌细胞更为敏感。; 熊洁琦郭玲郭玲娄远蕾娄远蕾刘丝荪

免疫荧光检测核因子-κB活化的定量分析: 目的:免疫荧光分析软件检测内毒素(LPS)诱导原代人脐静脉内皮细胞(HUVECs)NF-κB信号通路的活化. 方法:原代分离HUVECs,随机分为6组:空白对照组(无LPS处理)、LPS刺激组(1ug/ml L...; 修敏何凤娄远蕾徐露熊洁琦王平李国辉郭菲; 文献传递

二氧化硒对宫颈癌细胞的抑制作用及机制: 目的:探讨二氧化硒(SeO2)对宫颈癌细胞株Hela的增生、凋亡以及P53、caspase-3蛋白表达的影响。方法用光学显微镜观察Hela细胞经过SeO2处理24小时后的形态学变化;用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测S...; 熊洁琦刘丝荪冯年花娄远蕾郭菲; 关键词：宫颈癌 P53 CASPASE-3 二氧化硒; 文献传递

镧化合物对肿瘤与正常组织细胞活力作用差异的体外观察被引量：1: 2013年; 目的探讨氯化镧体外对不同肿瘤及正常组织细胞活力的影响。方法采用MTT法检测氯化镧对肿瘤细胞系Hela、Caski的体外抑瘤效应及对正常细胞系HUVEC、脂肪干细胞ADSCs体外毒性。结果氯化镧浓度大于5μmol/L时对宫颈癌细胞Hela即有明显的抑制作用(P<0.05);低浓度组(5μmol/L)对Caski生长略有促进作用,其后随着氯化镧浓度的增高抑制作用愈见明显,与对照组有显著差异(P<0.05)。而这一浓度范围内的氯化镧对正常细胞系HUVEC、ADSCs无明显毒副作用,相反可促进细胞生长。结论一定浓度的氯化镧对肿瘤细胞的生长增殖有明显抑制作用,而对正常细胞的生长则有一定的促进作用。; 熊洁琦刘丝荪何凤胡国文修敏胡意; 关键词：稀土镧细胞活力 MTT

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熊洁琦