索青利
- 作品数:6 被引量:66H指数:1
- 供职机构:华南农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生生物学更多>>
- 口蹄疫病毒G-01株基因组编码区的序列分析
- 本研究参考GenBank中O型FMDV全基因序列,分段设计了9对引物,应用RT-pCR方法对G-01株的基因组编码区序列进行了克隆和序列测定,获得了该毒株基因组编码区的核苷酸序列(6966bp)并推导出其编码的氨基酸序列...
- 索青利陈立军黄忠强陈金顶
- 关键词:口蹄疫病毒
- 文献传递
- FMDV O/HK/2001株基因组编码区的基因克隆与序列分析
- 本研究参考GenBank中O型FMDV全基因序列,分段设计了9对引物,应用RT-PCR技术对O/HK/2001株的基因组编码区序列进行了克隆和序列测定,获得了该病毒株基因组编码区的核苷酸序列并推导出氨基酸序列.并将O/H...
- 索青利陈立军陈金顶
- 关键词:口蹄疫病毒基因克隆
- 文献传递网络资源链接
- 口蹄疫病毒VP1与3ABC基因片段的克隆及表达被引量:1
- 2008年
- 根据GenBank中注册的O型口蹄疫病毒(FMDV)VP1和3ABC基因序列,设计了2对引物.采用RT-PCR方法从FMDV分离株O/HK/2001扩增得到VP1和3ABC基因.经对它们的核苷酸序列测序和同源性比较,显示与14株O型FMDV参考毒株中的O/HKN/2002同源性最高(分别为98.3%和98.6%),并且在VP1决定各种亚型FM-DV免疫原性的主要抗原决定族的144、148、154和208位关键氨基酸,比对均未发现变异.通过酶切将VP1和3ABC基因分别亚克隆到4个表达载体pET-30a、pPROEX HTb、pQE30和pQE9中构成重组表达质粒,利用IPTG诱导表达,经SDS电泳分析表明这些重组质粒在相应表达宿主菌BL21、DH5α和M15中,除pQE30-3ABC和pQE9-3ABC外均获得了表达,其中pET-30a和pPROEX HTb载体表达量较高.
- 索青利赵明秋琚春梅陈金顶王伟利陈立军
- 关键词:口蹄疫病毒VP1基因3ABC基因
- 沙门氏菌的invA基因序列分析与分子检测被引量:64
- 2004年
- 目的采用聚合酶链反应和DNA序列分析,了解沙门氏菌侵袭蛋白A(invasionproteinA,invA)基因核苷酸序列有何差异,建立沙门氏菌的分子快速检测方法。方法根据沙门氏菌的invA基因核苷酸序列设计一对引物,应用聚合酶链反应技术,分别对3种沙门氏菌标准菌株的invA基因及6种非沙门氏菌株进行PCR扩增,并将扩增的片段进行克隆及序列分析。结果3种沙门氏菌标准菌株PCR均扩增出283bp的特异条带,非沙门氏菌皆无特异带扩增;DNA序列分析证实,沙门氏菌的invA基因核苷酸序列比较保守。结论本研究建立的检测沙门氏菌方法具有较高的特异性与灵敏性,invA基因的序列分析为进一步研究沙门氏菌不同分离株的流行病学、遗传学与分子致病机理奠定了基础。
- 陈金顶索青利廖明辛朝安
- 关键词:沙门氏菌DNA序列分析分子检测
- 抗体信号肽基因的克隆和序列测定及真核表达载体的构建被引量:1
- 2005年
- 根据抗体重链与轻链基因的核苷酸序列设计并合成了1对引物,以猪外周血淋巴细胞基因组mRNA为模板,通过RT_PCR方法获得了一大小约85bp的DNA片段,并将其克隆到pGEM_T载体上进行序列测定,测序结果显示,猪抗体信号肽基因核苷酸序列长度为57bp,编码19个氨基酸,核苷酸及推导的氨基酸序列与已发表的抗体信号肽基因序列一致,同时在信号肽基因3’端下游提供可供肽酶切割的窗口和外源基因的克隆位点。然后将信号肽基因亚克隆到真核表达载体pcDNA3.1(+)中,成功构建了一含信号肽序列的真核表达载体3.1_SFc,为外源基因在pcDNA3.1(+)中的表达与分泌提供了一有效的信号肽,也为研究基因的功能奠定了基础。
- 陈金顶赵明秋索青利黄青云廖明
- 关键词:基因克隆真核表达载体构建蛋白质
- 口蹄疫病毒G-01株基因组编码区的序列分析
- 2007年
- 参考GenBank中注册的O型口蹄疫病毒(FMDV)全基因序列,分段设计了9对引物,应用RT-PCR方法对G-01株的基因组编码区序列进行了克隆和序列测定,获得了该毒株基因组编码区的核苷酸序列(6966 bp)并推导出其编码的氨基酸序列(2322 aa).将获得的G-01株基因组编码区的核苷酸序列与参考的14株FMDV基因序列进行比较,结果表明,本毒株的3A蛋白的92~101位缺失10 aa,VP1基因的133~160位的关键位点没有变化,该毒株与以HKN/2002株为代表的7株O型毒株的同源性较高,与HKN/2002株遗传关系最近,而与另外7株O型毒株同源性较低,其遗传关系也较远.由此推断G-01与HKN/2002株属于遗传关系较近的毒株,这2株病毒有着相同的进化起源.
- 索青利赵明秋陈金顶陈立军黄忠强
- 关键词:口蹄疫病毒