赵蕾
- 作品数：49 被引量：89H指数：5
- 供职机构：重庆医科大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市教育委员会科学技术研究项目教育部科学技术研究重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- TNF-α对HepG2细胞LXRα介导的胆固醇外流的影响及其分子机制被引量：5
- 2013年
- 目的:观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝X受体α(LXRα)启动子活性及其下游ATP结合盒转运蛋白(ABCA1和ABCG1)表达的影响,从而探讨TNF-α加速HepG2细胞内胆固醇积聚的分子机制。方法:构建LXRα基因的启动子表达载体,观察炎症因子TNF-α对LXRα启动子活性的影响,进一步将HepG2细胞分为对照组(control)、TNF-α组(20μg/L)、高脂组(LDL,100 mg/L)及联合处理组(TNF-α20μg/L+LDL 100 mg/L)。采用实时定量PCR和Western blotting检测LXRfα、ABCA1和ABCG1的mRNA及蛋白的表达。[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。油红O染色和定量比色法分析细胞内胆固醇的含量。结果:成功构建LXRα启动子的萤火虫萤光素酶报告质粒,证明了该启动子有明显活性,TNF-α能明显抑制LXRα启动子的活性。进一步检测发现,和对照组相比,TNF-α下调了LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA与蛋白表达。高脂组胆固醇外流量增加,而TNF-α组胆固醇外流量明显降低。油红O染色显示,TNF-α使细胞内脂质染色明显增加。结论:TNF-α可通过抑制LXRα启动子活性从而抑制HepG2细胞内胆固醇外流导致肝细胞内脂质异常积聚。
- 仝莎陈曜赵蕾黄爱龙阮雄中陈压西
- 关键词：HEPG2细胞肿瘤坏死因子肝X受体Α胆固醇外流
- 转录辅激活因子CBP在脂代谢中的作用被引量：1
- 2006年
- CREB结合蛋白(cAMPresponseelementbindingproteinbindingprotein,CBP)是一种重要的转录辅激活因子,具有高度保守的序列,能够与300多种转录因子相结合,被认为是哺乳动物基因转录调控中的关键位点。CBP在转录活化过程中主要起乙酰转移酶、桥梁以及支架作用。随着对脂代谢研究的深入,发现很多参与脂代谢的核转录因子(如PPAR、CREB、C/EBPs及SREBPs等)在作用于相应靶基因时都需要CBP的参与,因此CBP可能作为脂代谢的关键调节点。
- 苗春木赵蕾龚建平阮雄中
- 关键词：辅激活因子脂代谢
- 炎症状态下阿托伐他汀对HepG2细胞氧化应激和脂质积聚的影响被引量：2
- 2017年
- 目的研究阿托伐他汀在炎症状态下对人肝癌细胞株Hep G2细胞氧化应激和脂质积聚的影响。方法将普通Hep G2细胞分为为3组:正常组、模型组[用100 ng·m L^(-1)肿瘤坏死因子(TNF-α)处理]及实验组(用100 ng·m L^(-1)TNF-α+10μmol·L^(-1)阿托伐他汀处理),3组同时负荷100μg·m L^(-1)低密度脂蛋白(LDL),处理时间24 h。用油红O染色测定细胞内脂质含量;以荧光定量聚合酶链式反应和免疫印迹法分别检测Hep G2细胞脂肪酸合酶(FAS)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)的基因和SREBP1蛋白表达;以二氯二氢荧光素-乙酰乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针染色检测Hep G2细胞内活性氧化产物(ROS)的含量;以比色法检测Hep G2细胞过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)的含量。结果正常组与模型组SREBP1蛋白灰度值分别为1.01±0.001,1.61±0.34,这2组的SREBP1 mRNA水平分别为1.01±0.16,3.61±0.39,这2组的FAS的mRNA水平分别是1.03±0.32,1.99±0.36,这2组的ACC的mRNA水平分别是0.95±0.29,2.37±0.52。与正常组相比,模型组的细胞FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与模型组相比,实验组的Hep G2FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白灰度值分别是2.95±0.92,3.99±1.16,2.85±0.91,2.94±0.65,实验组的Hep G2 FAS、ACC、SREBP1的基因和SREBP1的蛋白表达明显增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。表明在炎症状态下,阿托伐他汀进一步加重了Hep G2细胞内脂质的沉积。正常组、模型组与实验组的细胞ROS含量(以荧光强度代表)分别为1.00±0.20,1.77±0.25,3.20±0.53;正常组、模型组与实验组的H2O2含量分别为(2.30±0.31),(4.32±0.77),(5.31±0.75)nmol·mg^(-1);这2组的MDA含量分别为(0.78±0.22),(1.86±0.23),(3.43±1.15)nmol·mg^(-1),与正常组比较,模型组差异均有统计学意义(均P<0.05);与模型组比较,实验组差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论在炎症状态下,�
- 肖亚运吴为周晓倩陈压西阮雄中赵蕾
- 关键词：阿托伐他汀人肝癌细胞株
- 鼠疱疹病毒感染促进C57BL/6J小鼠肝脏脂肪变性和肝胰岛素抵抗
- 目的鼠疱疹病毒68是人类单纯疱疹病毒和EB病毒的同源性病毒,能够长期感染啮齿类动物,引起炎症介质的大量释放。本研究应用鼠疱疹病毒68感染C57BL/6J小鼠的动物模型,观察疱疹病毒感染与非酒精性脂肪性肝病和胰岛素抵抗的关...
- 赵蕾陈压西Zac Varghese黄爱龙唐任宽贾蓓John F.Moorhead龚建平阮雄中
- 关键词：胰岛素抵抗固醇调节元件结合蛋白哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
- 文献传递
- 慢性肾脏病进展新诊治标记物REG1A及应用
- 本发明涉及疾病诊断标志物，具体涉及一种慢性肾脏病进展的新诊治标志物及其应用，更具体的涉及REG1A在诊治慢性肾脏病进展中的应用。本发明利用生物信息学分析探究证实了REG1A与慢性肾脏病进展具有很好的相关性，体内外实验验证...
- 向玥赵蕾赵稚博
- γ-分泌酶组件NCT在痴呆小鼠中枢神经系统的分布及表达被引量：4
- 2011年
- 目的研究γ-分泌酶组件蛋白单过性跨膜蛋白(NCT)在APP/PS1双重转基因痴呆小鼠中枢神经系统(CNS)中的分布与表达及与阿尔茨海默病(AD)的关系。方法对APP/PS1双重转基因AD模型种鼠交配后产下的子代进行基因分型,分别用免疫组化、免疫荧光双标及激光共聚焦等技术,检测NCT在APP/PS1双重转基因痴呆小鼠及同窝野生型小鼠CNS内的分布及表达。结果 NCT广泛分布于成年AD小鼠CNS各区域,包括大脑新皮质、海马、嗅脑、丘脑、纹状体、小脑、脑干和脊髓等;而神经元外Aβ的沉积选择性分布于CNS的大脑皮质和海马等区域;大脑皮质及海马内的NCT阳性神经元数量要多于Aβ阳性神经元,且神经元内的Aβ与NCT出现了共存;同时,大脑皮质和海马内的NCT与PS1分布趋势高度一致,且在神经元内出现了共存。痴呆型与同窝野生型新生小鼠大脑皮质内NCT阳性神经元排列致密;随着小鼠的发育,脑组织单位面积内NCT阳性神经元数量逐渐减少;但痴呆小鼠脑内NCT阳性神经元的细胞膜和细胞质均浓染;而同窝野生型小鼠脑内的NCT阳性神经元仅细胞膜周围染色较深,而胞质染色极浅甚至不着色。结论 NCT在痴呆小鼠和正常野生型小鼠脑内的分布及表达出现差异,可能与Aβ的生成和AD的发生相关。
- 龙志敏赵蕾贺桂琼宋冲楚亚楠
- 关键词：Γ-分泌酶AΒ中枢神经系统
- 急性梗阻性化脓性胆管炎时大鼠肝组织清道夫受体-A的表达及意义被引量：4
- 2008年
- 目的观测急性梗阻性化脓性胆管炎(acute obstructive suppurative cholangitis,AOSC)时大鼠肝组织中清道夫受体-A(scavenger receptor A,SR-A)的表达及其与炎症介质的产生和肝组织损害的关系。方法结扎大鼠胆总管,于胆总管内注入大肠杆菌O111∶B4(菌落浓度5×109cfu/ml),建立急性胆管炎动物模型。测定血浆中内毒素,观测不同时相点肝组织中SR-A mRNA及蛋白质的表达及肝组织病理形态学变化,同时测定TNF-α含量变化,并与结扎胆总管注射生理盐水组、假手术组比较。结果在急性胆管炎组中,随着梗阻感染时间的延长和血浆内毒素浓度的升高,血浆中TNF-α含量明显增加,肝组织中SR-A的mRNA和蛋白质的表达明显下降,与对照组比较有统计学差异(P<0.01)。同时可见随着处理时间延长而逐渐加重的肝组织损伤的病理改变。结论AOSC时,随着肝组织中SR-A表达的下调,枯否细胞(Kupffer cells,KCs)清除、灭活内毒素的能力下降,同时KCs激活释放的细胞因子增多,诱发并加重肝组织的损害。
- 杨慷刘作金赵蕾龚建平
- 关键词：AOSC内毒素血症
- 西罗莫司对肿瘤坏死因子α诱导的HepG2细胞脂质积聚的影响
- 2017年
- 目的研究西罗莫司对肿瘤坏死因子α(TNF-α)诱导的HepG2细胞脂质积聚的影响。方法将棕榈酸(PA)负荷的HepG2细胞分为3组:对照组[0.2%牛血清白蛋白(BSA)+0.16 mmol·mL^(-1)PA],模型组(0.2%BSA+0.16 mmol·mL^(-1)PA+25 ng·mL^(-1)TNF-α),实验组(0.2%BSA+0.16mmol·mL^(-1)PA+25 ng·mL^(-1)TNF-α+10 ng·mL^(-1)西罗莫司)。各组处理24h后,以油红O染色观察HepG2细胞脂质蓄积情况;以蛋白质印迹法检测哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)及其下游核糖体蛋白P70S6激酶(P70S6K)总蛋白和磷酸化蛋白水平;以实时荧光定量聚合酶链式反应检测固醇调节原件结合蛋白1(SREBP1)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(FAS)mRNA的表达。结果在炎症状态下,西罗莫司可以明显抑制TNF-α诱导的HepG2细胞脂质积聚。同时,西罗莫司降低了TNF-α诱导的磷酸化mTOR(p-mTOR)及磷酸化P70S6K(p-P70S6K)蛋白表达:对照组、模型组及实验组的p-mTOR蛋白相对水平分别为1.00±0.20,3.11±0.60,2.38±0.50;这3组的p-P70S6K蛋白相对水平分别为1.00±0.30,3.67±0.60,1.62±0.50,模型组与对照组相比或者实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。西罗莫司还下调了SREBP1、ACC、FAS的mRNA表达:对照组、模型组及实验组的FAS mRNA相对水平分别是1.04±0.32,2.85±0.90,1.68±0.38;这3组的ACC mRNA相对水平分别是1.04±0.30,3.23±1.33,2.07±0.52;这3组的SREBP1的mRNA相对水平分别是1.01±0.16,3.85±1.30,2.82±0.57,模型组与对照组相比或者实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论西罗莫司通过抑制mTOR信号通路,减轻TNF-α诱导的HepG2细胞脂质积聚。
- 李贝贝陈压西阮雄中赵蕾
- 关键词：西罗莫司非酒精性脂肪性肝炎哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
- 白细胞介素-1β激活HMGCoA还原酶促进HepG2细胞脂质积聚
- 2017年
- 目的:探讨白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)对HepG2细胞羟甲基戊二酸单酰辅酶A(3-hydroxy-3-methyl-glutaryl-coenzyme A,HMGCo A)还原酶及脂质积聚的影响。方法:200μg/m L低密度脂蛋白(low density lipoprotein,LDL)负荷下的HepG2细胞分别给予0 ng/m L(对照组)、20 ng/m L(炎症组)IL-1β处理24 h。荧光定量PCR(RT-PCR)、Western blot分别测定HMGCo A还原酶mRNA及蛋白表达水平;薄层层析法检测HMGCo A还原酶活性;同位素标记法评估胆固醇合成情况;油红O染色及酶法定量检测细胞内脂质。结果:IL-1β处理下,HepG2细胞HMGCo A还原酶mRNA表达水平为对照组的(1.54±0.04)倍(t=5.619,P=0.001)、蛋白表达水平为对照组的(1.92±0.12)倍(t=7.745,P=0.002),且HMGCo A还原酶的酶活性为对照组的(1.73±0.25)倍(t=2.476,P=0.048)。IL-1β处理使HepG2细胞的胆固醇合成增多为对照组的(1.32±0.11)倍(t=2.316,P=0.036)。IL-1β处理的HepG2细胞内红染的脂滴显著多于对照组,且IL-1β处理组细胞内总胆固醇含量(22.43±1.62)为对照组(14.90±1.11)的1.51倍(t=3.845,P=0.018),胆固醇酯的含量(3.84±0.20)为对照组(1.41±0.05)的2.72倍(t=11.730,P=0.000)。结论:IL-1β可以上调HepG2细胞HMGCo A还原酶的mRNA和蛋白表达水平,并增强其酶活性,促进HepG2细胞内胆固醇合成和脂质积聚。
- 邹阳赵蕾杨萍韦莉阮雄中陈压西
- 关键词：白细胞介素-1ΒHEPG2细胞胆固醇非酒精性脂肪性肝病
- CD36在棕榈酸诱导的HepG2细胞炎症反应中的作用被引量：1
- 2017年
- 目的:探讨白细胞分化抗原36(cluster of differentiation 36,CD36)是否参与了棕榈酸诱导的HepG2细胞炎症反应。方法:给予HepG2细胞不同浓度的棕榈酸(0.00、0.08、0.16、0.32、0.64 mmol/L)处理24 h,使用实时荧光定量PCR方法检测CD36和炎症因子的mRNA表达水平,Western blot检测CD36蛋白表达水平。然后利用小RNA干扰技术,构建低表达CD36的HepG2细胞(CD36RNAi HepG2)和对照细胞(NCi HepG2)模型。通过实时荧光定量PCR检测棕榈酸负荷的NCi HepG2和CD36RNAi HepG2中炎症因子的表达情况,荧光探针DCFH DA法检测细胞内活性氧含量,Western blot检测细胞核内的核转录因子-κB的蛋白表达水平。结果:棕榈酸能够上调HepG2细胞中CD36及炎症因子——肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达。棕榈酸浓度分别为0.00、0.08、0.16、0.32及0.64 mmol/L时,CD36的mRNA表达相对值分别为(1.001±0.078)、(1.510±0.341)(q=4.763,P=0.007)、(1.780±0.070)(q=7.301,P=0.000)、(2.510±0.141)(q=14.16,P=0.000)及(2.103±0.150)(q=10.34,P=0.000)。TNF-α的mRNA表达相对值分别为(1.000±0.098)、(1.571±0.177)(q=1.598,P=0.141)、(1.725±0.274)(q=2.016,P=0.071)、(2.113±0.341)(q=3.102,P=0.011)及(5.282±0.855)(q=11.940,P=0.000)。IL-6的mRNA表达相对值分别为(0.999±0.047)、(1.791±0.596)(q=1.486,P=0.168)、(2.119±0.294)(q=2.107,P=0.061)、(2.808±0.147)(q=3.398,P=0.007)及(6.916±1.284)(q=11.130,P=0.000)。抑制HepG2细胞中CD36表达,可以显著降低棕榈酸所诱导的细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)增加和核转录因子-κB在核内分布的增强,降低HepG2细胞内炎症因子表达水平。NCi HepG2、NCi HepG2+棕榈酸组及CD36 RNAi HepG2+棕榈酸组的ROS相对含量分别为(1.000±0.113)、(1.968±0.293)(与NCi组相比,t=6.888,P=0.000)、(0.519±0.129)(与NCi+棕榈酸组相比,t=10.106,P=0.000)。NCi HepG2、NCi HepG2+棕榈酸组及CD36 RNAi HepG2+棕榈酸组的核转录因子-κB的蛋白相对值
- 韦莉杨萍陈压西阮雄中赵蕾
- 关键词：CD36棕榈酸HEPG2炎症
