陈祥鹏
- 作品数：25 被引量：71H指数：6
- 供职机构：首都医科大学附属北京儿童医院更多>>
- 发文基金：艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家高技术研究发展计划北京市优秀人才培养资助更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学文化科学更多>>
- 重组靶向性抗肿瘤融合蛋白EGF-E4orf4毕赤酵母工程菌中试发酵工艺的建立
- 2011年
- 目的建立重组靶向性抗肿瘤融合蛋白EGF-E4orf4毕赤酵母工程菌的中试发酵工艺。方法优化EGF-E4orf4工程菌二级种子培养时间,按5%的比例接种于20 L发酵培养基,设定培养阶段温度为30℃,诱导表达阶段温度为28℃,在发酵过程中通过调节搅拌速度、通气量和罐压等措施使DO维持在20%～35%,采用三步发酵法进行发酵,优化诱导pH值及诱导时间,并在已优化的工艺条件下,稳定发酵3批。结果确定二级种子的培养时间为15 h,最适诱导pH值为6.0,最适诱导时间为48 h;中试发酵3批,菌体A600均值达(327.67±17.96),菌体湿重均值达(308.33±9.07)g/L,EGF-E4orf4表达量均值为(200.00±5.57)mg/L。结论已初步建立了重组EGF-E4orf4毕赤酵母工程菌的中试发酵工艺,为EGF-E4orf4的产业化奠定了基础。
- 孙成金王健崔春青郭鹏陈祥鹏张振龙
- 关键词：毕赤酵母发酵
- 中国麻疹防控历史回顾
- 2024年
- 2019年我国首次实现麻疹病例死亡零报告,2020年全国报告发病率降至0.06/10^(5),实现了WHO消除麻疹的目标(低于1/10^(6)),在麻疹防控取得最新成就的重要时刻,本文回顾麻疹防控70年的历程,以此表达对前辈和同道们最崇高的敬意。
- 朱宗涵申昆玲李涛陈祥鹏
- 关键词：麻疹疫苗传染病
- 重组人乳头瘤病毒16型L1 VLP的初步纯化、鉴定及免疫效果的初步研究
- 2010年
- 目的 对昆虫细胞-杆状病毒系统表达的人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）16型L1蛋白病毒样颗粒（virus-like particle,VLP）进行初步纯化研究,并在小鼠中检测纯化VLP的免疫原性.方法 采用蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化方法纯化HPV16 LI VLP.对纯化得到的VLP分别进行蛋白印迹法、十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）及电镜鉴定.然后用VLP免疫6周龄BALB/c小鼠.将小鼠随机分成6组（3个剂量组、2个佐剂组和1个对照组）,间隔2周免疫3次,3次剂量相同.取血分离血清,采用间接ELISA法检测抗HPV16 L1 VLP抗体滴度.结果 经蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化后,用SDS-PAGE鉴定纯化的HPV16 LI VLP,纯度达到90%.电镜观察可见完整的VLP颗粒.间接EUSA检测结果显示,剂量组及佐剂组小鼠血清中均可检测到特异性抗HPV16 L1 VLP抗体,且抗体滴度随针次和剂量的增加而增高.结论 采用蔗糖-氯化铯密度梯度超速离心纯化法得到的HPV16 L1 VLP可用于免疫学初步研究.通过昆虫细胞表达产生的HPV16 LI VLP 具有较强的免疫原性,能诱导小鼠产生强的体液免疫应答.
- 孙丽媛张婷于世荣陈祥鹏刘君李莉莉张夕燕张振龙许雪梅
- 关键词：人乳头瘤病毒16L1蛋白病毒样颗粒
- 不同佐剂对随机组合多表位恶性疟疾疫苗M. RCAg-1的免疫原性及体外抑虫率影响的研究被引量：5
- 2011年
- 目的 研究弗氏佐剂及3种人用佐剂[Al（OH）3、Montanide ISA720、Montanide ISA51]对重组多表位蛋白M.RCAg-1（malaria random constructed antigen-1）在BALB/c小鼠及新西兰大白兔体内产生免疫效果的影响.方法 以弗氏佐剂、Al（ OH）3佐剂、Montanide ISA720以及MontanideISA51佐剂分别与M.RCAg-1蛋白进行配伍,分别免疫BALB/c小鼠及新西兰白兔；采用ELISA法检测M.RCAg-1蛋白及其所组成各个表位特异的血清IgG含量；间接荧光免疫试验分析不同配伍组免疫血清对天然疟原虫抗原的识别；酶联免疫斑点试验（ELISPOT）检测特异性鼠T淋巴细胞的活化；另借助生物传感器评价抗原与不同佐剂配伍组血清的亲和力,并用体外生长抑制试验（GIA）对恶性疟原虫的体外生长的影响进行评价.结果 不同佐剂可诱发不同水平的抗体滴度,Montanide ISA51佐剂配伍组的效果与弗氏佐剂组最为接近,并可使蛋白包含的11个表位肽能都较好诱发出特异性抗体,可有效激发以IFN-γ为主的细胞免疫应答,而且Montanide ISA51佐剂组免疫产生的抗体和M.RCAg-1蛋白质的亲和力高于其他两种佐剂；而Montanide ISA720佐剂和Al（OH）3佐剂免疫组不能诱发小鼠产生显著的IFN-γ反应（P＞0.05）.Montanide ISA51配伍蛋白质免疫产生的IgG在浓度为2mg/ml时对3D7和Dd2的抑制率分别为60%和100%,Al（OH）3佐剂组免疫兔血清IgG体外抑虫率较低（10%左右）,而Montanide ISA720佐剂免疫组血清不能有效抑制疟原虫生长.结论 通过比较3种人用佐剂和弗氏佐剂对BALB/c小鼠和新西兰兔的免疫辅助效能显示,Montanide ISA51佐剂能很好的辅助M.RCAg-1蛋白疫苗诱发动物体内的体液免疫和细胞免疫应答,可做为疫苗的候选佐剂之一.
- 王健蔺亚辉孙成金李莉莉陈祥鹏李军王恒张振龙
- 关键词：佐剂疟疾疫苗
- 不可分型流感嗜血杆菌蛋白D研究进展被引量：3
- 2010年
- 流感嗜血杆菌（Haemophilus influenzae,Hi）蛋白D（Protein D,PD）是高度保守的表面脂蛋白,相对分子质量42 000,存在于所有的可分型Hi和不可分型Hi（nontypeable Haemophilus influenzae,NTHi）中,是一种具有甘油磷酸二酯酶活性的细菌毒力因子,能导致宿主上皮细胞释放磷酸胆碱,在Hi引起呼吸道感染过程中起重要作用.以NTHi PD作为载体蛋白的肺炎链球菌多糖结合疫苗,不但能预防肺炎链球菌性耳炎,而且对NTHi引起的急性中耳炎也具有预防作用.PD是迄今为止第一种能在人类机体中诱导保护性应答的NTHi抗原,也是最具潜力的多糖结合疫苗候选载体蛋白.
- 陈祥鹏王健张振龙
- 关键词：载体蛋白质类抗原
- 2018年石家庄市及周边地区儿童病毒性脑炎及脑膜炎病原学研究被引量：3
- 2021年
- 目的探讨石家庄市及周边地区儿童病毒性脑炎及脑膜炎的病原学特点,同时研究病原学与临床表现之间的联系。方法随机收集石家庄市及周边地区于河北省儿童医院神经内科诊断为病毒性脑炎及脑膜炎(2018年1~12月)的住院患儿脑脊液标本132例,应用实时荧光定量PCR方法对脑脊液中的4种病毒核酸进行检测。采用SPSS 21.0软件进行统计学分析。结果132例患儿中男性78例,女性54例,男女性别比为1.44∶1。各年龄组的性别构成不具统计学差异(χ^(2)=3.901,P=0.272)。132例患儿中,发热体征的121例、头痛症状的109例、呕吐症状的92例、脑电图(electroencephalogram,EEG)异常的17例、头部磁共振(magnetic resonance imaging,MRI)异常15例。病毒被检出的80例,77例为肠道病毒(enterovirus,EV),有2例为水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus,VZV),1例为人疱疹病毒I型(human herpesvirus type I,HHV-I)。其中1~3岁年龄组EV检出率为66.67%,4个年龄组(<1岁、1~3岁、3~6岁、>6岁)的EV检出率无显著差异(χ^(2)=3.147,P=0.369);夏(6月、7月、8月)秋(9月、10月、11月)季节的EV检出率分别为65.52%及70.83%,明显高于春季(3月、4月、5月)及冬季(12月、1月、2月)的33.33%及0.00%,且存在统计学差异(χ^(2)=22.504,P=0.000)。EV阳性和非EV阳性患儿发热、头痛、呕吐阳性率无显著差异(P>0.05)。EV阳性和非EV阳性患儿EEG、头部MRI检查异常发生率无显著差异(P>0.05)。结论2018年石家庄市及周边地区儿童病毒性脑炎及脑膜炎的主要病原体为EV,其在夏秋季检出率高。
- 樊涛胡川泽韩彦洁权会丽孙一硕马静于盼辉谢正德王巍张萌乔彦霞孙素真陈祥鹏
- 关键词：病原学肠道病毒
- 北京地区急性呼吸道感染儿童RSV F蛋白抗原位点变异分析被引量：1
- 2015年
- 目的 为了解我国北京地区呼吸道合胞病毒（Respiratory Syncytial Virus RSV）融合蛋白F基因特征及抗原位点变异情况,本研究对61株RSV分离毒株F蛋白主要抗原位点区进行了基因序列分析.方法 应用RT-PCR方法分段扩增获得F蛋白主要抗原位点区基因,并对产物进行序列测定及拼接.序列比对分析,构建系统发育树,进行亲缘关系分析.结果 61株RSV分离株中,A亚型为43株,B亚型为18株.A、B亚型内核苷酸（氨基酸）同源性较高,分别为95.9％ - 100％（98.3％ - 100％）及97.5％ - 100％ （98.7％ - 100％）,亚型间为83.2％ -84.9％（93.1％ -95.1％）.基于F蛋白主要抗原位点区基因亲缘进化分析,所有分离株可分为两个主要亚群,分别对应A/B亚型;两个亚群又可分别分成6个及3个不同的进化分支.两个亚群中分别存在7个及4个氨基酸位点突变,其中抗原位点（Φ）存在209位从Q到K及211位从S到N的变异,帕利珠单抗作用的抗原位点Ⅱ存在276位从N到S的位点突变,其余突变均位于非抗原位点决定区.结论 北京地区RSV流行株与原型株相比,F蛋白存在一定的变异,但仍具有较高的核苷酸及氨基酸同源性;各抗原位点区氨基酸保守,为疫苗及相关药物研究的重要候选蛋白.
- 陈祥鹏张枫郭佳运朱云刘春艳谢正德
- 关键词：呼吸道合胞病毒F蛋白抗原位点
- 不可分型流感嗜血杆菌的特性及抗原筛选研究进展
- 2009年
- 不可分型流感嗜血杆菌（nontypeable Haemophilus influenzae，NTHi）是一类没有荚膜的革兰阴性球杆菌，常寄居于人类上呼吸道，是重要的机会致病菌，能引起人类中耳炎、肺炎及反复发作的呼吸道感染等。目前还没有一种预防这种病原菌感染的疫苗，随着近几年抗生素的滥用，细菌的耐药性问题越发突出，这就使开发一种安全有效的疫苗显得尤为重要。此文对NTHi的致病性、菌株特点及其抗原筛选的研究进展作一概述。
- 陈祥鹏王健张振龙
- 关键词：抗原脂多糖类
- 不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6的重组表达及免疫保护作用研究被引量：6
- 2010年
- 目的研究不可分型流感嗜血杆菌（NTHi）重组外膜蛋白P6的理化性质和对小鼠的免疫保护作用。方法利用PCR技术，以NTHi基因组为模板，扩增出编码外膜蛋白P6的基因片段；构建pET-32a—P6重组质粒；转化到大肠杆菌B121（DE3）中进行表达，并对表达条件进行了优化。通过阴离子交换和凝胶过滤层析对蛋白进行纯化。经SDS—PAGE、Western blot等对蛋白的理化性质进行初步分析，继而免疫BALB／c小鼠，用同源菌经腹腔攻击，比较免疫组和对照组小鼠死亡率。结果实现了该蛋白在大肠杆菌中的高效表达，产物表达形式为可溶性表达，纯化后蛋白纯度可达95％，收率可达5mg／g（蛋白／湿菌），相对分子质量（Mr）为14145．848，Western blot证实重组P6蛋白能与菌源提纯P6蛋白免疫小鼠后的抗血清发生特异性反应。动物实验结果表明重组P6蛋白在小鼠体内能诱生高滴度的抗体，显示免疫组小鼠存活率明显高于对照组（P〈0．01）。结论重组NTHi外膜蛋白P6的原核表达产物为可溶性蛋白，在小鼠体内能诱生高效价抗体，在小鼠感染模型中具有保护作用，为NTHi疫苗的研发提供了基础资料。
- 陈祥鹏王健李莉莉陈敬张振龙
- 关键词：不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白克隆表达免疫保护
- 2011年甘肃地区急性呼吸道感染儿童患者中鼻病毒感染规律的研究被引量：11
- 2013年
- 探讨人鼻病毒(Human rhinovirus,HRV)在甘肃地区急性呼吸道感染儿童患者中的流行特征。2011年1月至12月,从甘肃地区急性呼吸道感染儿童患者中采集咽拭子标本286份,用多重PCR方法对常见呼吸道病毒性病原体进行筛查。多重PCR结果中HRV阳性的标本再用nested-PCR分别扩增HRV的VP1和VP4/VP2结合区基因片段,阳性结果进行序列测定和基因分析。286份咽拭子标本中,27份标本多重PCR检测结果显示为HRV阳性,检出率为9.44%。本研究中,HRV感染病例的平均年龄为3岁,其中,1岁以内儿童感染比例最高,占总阳性数的44.4%(12/27);在27例HRV阳性病例中,男性占16例(16/185,8.64%),女性占11例(11/101,10.89%),两者无显著性差异;HRV感染的高峰出现在5月份(6/27,22.2%);从HRV感染的疾病构成看,普通感冒的比例最高,占12.24%(12/98);其次为肺炎,占8.50%(13/153);剩余2病例均为支气管炎。基因序列特征分析发现:A组HRV是甘肃地区2011年的优势流行基因型,占阳性病例的84.62%(22/26),其次为C组HRV,占11.54%(3/26),B组HRV仅发现1例。HRV感染在2011年甘肃地区全年均可发生,主要感染以1岁以内儿童。A组HRV是该地区2011年急性呼吸道感染儿童患者中的主要流行基因型,并存在多个基因型和多个HRV血清型共同流行的特点。
- 张爽毛乃颖于德山黄国虹李晓霞李红育李保娣张燕崔爱利陈祥鹏于爱莲许文波
- 关键词：急性呼吸道感染多重PCR基因型
