张振龙
- 作品数：65 被引量：121H指数：5
- 供职机构：北京生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程轻工技术与工程更多>>
- 金属硫蛋白的提纯被引量：4
- 1999年
- 金属硫蛋白(MT)是一类广泛分布、富含半胱氨酸,可结合金属的低分子量非酶蛋白质。它在金属中毒、微量元素代谢调节和抗射线、自由基损伤等方面有重要作用。本研究提纯了兔肝MT_1和MT_2(rlMT_1、rlMT_2)。方法是:先给家兔多次皮下注射CdCl_2诱导MT合成,之后取肝作匀浆,经冷乙醇提取制得MT粗提液。该粗提液通过Sepbaclx G—50 柱(4.5×95cm)和DEAE-cellulose DE52 柱(2.5×4cm)层析,使分离出rlMT_1和rlMT_2两种亚型。鉴定表明,rlMT_1和rlMT_2的分子量均约14KD,纯度为SDS—PAGE分析呈单一条带,与Sigma标准品的分子量和纯度一致。氨基酸组成中,半胱氨酸和硫基含量都接近每分子20个,不含芳香族氨基酸和组氨酸。本次研究为探寻MT检测工作,推动我国MT的研究奠定了良好基础。
- 张亨山赵金垣陈晓龙张振龙王春荣倪道明史德林黄文萱刘宏马东星
- 关键词：金属硫蛋白分离纯化
- 聚乙二醇类聚合物修饰的睫状神经营养因子及其制备方法
- 本发明涉及一种聚乙二醇类聚合物修饰的睫状神经营养因子及其制备方法。该方法包括将聚乙二醇类聚合物与睫状神经营养因子混合反应即可。本发明所述的聚乙二醇类聚合物修饰的睫状神经营养因子保持了睫状神经营养因子在体内的活性，并且毒副...
- 张振龙姜江倪道明
- 文献传递
- 不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白P6的重组表达及免疫保护作用研究被引量：6
- 2010年
- 目的研究不可分型流感嗜血杆菌（NTHi）重组外膜蛋白P6的理化性质和对小鼠的免疫保护作用。方法利用PCR技术，以NTHi基因组为模板，扩增出编码外膜蛋白P6的基因片段；构建pET-32a—P6重组质粒；转化到大肠杆菌B121（DE3）中进行表达，并对表达条件进行了优化。通过阴离子交换和凝胶过滤层析对蛋白进行纯化。经SDS—PAGE、Western blot等对蛋白的理化性质进行初步分析，继而免疫BALB／c小鼠，用同源菌经腹腔攻击，比较免疫组和对照组小鼠死亡率。结果实现了该蛋白在大肠杆菌中的高效表达，产物表达形式为可溶性表达，纯化后蛋白纯度可达95％，收率可达5mg／g（蛋白／湿菌），相对分子质量（Mr）为14145．848，Western blot证实重组P6蛋白能与菌源提纯P6蛋白免疫小鼠后的抗血清发生特异性反应。动物实验结果表明重组P6蛋白在小鼠体内能诱生高滴度的抗体，显示免疫组小鼠存活率明显高于对照组（P〈0．01）。结论重组NTHi外膜蛋白P6的原核表达产物为可溶性蛋白，在小鼠体内能诱生高效价抗体，在小鼠感染模型中具有保护作用，为NTHi疫苗的研发提供了基础资料。
- 陈祥鹏王健李莉莉陈敬张振龙
- 关键词：不可分型流感嗜血杆菌外膜蛋白克隆表达免疫保护
- 抗α肿瘤坏死因子单克隆抗体的特性及临床应用
- 1995年
- α肿瘤坏死因子（TNF-α）作为一种细胞因子参与了许多疾病的病理生理过程,并介导某些疾病的发生,而抗TNF-α抗体能拮抗TNF-α的有害作用。国外已将抗TNF-α单克隆抗体（McAb）应用于临床研究,现已进入Ⅱ/Ⅲ期临床试验阶段。本文综述了TNF-α McAb的生物学特性及治疗某些疾病的研究进展。
- 张振龙
- 关键词：单克隆抗体Α肿瘤坏死因子细胞因子
- 人IFN-ε的表达、纯化及生物学特性研究被引量：2
- 2008年
- 目的表达并纯化人IFN-ε，并对其理化特性和生物学特性进行初步研究。方法利用PCR技术以人基因组DNA为模板，获得目的片段的全基因序列后，克隆到原核表达载体pET-32a（＋）上，构建重组表达载体pET-32a（＋）／IFN-ε，转化到大肠杆菌BL21（DE3）中进行表达，并对表达进行了优化。产物的表达形式为包涵体，经过纯化复性后，获得高纯度的活性蛋白IFN-ε。对IFN-ε的理化性质和抗病毒活性、抑制肿瘤细胞增长活性、刺激细胞产生抗病毒蛋白的活性进行了鉴定。结果IFN-ε以包涵体形式表达，纯化后纯度大于95％，抗病毒活性为1．2×10^5 IU／mg，能够抑制肿瘤细胞的生长，并能诱导细胞产生抗病毒蛋白MxA。结论成功表达了人IFN-ε蛋白，并证明此蛋白质具有抗病毒和抗细胞增殖的活性。
- 李莉莉张振龙
- 关键词：干扰素包涵体蛋白复性
- 聚乙二醇修饰β-干扰素的初步研究
- 目的:采用平均分子量为5kDa的已活化的单甲氧基聚乙二醇(mPEG)对基因工程重组人β-干扰素(rhIFN-β)进行化学修饰.方法:优化修饰条件,选择对rhIFN-β反应性高的修饰剂,制备三种不同修饰程度的修饰物,并对修...
- 徐静倪道明张振龙
- 关键词：聚乙二醇化学修饰生物学特性
- 文献传递
- 血小板生成素研究进展被引量：1
- 1998年
- 血小板生成素(TPO)是一种能刺激巨核系祖细胞增殖、分化和成熟的重要造血调节因 子,能够促进血小板生成,控制循环血中血小板数量,具有广阔的临床应用潜力。本文简述了TPO 的分子生物学特征、分离纯化、检测、生物学作用和临床应用前景的研究进展。
- 张振龙
- 关键词：血小板生成素巨核细胞血小板
- 重组人干扰素βser17工程菌发酵培养条件的优化研究被引量：3
- 2005年
- 实验对重组人干扰素βser17(rhIFNβser17)工程菌的发酵培养条件进行了研究,通过实验优化确定了适宜rhIFNβser17表达的培养基、诱导剂使用浓度、诱导时期和诱导后的收获时间等,建立了发酵培养工艺,并在50L发酵罐进行了中试发酵,菌体收获量湿重达13.08g/L,rhIFNβser17表达量占菌体总蛋白的20.2%,纯化后比活性达2×107IU/mg蛋白以上,为进一步的下游开发奠定了基础。
- 张振龙刘建源邓宛明郭秀梅郭鹏扬云凯
- 关键词：发酵
- 重组人乳头瘤病毒58型L1蛋白在Sf9细胞中的表达条件优化
- 2010年
- 目的 采用昆虫细胞-杆状病毒表达系统扩增人乳头瘤病毒（human papillomavirus,HPV）58型L1蛋白基因,确定L1蛋白表达的最佳条件.方法 取处于埘数生长期的S19细胞以不同的感染复数（MOI）值扩增病毒,用噬斑试验检测病毒滴度,确定扩增重组病毒的最适条件 用间接免疫荧光法判断目的蛋白表达情况 通过蛋白印迹法测定不同的表达时间和MOI值条件下目的蛋白表达量,确定目的蛋白的最佳表达条件.结果 处于对数生长期的细胞以MOI值为0.5表达48 h条件下扩增含HPV58 LI基因的重组杆状病毒,滴度最高,可达5×108pfu/ml 以MOI值为5.0表达72 h获得最佳的目的蛋白表达量.结论 确定了扩增病毒和表达相应目的蛋白的最佳条件.
- 于世荣孙丽媛刘君丁军颖李军张夕燕张振龙
- 关键词：人乳头瘤病毒基因表达重组蛋白质类
- 重组人干扰素-β1b对恒河猴免疫原性的影响被引量：5
- 2004年
- 目的:研究重组人干扰素-β 1b(rhIFN-β1b)对恒河猴的免疫原性及其对疗效的潜在影响。方法:实验分溶剂对照组及rhIFN-β1b低、中、高剂量组,分别皮下注射1.25％人血清白蛋白0.36mL·kg-1及rbIFN-β1b 4.0×106,1.2×107及3.6×107IU·kg-1,连续90d。血清结合抗体测定采用ELISA法,中和抗体测定采用细胞病变抑制法。结果:给药3周后,3个给药组动物均出现rhIFN-β1b结合抗体,4周后抗体滴度达最大值,不同剂量组间在结合抗体滴度方面未见明显的剂量-反应关系。同时,给药3周后血清中出现中和抗体,以后抗体滴度逐步升高。停药30d后,中和抗体滴度逐渐降低。结论:恒河猴重复给予rhlFN-β1b后,体内产生结合抗体和中和抗体,但给药组动物未观察到明显的病理学和生化指标异常,提示该生物制品重复使用是安全的。
- 原野吴纯启廖明阳张振龙邓宛明
- 关键词：免疫原性恒河猴中和抗体
