吕玲飞
- 作品数：3 被引量：15H指数：1
- 供职机构：中国科学院微生物研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- I.用绿色荧光蛋白监测转基因植物中选择标记基因的消除 II.OsGRP2-Cys 与WAK1的相互作用及其在植物抗病中的功能
- 吕玲飞
- 关键词：转基因植物选择标记基因绿色荧光蛋白抗病性
- 用绿色荧光蛋白监测转基因植物中选择标记基因的消除被引量：15
- 2004年
- 绿色荧光蛋白 (GFP)可直接进行活体观察 ,它的这个优点可被用于监测转基因植物中选择标记基因的消除。为此 ,构建了植物表达载体pGNG ,将绿色荧光蛋白基因 (gfp)和卡那霉素抗性基因表达盒 (NosP nptII NosT)一起克隆在两个同向的lox位点间 ,在第一个lox位点上游置有CaMV 35S启动子以驱动GFP表达 ,第二个lox位点下游置有不含启动子的大肠杆菌 β 葡萄糖醛酸酶 (GUS)基因。首先在含卡那霉素 (Kan)的培养基上筛选出转pGNG的烟草 ,借助绿色荧光可容易地检出表达GFP的转化体。然后用另一转化载体pCambia130 0 Cre二次转化表达GFP的转基因植物 ,利用另一选择标记基因 潮霉素抗性基因 (hpt)进行筛选 ,在获得的再生植株中 ,Cre重组酶的表达消除了转化体中两lox位点间的gfp和nptII。实验结果表明可借助GFP荧光的消失 ,快速选出nptII被消除的二次转化体 ,同时GUS(作为目的蛋白 )在CaMV 35S启动子驱动下获得表达。最后利用后代的分离将hpt和cre除去。
- 贾洪革吕玲飞庞永奇陈晓英方荣祥
- 关键词：选择标记基因转基因植物绿色荧光蛋白
- Ⅰ.用绿色荧光蛋白监测转基因植物中选择标记基因的消除;Ⅱ.OsGRP2-Cys与WAK1的相互作用及其在植物抗病中的功能
- 用绿色荧光蛋白监测转基因植物中选择标记基因的消除;为了快速、简单的获得含目的基因的转基因植物,通常将一选择标记基因与目的基因同时转入植物细胞,利用转化体对抗生素或除草剂的抗性,筛选出转基因植物.一旦获得了转化体,选择标记...
- 吕玲飞
- 关键词：转基因植物选择标记基因绿色荧光蛋白抗病性
