柴丹丹
- 作品数：8 被引量：7H指数：2
- 供职机构：郑州大学更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生电子电信更多>>
- 杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活和毒性检测被引量：2
- 2012年
- 目的:构建杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHH)的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH,并检测其对酵母细胞的毒性和自激活作用。方法:应用RT-PCR扩增杜氏盐藻的SAHHcDNA,测序分析后与酵母双杂交诱饵载体pGBKT7连接,构建诱饵载体pGBKT7-SAHH。用PEG/LiAc法将诱饵载体转入AH109和Y187酵母中,通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母有无毒性和自激活作用。结果:成功构建了诱饵载体pGBKT7-SAHH并成功转化到酵母细胞AH109和Y187中,表达的融合蛋白对宿主酵母细胞无毒性。在AH109和Y187酵母细胞中诱饵载体均未激活报告基因HIS3和ADE2,但是激活了报告基因MEL1。结论:诱饵载体pGBKT7-SAHH可用酵母双杂交方法筛选与SAHH相互作用的蛋白。
- 柴丹丹李庆华阎赟梦毛丽红李靓朱立强薛乐勋
- 关键词：酵母双杂交诱饵载体自激活杜氏盐藻
- 杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶基因的克隆及功能分析被引量：6
- 2011年
- 目的:探讨杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHase)基因在鞭毛再生中的作用。方法:通过设计简并引物及RACE法克隆了杜氏盐藻SAHase基因全长,使用pH休克法对杜氏盐藻进行鞭毛去除及再生,通过实时荧光定量PCR研究在转录水平上SAHase基因的变化。结果:所克隆的杜氏盐藻SAHase基因cDNA全长1926bp,包含ORF1458bp、3’UTR61bp和5’UTR407bp。实时荧光定量PCR结果显示,在鞭毛再生的过程中,SAHasemRNA转录量升高,其水平在3h时达到了未处理组的3倍左右。结论:杜氏盐藻的SAHase基因与鞭毛再生有关。
- 阎赟梦李庆华李杰柴丹丹薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻鞭毛
- OFDM信号与单载波信号的识别算法研究
- 2012年
- 提出一种基于四阶累积量特征值实现OFDM信号和单载波信号的识别算法,该特征值可有效抑制多径和高斯信道影响.仿真结果表明该算法在低信噪比时,可以达到比较高的信号正确识别率(85%以上),且当信噪比大于2dB,正确识别率可以达95%以上,接近100%.并且该算法计算量小,实现简单.
- 孙钢灿柴丹丹
- 关键词：累积量多径信道信号识别OFDM单载波信号
- 一种用于高压锂金属电池的醚类电解液及其应用
- 本发明公开了一种用于高压锂金属电池的醚类电解液及其应用。该电解液体系包括主体醚类电解液和添加剂；所述主体醚类电解液包括醚类有机溶剂和电解质锂盐；所述添加剂包括吸附剂和成膜剂；所述吸附剂为硝酸锂或高氯酸锂，所述成膜剂为二氟...
- 李翔付永柱柴丹丹
- 杜氏盐藻S--腺苷同型半胱氨酸水解酶相互作用蛋白的筛选与鉴定
- 背景及目的： S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(S-adenosylhomocystine hydrolase，SAHH)是甲基化通路中一个关键的限速酶，可逆催化S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosylhomocystin...
- 柴丹丹
- 关键词：酵母双杂交技术相互作用蛋白
- 酵母双杂交技术筛选杜氏盐藻cDNA文库中与S-腺苷高半胱氨酸水解酶相互作用的蛋白
- 2016年
- 目的:应用酵母双杂交技术筛选杜氏盐藻c DNA文库中能与S-腺苷高半胱氨酸水解酶(ds SAHH)相互作用的蛋白。方法:将构建好的p GBKT7-ds SAHH诱饵载体转化至酵母细胞Y187,与转化有杜氏盐藻c DNA文库的酵母细胞AH109杂交,从杜氏盐藻c DNA文库中筛选出能与ds SAHH相互作用的蛋白质。扩增所得基因片段全长,并在原核内表达该融合蛋白。随后采用Far-western blot、His pull-down及免疫共沉淀方法验证ds SAHH与目的蛋白在体内、外的相互作用。结果:以ds SAHH为诱饵筛选出3个阳性克隆,扩增得到dsRACK1、ds Met AP1和dse EF1α3个新基因。His pull-down和免疫共沉淀体内外实验证实dsRACK1能与ds SAHH相互作用。结论:dsRACK1是ds SAHH的相互作用蛋白。
- 李庆华张彦婷朱立强柴丹丹关方霞薛乐勋
- 关键词：酵母双杂交蛋白相互作用免疫共沉淀
- 杜氏盐藻鞭毛相关蛋白cDNA片段的克隆及在鞭毛重吸收过程中的表达
- 2011年
- 目的:克隆杜氏盐藻鞭毛相关蛋白(FAP)的cDNA片段并探讨其功能。方法:分析莱茵衣藻等生物的FAP同源蛋白的氨基酸序列保守区域,设计简并引物。提取盐藻总RNA进行RT-PCR。根据得到的序列设计3’RACE引物,巢式PCR扩增该cDNA的3’端序列。秋水仙碱处理对数生长期的盐藻细胞,使细胞停留在分裂中期,并诱导鞭毛缩短,半定量PCR检测FAP基因的表达情况。结果:RT-PCR和3’RACE分别得到长1535bp和782bp的cDNA片段,拼接后总长2141bp,编码541个氨基酸。序列比对发现与莱茵衣藻的FAP(88%)、团藻CDC48(89%)氨基酸序列均有较高的同源性。秋水仙碱处理后盐藻细胞FAPmRNA表达量高于未处理对照组(F组间=43.192,P<0.001;F时间=2.659,P=0.043;F交互=594.419,P<0.001)。结论:成功获得杜氏盐藻FAP的cDNA片段,该基因在秋水仙碱诱导的鞭毛重吸收过程中表达量增高。
- 李靓石科李俊平柴丹丹薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻秋水仙碱
- 与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基C端相互作用的新蛋白的酵母双杂交筛选
- 2013年
- 目的:用酵母双杂交的方法筛选与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基(FLA8)C端相互作用的蛋白。方法:设计特异性引物(上下游分别引入EcoRⅠ和BamHⅠ酶切位点),扩增FLA8C端(433个氨基酸)cDNA,与穿梭载体pGBKT7连接以构建诱饵表达载体,然后转化酵母菌株Y187和AH109,Westernblot法检测诱饵蛋白在转化酵母菌株内的表达。通过自激活实验和毒性实验检测诱饵表达载体是否适合利用酵母双杂交的方法筛选相互作用蛋白。转化诱饵质粒的酵母菌株Y187与AH109(文库菌)杂交,待三叶形合子形成后用营养缺陷型培养基和α-半乳糖苷酶活性实验筛选阳性克隆,并对阳性克隆进行测序。结果:成功构建了pGBKT7-FLA8-C双杂交诱饵载体;经检测该载体的表达产物对Y187和AH109均无自激活和毒性作用,可用于酵母双杂交实验;杂交后筛选得到2个阳性克隆,测序结果显示为鞭毛结合蛋白107(FAP107)和含蛋白结合结构域的预测蛋白。结论:成功筛选得到了与杜氏盐藻驱动蛋白Ⅱ动力亚基C端相互作用的蛋白,分别为FAP107和预测蛋白。
- 李靓崔柳青王瑞莉毛丽红韩康柴丹丹薛乐勋
- 关键词：酵母双杂交杜氏盐藻
