阎赟梦
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：郑州大学生物工程系更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活和毒性检测被引量：2
- 2012年
- 目的:构建杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHH)的酵母双杂交诱饵载体pGBKT7-SAHH,并检测其对酵母细胞的毒性和自激活作用。方法:应用RT-PCR扩增杜氏盐藻的SAHHcDNA,测序分析后与酵母双杂交诱饵载体pGBKT7连接,构建诱饵载体pGBKT7-SAHH。用PEG/LiAc法将诱饵载体转入AH109和Y187酵母中,通过表型筛选检测诱饵蛋白对酵母有无毒性和自激活作用。结果:成功构建了诱饵载体pGBKT7-SAHH并成功转化到酵母细胞AH109和Y187中,表达的融合蛋白对宿主酵母细胞无毒性。在AH109和Y187酵母细胞中诱饵载体均未激活报告基因HIS3和ADE2,但是激活了报告基因MEL1。结论:诱饵载体pGBKT7-SAHH可用酵母双杂交方法筛选与SAHH相互作用的蛋白。
- 柴丹丹李庆华阎赟梦毛丽红李靓朱立强薛乐勋
- 关键词：酵母双杂交诱饵载体自激活杜氏盐藻
- 杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶基因的克隆及功能分析被引量：6
- 2011年
- 目的:探讨杜氏盐藻S腺苷高半胱氨酸水解酶(SAHase)基因在鞭毛再生中的作用。方法:通过设计简并引物及RACE法克隆了杜氏盐藻SAHase基因全长,使用pH休克法对杜氏盐藻进行鞭毛去除及再生,通过实时荧光定量PCR研究在转录水平上SAHase基因的变化。结果:所克隆的杜氏盐藻SAHase基因cDNA全长1926bp,包含ORF1458bp、3’UTR61bp和5’UTR407bp。实时荧光定量PCR结果显示,在鞭毛再生的过程中,SAHasemRNA转录量升高,其水平在3h时达到了未处理组的3倍左右。结论:杜氏盐藻的SAHase基因与鞭毛再生有关。
- 阎赟梦李庆华李杰柴丹丹薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻鞭毛
- 杜氏盐藻S-腺苷高半胱氨酸水解酶基因SAHHase在鞕毛长度调控中的作用
- 杜氏盐藻是一种高度耐盐的单细胞真核藻类,生长条件要求简单,容易培养,具有一对等长的鞭毛,长度大约13μm左右,结构为典型的“9+2”结构,经过简单处理鞭毛可发生再生和重吸收。鞭毛的形态变化在光镜下容易观察,非常适合作为研...
- 阎赟梦
- 关键词：杜氏盐藻重吸收
- 文献传递
- 杜氏盐藻S-腺苷高半胱氨酸水解酶基因SAHHase在鞭毛长度调控中的作用
- 杜氏盐藻是一种高度耐盐的单细胞真核藻类,生长条件要求简单,容易培养,具有一对等长的鞭毛,长度大约13μm左右,结构为典型的“9+2”结构,经过简单处理鞭毛可发生再生和重吸收。鞭毛的形态变化在光镜下容易观察,非常适合作为研...
- 阎赟梦
- 关键词：杜氏盐藻
- 文献传递
- 杜氏盐藻cDNA文库的构建及KCBP基因的克隆被引量：4
- 2010年
- 目的:构建杜氏盐藻cDNA文库并从该文库中筛选类驱动蛋白钙调素结合蛋白(KCBP)基因cDNA序列。方法:取对数生长期的杜氏盐藻细胞,提取总RNA并分离纯化mRNA,反转录合成双链cDNA,连接到pAP3neo载体上,采用电转化法将重组质粒转化大肠杆菌DH10B。计算平板上单菌落数,测定文库的滴定度和重组率。运用PCR法筛选含有KCBP基因特异片段的质粒。结果:文库滴定度为5.6×106pfu/mL,重组率在90%左右,插入片段长度在0.4～6.0kb,平均长度为1.9kb。利用PCR法从该文库中筛选到了含有新基因KCBP特异片段的单菌落,经测序与cDNA末端快速扩增(RACE)-PCR获得的杜氏盐藻KCBP基因cDNA序列相符,此序列属于kine-sin-14家族。结论:成功构建杜氏盐藻cDNA文库,并从该文库筛选出一个kinesin样cDNA序列。
- 柳丽平李杰王翠阎赟梦薛乐勋
- 关键词：杜氏盐藻CDNA文库
