缪婷玉 作品数:36 被引量:93 H指数:7 供职机构: 福建出入境检验检疫局 更多>> 发文基金: 福建出入境检验检疫局科技计划项目 国家质检总局科技计划项目 福建省科技攻关计划 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 农业科学 自动化与计算机技术 更多>>
一种利用超声波处理提取河豚鱼DNA的方法 本发明涉及一种利用超声波处理提取河豚鱼DNA的方法,所述方法为:1)合成引物对;2)河豚鱼DNA样品中加入CTAB裂解缓冲液,在功率100%的超声波清洗器中65℃恒温温浴处理,处理时间为5-25 min,各处理重复3次;... 陈文炳 翁国柱 邵碧英 缪婷玉 江树勋 彭娟文献传递 河豚毒素DNA适配子的筛选与结构分析 被引量:9 2012年 人工合成113个碱基的随机ssDNA文库,以河豚毒素为靶物质,采用SELEX技术进行12轮筛选,测定各轮富集文库与河豚毒素的亲和力,其中第10轮富集文库与河豚毒素的亲和力最高。将第10轮富集文库进行克隆、测序,用DNAMAN软件分析克隆子的一级和二级结构,并测定克隆子与河豚毒素的亲和力。结果表明:与河豚毒素结合力高的DNA适配子经过10轮筛选后得到富集,成功筛选到最高亲和力的DNA适配子G10。 邵碧英 高兴 杨方 陈文炳 缪婷玉 彭娟关键词:河豚毒素 适配子 SELEX 转基因玉米GA21品系LAMP检测引物的筛选及方法的建立 被引量:7 2014年 根据转基因玉米GA21品系的特异序列设计了3套环介导等温扩增(LAMP)引物。通过反应温度优化、特异性测定,筛选到1套特异性好的LAMP引物,包括内引物、外引物和环引物各1对。在LAMP反应体系中加入SYBR Green I荧光染料,在实时荧光定量PCR仪上进行实时监测,对筛选到的LAMP引物进行反应条件、反应体系的优化,建立了转基因玉米GA21品系LAMP检测方法。对该方法的特异性、灵敏度、稳定性进行评价,结果表明建立的LAMP检测方法能特异、灵敏、稳定地检测转基因玉米GA21品系,检测限达到0.05%。将建立的LAMP检测方法应用于玉米及其制品中GA21品系的检测,检测结果与实时荧光PCR法的结果完全一致。 邵碧英 陈文炳 曾莹 陈彬 郑晶 缪婷玉 彭娟关键词:环介导等温扩增 特异性检测 基于多条DNA条形码的6个鳗鱼物种鉴别方法 本发明提供基于多条DNA条形码的6个鳗鱼物种鉴别方法,采用4对引物,用于扩增6种鳗鱼的16S rRNA、Cyt b、CO Ⅰ编码基因的4个DNA部分片段(<I>COⅠ</I>基因2条片段),从这4条片段中截取碱基数分别为... 陈文炳 邵碧英 缪婷玉 彭娟 张志灯 陈彬 江树勋文献传递 超声波处理对水稻种子转基因成分荧光PCR检测的影响 2016年 以转基因水稻科丰6号含量0.1%(m/m)与0.01%(m/m)的水稻种子为样品,对影响检测结果的DNA提取过程中样品CTAB裂解缓冲液常规温育与超声波温育处理进行比较分析。结果表明,在不同样品颗粒细度的样品中,无论温育时间10 min、30 min还是1 h,CTAB缓冲液超声波温育处理与常规温育处理比较,获得的DNA质量浓度有明显提高,转基因成分NOS、Cry1Ab、Kf6(Ub-C)的荧光PCR检测Ct值差异达到极显著,超声波温育处理30 min、1 h可基本达到常规温育处理4 h或8 h的样品荧光PCR检测效果,使得水稻种子转基因成分荧光PCR检测时间至少节省3-7 h,大幅度提高了检测效率。 缪婷玉 邵碧英 彭娟 江树勋 陈文炳关键词:超声波处理 水稻种子 转基因成分 实时PCR 水稻种子样品前处理对转基因成分荧光PCR检测的影响 被引量:3 2015年 以转基因水稻科丰6号不同含量的水稻种子为样品,对影响检测结果的主要前处理措施,包括样品研磨颗粒细度与DNA提取过程中样品CTAB裂解缓冲液温育时间等,进行分析筛选.结果表明,样品颗粒细度与CTAB缓冲液温育时间的不同处理组合对提取的DNA含量影响极显著,其中,样品颗粒细度>100目与CTAB缓冲液温育时间>8 h(过夜)处理的样品DNA提取效果与荧光PCR检测结果均最佳.采用最佳前处理组合,样品的主要转基因成分(Ca MV 35S、NOS、Cry1Ab)检出限从通常的转基因含量质量分数0.01%降到0.001%,使得水稻种子转基因成分荧光PCR检测灵敏度提高10倍,大幅度提高了检测结果的准确性. 王志纯 张冰 邵碧英 江树勋 缪婷玉 彭娟 陈文炳关键词:水稻种子 转基因成分 实时荧光PCR 应用SELEX技术筛选沙门氏菌抗原的适配子 被引量:5 2011年 目的:应用指数富集配体系统进化(SELEX)技术筛选沙门氏菌抗原的高亲和性适配子。方法:首先合成一个全长78个核苷酸中间含35个随机序列的随机单链寡核苷酸序列(ssDNA)文库,再以环氧乙烷丙烯酸珠子作为筛选介质,利用生物素-抗地高辛碱性磷酸酶显色系统检测DNA适配子与沙门氏菌抗原的亲和力,以获得沙门氏菌抗原的高亲和性适配子。结果:随着筛选轮数的增加,DNA适配子与沙门氏菌抗原结合后显色,吸光度逐渐增加,初步获得了沙门氏菌抗原的高亲和性适配子。结论:实验所用的筛选流程是适当的,可以考虑推广用于类似靶目标的筛选。 郎春燕 江树勋 邵碧英 陈文炳 傅碧忠 缪婷玉 陈融斌 黄晓蓉关键词:沙门氏菌 抗原 适配子 基于DNA条形码的鳗鱼物种鉴别方法 本发明涉及一种基于DNA条形码的鳗鱼物种鉴别方法,更具体涉及一种基于DNA条形码的日本鳗、美洲鳗和欧洲鳗的物种鉴别方法。该方法通过鳗鱼DNA提取,然后利用DNA条形码引物进行PCR扩增,扩增出244?bp的产物,所述DN... 陈文炳 邵碧英 缪婷玉 彭娟文献传递 限制性内切酶酶切确证河豚鱼成分PCR检测结果 被引量:6 2014年 动植物成分的聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测往往出现假阳性结果,为了有效排除河豚鱼成分检测中出现的假阳性现象,提高检测结果的准确性,应用河豚鱼PCR检测引物进行河豚鱼成分的PCR检测与限制性内切酶NmeAⅢ酶切确证实验。18个供试样品中3个样品无PCR扩增产物,判为阴性结果,15个样品初步判为疑似阳性。应用限制性内切酶NmeAⅢ对疑似阳性样品的PCR产物进行酶切与电泳分析,电泳图谱与河豚鱼阳性对照不同的2个样品,判定为假阳性结果,电泳图谱与阳性对照相同的4个未知学名的河豚鱼加工样品,确证为阳性结果,即检出河豚鱼成分,PCR产物序列经GenBank同源性序列查询比对(BLAST)予以验证,建立了简便的河豚鱼成分PCR检测结果确证方法。 曲良苗 陈文炳 缪婷玉 邵碧英 彭娟 江树勋关键词:河豚鱼 PCR检测 限制性内切酶 DNA测序 河豚毒素DNA适配子核心区域的识别 被引量:2 2017年 用DNA folding form在线软件分析河豚毒素DNA适配子A3、G10的二级结构,根据二级结构,分别合成适配子A3、G10的各4个区域的5’端地高辛标记的序列。用丙烯酸-环氧乙烷珠子固定河豚毒素,测定抗地高辛碱性磷酸酶的适宜稀释倍数,用地高辛-抗地高辛碱性磷酸酶系统检测各区域与河豚毒素的亲和力,识别出适配子的核心区域。结果表明,抗地高辛碱性磷酸酶的适宜工作浓度为2×104倍稀释;合成的适配子A3的4个区域中,A3-2区域与河豚毒素的亲和力最强,即适配子A3的核心区域为A3-2区域,实际上含有47个核苷酸;合成的适配子G10的4个区域中,G10-4区域与河豚毒素的亲和力最强,即适配子G10的核心区域为G10-4区域,实际上含有56个核苷酸。 邵碧英 陈文炳 刘正才 缪婷玉 彭娟 杨方关键词:河豚毒素 适配子