目的观察靶向抑制表皮生长因子受体（EGFR）联合阻断Hedgehog信号通路对胰腺癌细胞增殖及凋亡的协同作用，探讨二者间的协同作用机制。方法设计并合成针对人EGFR基因特异性siRNA，构建慢病毒pFU-GW—RNAi载体，感染人胰腺癌Panc-1细胞，获得稳定转染细胞株。Real time PCR检测Shh和Glil的表达情况；克隆形成实验和MTI＂法检测细胞增殖情况；流式细胞技术检测细胞凋亡情况；Western印迹方法检测ERK和AKT磷酸化水平变化；裸鼠移植瘤模型检测移植瘤生长抑制情况。结果慢病毒介导的RNAi显著抑制Panc-1细胞EGFR的表达；靶向抑制EGFR后Panc-1细胞对环巴明的敏感性显著增加，细胞增殖能力下降，其半数抑制剂量（IC50）从（2．978±0．336）斗m0L／L下降到（1．698±0．057）μmoL／L，P〈0．05；联合处理组细胞早期凋亡比率高达38．75％，显著高于单独抑制EGFR组（17．65％）及对照组（3．02％），P〈0．05；裸鼠移植瘤实验结果显示联合处理组移植瘤体积（394．8±87．5）mm^3显著低于抑制EGFR组（594．7±86．1）mm^3和单独应用环巴明处理组（771．3±82．9）mm^3；克隆形成实验结果显示联合处理可以进一步抑制细胞增殖；抑制EGFR后胰腺癌细胞ERK和AKT磷酸化水平较对照组显著降低，联合应用环巴明处理后二者磷酸化水平均进一步下降。结论靶向抑制EGFR联合环巴明处理后胰腺癌细胞体内外增殖能力均进一步被抑制，细胞凋亡率进一步增加；其协同机制可能部分与调控ERK和AKT磷酸化水平相关。
