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家蚕CDK11与RNPS1和9G8相互作用的鉴定: 【目的】鉴定家蚕CDK11与RNPS1和9G8的相互作用,为解析其是否参与前体RNA的剪接奠定基础。【方法】克隆家蚕的两个重要剪接因子RNPS1和9G8,通过免疫荧光验证家蚕CDK11两种剪切体CDK11A和CDK11B...; 张倩刘太行董小龙吴云飞杨基贵周亮潘彩霞潘敏慧; 关键词：家蚕; 文献传递

家蚕基质金属蛋白酶家族MMPs及组织金属蛋白酶抑制剂TIMP在家蚕中的功能研究: 昆虫在长期的进化过程中对多变的环境具备了高度的适应能力，这与其神奇的变态发育过程和高效的先天性免疫体系密不可分。加强昆虫变态发育及免疫机制的研究，对拓展昆虫资源的利用和害虫的绿色防控等有重要的现实意义。同时，可为研究人类...; 刘太行; 关键词：家蚕基质金属蛋白酶组织金属蛋白酶抑制剂核型多角体病毒变态发育; 文献传递

家蚕CDK11与RNPS1和9G8相互作用的鉴定: 【目的】鉴定家蚕(Bombyx mori)CDK11与RNPS1和9G8的相互作用,为解析其是否参与前体RNA的剪接打下基础。【方法】利用家蚕基因组数据库SilkDB找到本研究克隆的家蚕基因序列,采用Primer 5.0...; 张倩刘太行董小龙吴云飞杨基贵周亮潘彩霞潘敏慧; 关键词：家蚕; 文献传递

家蚕谷胱甘肽-S-转移酶BmGSTe4基因的克隆及功能分析: 谷胱甘肽-S-转移酶(glutathione S-transferases,GSTs,EC 2.5.1.18)是广泛分布于真核生物和原核生物中的一种同工酶超家族,具有分解内源和外源性有毒物质的能力.本文克隆了家蚕一个Ep...; 陈向云刘佳张春冬李尧锋刘太行张友洪鲁成潘敏慧; 关键词：家蚕辛硫磷

家蚕Sox家族基因BmDichaete的克隆与表达分析: 2017年; 【目的】Sox家族是一类转录调控因子,在多细胞动物的发育过程中起到了极其重要的作用。本研究旨在获得家蚕Bombyx mori Sox家族基因,并分析其在幼虫不同组织和发育阶段的表达模式及功能。【方法】采用cDNA末端快速扩增方法(rapid amplification of cDNA ends,RACE)克隆家蚕Sox家族基因,并对其序列进行生物信息学分析。构建原核表达载体,诱导原核表达并得到其蛋白的多克隆抗体,并以Western blot验证其蛋白在家蚕胚胎发育时期(产卵后24,48,72,96,120,144,168,192和216 h)和蚁蚕的表达特征。同时,使用半定量RT-PCR技术分析这一基因在家蚕整个发育过程以及5龄第3天幼虫不同组织(精巢、卵巢、神经节、头部、丝腺、脂肪体、马氏管、中肠、后肠、表皮、血液、气管)中的表达谱。【结果】克隆获得一个家蚕Sox家族基因,将其命名为BmDichaete(Gen Bank登录号:KY914554),其cDNA序列全长为1 541 bp,开放阅读框长741 bp,编码246个氨基酸,预测分子量大小为27.3 kD,等电点为9.89。同源序列比对和系统进化分析显示,BmDichaete具有Sox家族的典型HMG结构域,并与其他鳞翅目昆虫的Dichaete蛋白具有较高的同源性。对其表达模式分析发现,BmDichaete在家蚕整个发育时期都有表达,从胚胎发育后期到蛹前期持续高表达,在蛹后期及成虫期表达量有所下降,并且该基因在家蚕5龄第3天幼虫的卵巢、头部、丝腺及后肠组织中显著高表达。Western blot分析结果显示,BmDichaete在家蚕胚胎发育过程中持续而稳定地表达。【结论】家蚕BmDichaete具有典型HMG结构域,属于Sox家族成员。BmDichaete在家蚕胚胎发育的各个时期都发挥作用。本研究为进一步探索该基因在家蚕中的功能奠定了基础。; 杨基贵彭丽娜刘太行吴云飞杜国玉张倩王炜潘敏慧; 关键词：家蚕原核表达表达谱胚胎发育

家蚕CDK11与RNPS1和9G8相互作用的鉴定被引量：2: 2017年; 【目的】鉴定家蚕(Bombyx mori)CDK11与RNPS1和9G8的相互作用,为解析其是否参与前体RNA的剪接打下基础。【方法】利用家蚕基因组数据库Silk DB找到本研究克隆的家蚕基因序列,采用Primer 5.0进行引物设计,通过PCR技术克隆获得家蚕的两个重要剪接因子RNPS1和9G8,并构建具有不同抗原标签的过表达载体,采用NCBI检索并获得其他物种的相关序列,利用在线预测软件SMART进行结构域预测,采用Clustal X 1.83和GENEDOC 3.2预测同源序列,利用软件MEGA 6.0构建系统进化树,通过免疫荧光验证家蚕CDK11两种剪切体CDK11A和CDK11B分别与RNPS1和9G8的共定位情况,进一步通过免疫共沉淀验证CDK11A、CDK11B分别与RNPS1和9G8的相互作用。【结果】RNPS1的开放阅读框长为882 bp,编码293个氨基酸;9G8的开放阅读框长为531 bp,编码176个氨基酸;RNPS1和9G8都属于SR蛋白家族,具有该蛋白家族成员的一个富含丝氨酸/精氨酸(S/R)重复序列的RS结构域。同源序列比对表明,RNPS1和9G8都具有典型的RRM结构域,此外9G8还含有一个锌指结构域。系统进化分析显示,RNPS1聚类于无脊椎动物一支,与同为鳞翅目昆虫的斑点木蝶、黑脉金斑蝶等亲缘关系较近;9G8也聚类于无脊椎动物一支,与同为鳞翅目昆虫的黑脉金斑蝶、金凤蝶等关系较近。荧光共定位证明,RNPS1分别与CDK11A和CDK11B共定位于细胞核中,且具有点状共聚集现象;同时发现,RNPS1还具有胞质定位,点状聚集于核外周。而9G8分别与CDK11A、CDK11B在细胞核中也具有共定位现象。进一步通过免疫共沉淀发现,在所有的总蛋白和细胞裂解离心后的上清液样品中,均能检测到对应目的条带的表达,表明共转染的细胞均能正常表达目的蛋白,并且蛋白溶于上清。同时,在所有的共沉淀条带中,均能检测到对应目的条带,以上结果表明CDK11A、CDK11B均与RNPS1和9G8具有相互作用。【结论】家蚕RNPS1和9G8具有典型的; 张倩刘太行董小龙吴云飞杨基贵周亮潘彩霞潘敏慧; 关键词：家蚕

细胞凋亡抑制蛋白IAPs的研究进展与系统进化分析被引量：2: 2014年; 凋亡抑制蛋白(inhibitors of apotosis protein,IAP)是细胞凋亡过程中的重要调控因子,具有抑制细胞凋亡的作用。本文综述国内外学者在IAPs蛋白结构和功能及家族新成员鉴定等方面的研究成果,重点介绍了病毒、酵母、线虫、果蝇、家蚕等的IAPs蛋白的3个主要结构域———杆状病毒IAP重复序列结构域(BIR)、RING锌指结构域、半胱天冬酶活化募集结构域(CARD),以及IAPs在抑制半胱天冬酶Caspase3/7/9催化活性和阻断细胞凋亡进程中的生物学功能。对IAPs家族进行系统进化分析,推测2种核型多角体病毒(云杉卷叶蛾核型多角体病毒和油桐尺蠖核型多角体病毒)在适应性进化过程中获得了与宿主细胞IAPs蛋白结构与功能类似的IAPs蛋白。; 宋娟易华山户艳芬何倩刘太行潘彩霞鲁成潘敏慧; 关键词：细胞凋亡凋亡抑制蛋白生物学功能系统进化

细胞凋亡抑制蛋白IAPs的研究进展与系统进化分析: 凋亡抑制蛋白(inhibitors of apotosis protein,IAP)是细胞凋亡过程中的重要调控因子,具有抑制细胞凋亡的作用。本文综述国内外学者在IAPs 蛋白结构和功能及家族新成员鉴定等方面的研究成果,重...; 宋娟易华山户艳芬何倩刘太行潘彩霞鲁成潘敏慧

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刘太行

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