胡青海
- 作品数：60 被引量：137H指数：6
- 供职机构：中国农业科学院上海兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程生物学医药卫生更多>>
- 布氏杆菌外膜蛋白D15的克隆表达及生物学活性分析
- 本实验通过PCR技术扩增牛型布氏杆菌外膜蛋白基因D15,将D15全长克隆至表达载体pCold TF中,构建重组表达质粒pCold TF-D15,转化大肠杆菌BL21（DE3）后,在IPTG诱导下表达大小约为130Ku的融...
- 孙晓庆韩先干童永亮宋军丁铲胡青海于圣青
- 关键词：外膜蛋白生物学特性
- 文献传递
- 免疫蛋白组学技术鉴定鸭疫里默氏杆菌的免疫原性蛋白GroEL
- 鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)可引起家鸭、火鸡及多种禽类的急性或慢性败血性传染病,给养鸭业造成巨大的经济损失。在其21个血清型中,国内引起鸭发病的主要是血清1、2和10型。因目前...
- 韩先干胡青海陈文静丁铲何亮于圣青
- 文献传递
- 基于nuc基因的环介导等温核酸扩增可视化技术检测食源性金黄色葡萄球菌被引量：1
- 2023年
- 金黄色葡萄球菌食物中毒主要是由食用被金黄色葡萄球菌及其所产生的肠毒素污染的奶、肉、蛋、糕点、剩饭等蛋白或淀粉含量丰富的食品引起,快速精准的金黄色葡萄球菌检测技术对于保障人们的健康和食品安全具有重要意义。本研究以nuc基因作为检测靶基因,建立了一种检测金黄色葡萄球菌的环介导等温核酸扩增(LAMP)技术。该方法检测金黄色葡萄球菌基因组DNA样品为阳性,而对单细胞增生李斯特菌、鼠伤寒沙门菌、肠出血性大肠杆菌、空肠弯曲菌、小肠结肠炎耶尔森菌和产气荚膜梭菌等食源性致病菌和猪链球菌、胸膜肺炎放线杆菌和多杀性巴氏杆菌等猪源细菌基因组DNA检测结果均为阴性,表明建立的LAMP方15法具有较好的特异性。灵敏度的检测结果表明,LAMP的检测限可达5.6×10^(1) CFU/mL,而常规PCR的检测限为5.6×10^(5) CFU/mL,即LAMP的检测灵敏度比常规PCR高出10000倍。临床样品的检测结果表明,50份猪肉样品中有4份检出金黄色葡萄球菌。本研究为食源性金黄色葡萄球菌提供了一种快速、可视化、特异性好、灵敏度高、成本低的LAMP检测方法。
- 邹作成王西刘雪兰胡仲皓田祥强何晓花杜晓莉王佳玲李柯刘浩洋嵇辛勤胡青海
- 关键词：金黄色葡萄球菌可视化
- 基于hipO基因的环介导等温核酸扩增技术检测食源性空肠弯曲菌被引量：1
- 2023年
- 空肠弯曲杆菌是人细菌性胃肠炎的常见食源性致病菌之一,严重危害人类的健康,建立快速精准检测食源性空肠弯曲杆菌的方法,对于保障人们的健康和食品安全具有重要意义。本研究建立了一种可视化、低成本基于hipO基因的环介导等温扩增(LAMP)技术快速检测空肠弯曲菌的方法。该LAMP方法检测空肠弯曲菌CJFX01基因组DNA为阳性,而对肠出血性大肠杆菌O157:H7、鼠伤寒沙门菌、单增李斯特菌、小肠结肠炎耶尔森菌、金黄色葡萄球菌、产气荚膜梭菌等食源性致病菌和胸膜肺炎放线杆菌Aha01、副猪嗜血杆菌Ahh01、多杀性巴氏杆菌Ahm03、猪链球菌Ahs02、猪丹毒丝菌Ahe01、支气管败血波氏杆菌Ahb01等猪源致病菌基因组DNA检测结果均为阴性,表明其具有良好的特异性。灵敏度的检测结果表明,LAMP检测空肠弯曲杆菌的检测限为5.4×10^(1)CFU/mL,而基于F3/B3引物对常规PCR的检测限为5.4×10^(6)CFU/mL,即LAMP检测空肠弯曲杆菌的灵敏度比常规PCR高100 000倍。本研究建立的LAMP检测方法具有快速、可视化、低成本、特异性好和灵敏度高等优点,适用于实验室和基层食品安全监管部门进行现场快速检测。
- 田祥强王西邹作成胡仲皓杜晓莉何晓花王佳玲李柯刘浩洋刘雪兰嵇辛勤胡青海
- 关键词：空肠弯曲菌食源性致病菌
- 鸭肝炎病毒FC64株的全基因组序列测定与分析
- 鸭病毒性肝炎是由鸭肝炎病毒(DHV)感染引起的一种鸭的重要传染病，弱毒苗可有效防治该病的发生。本文介绍了从临床上分离获得一株DHV强毒株，经SPF鸡胚传64后，培育成为弱毒株，命名为FC64。为了对该弱毒疫苗进行遗传背景...
- 宋翠萍韩先干仇旭升于圣青陈鸿军胡青海丁铲
- 关键词：鸭肝炎病毒全基因组序列弱毒株
- 文献传递
- 一种鸭源常见细菌多重PCR检测试剂盒及其检测方法
- 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种鸭源常见细菌多重PCR检测试剂盒及其检测方法。本发明公开了一种鸭源常见细菌多重PCR检测试剂盒，其包含3对引物：RADnaBP1和RADnaBP2；E.coliphoAP1和E.c...
- 于圣青胡青海韩先干丁铲仇旭升宋翠萍
- 牛型布氏杆菌A19株外膜蛋白OMP2b的表达及免疫原性检测
- 根据已发表的牛型布氏杆菌外膜蛋白OMP2b基因的核苷酸序列,设计一对特异性的引物,以牛型布氏杆菌A19株基因组为模板,通过PCR扩增出OMP2b全长,将OMP2b经T-A克隆、序列测定和分析。结果表明,OMP2b全长1 ...
- 何亮韩先干胡青海丁铲于圣青
- 关键词：蛋白表达
- 文献传递
- 鸭疫里默氏杆菌血凝素基因的克隆、表达及其蛋白的定位分析
- 根据本实验室测定的鸭疫里默氏杆菌CH3株全基因组精细图中的血凝素基因序列设计一对特异性引物，PCR扩增不同血清型鸭疫里默氏杆菌的血凝素基因，进行序列测定与分析。结果表明血凝素基因全长1059bp，编码352个氨基酸。鸭疫...
- 屠晶胡青海于圣青丁铲韩先干朱寅玉王小兰苗双卢凤英
- 关键词：鸭疫里默氏杆菌血凝素基因克隆原核表达蛋白定位
- 一种鸭源常见细菌多重PCR检测试剂盒及其检测方法
- 本发明属于生物检测技术领域，具体涉及一种鸭源常见细菌多重PCR检测试剂盒及其检测方法。本发明公开了一种鸭源常见细菌多重PCR检测试剂盒，其包含3对引物：RADnaBP1和RADnaBP2；E.coliphoAP1和E.c...
- 于圣青胡青海韩先干丁铲仇旭升宋翠萍
- 文献传递
- 禽致病性大肠杆菌安徽分离株luxS和pfs基因的克隆、表达与细胞外合成AI-2活性检测被引量：14
- 2012年
- 【目的】LuxS/AI-2型密度感应系统存在于革兰氏阴性和阳性菌中,可产生用于细菌种间交流的通用自诱导信号分子AI-2(Autoinducer-2,AI-2),细菌许多生理功能都受此系统的调节。本研究开展对禽致病性大肠杆菌(Avian Pathogenic Escherichia coli,APEC)自诱导信号分子AI-2的检测和建立体外合成、定量的方法,为进一步研究APEC的AI-2调控作用奠定基础。【方法】利用哈维弧菌BB170(Vibrio harveyi BB170)开展对APEC AI-2的检测;利用表达、纯化的LuxS和Pfs在体外催化S-腺苷同型半胱氨酸(Sadenosylhomocysteine,SAH),进行AI-2的体外合成。【结果】APEC能产生自诱导信号分子AI-2;成功表达可用于AI-2合成的可溶性重组蛋白LuxS和Pfs;纯化的重组蛋白LuxS和Pfs与SAH同时作用后,合成了浓度为300μmol/L的AI-2;运用哈维弧菌BB170对合成的AI-2活性检测表明,其活性是阴性对照的700倍。【结论】APEC存在LuxS/AI-2型密度感应系统,APEC的LuxS和Pfs可以在体外催化SAH生成有活性的AI-2分子。本研究为进一步研究APEC的AI-2的调控作用奠定基础。
- 韩先干白灏刘蕾陈文静丁铲胡青海祁克宗于圣青
- 关键词：禽致病性大肠杆菌密度感应系统LUXS
