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陈保文: 作品数：119 被引量：339H指数：10; 供职机构：中国食品药品检定研究院更多>>; 发文基金：国家科技重大专项国家高技术研究发展计划艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项更多>>; 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>

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应用多重聚合酶链反应技术快速鉴定牛分支杆菌卡介苗株被引量：4: 2003年; 目的　建立快速鉴定牛分支杆菌卡介苗 (BCG)菌株的方法。方法　依据最近研究发现的牛分支杆菌BCG菌株不存在命名为缺失区 1(deletedregion 1,RD1)的基因区 ,而其他牛分支杆菌菌株和其他结核分支杆菌复合群 (MTC)菌种 (结核分支杆菌、非洲分支杆菌和田鼠分支杆菌 )存在RD1基因区的遗传学信息 ,应用多重聚合酶链反应 (PCR)检测RD1基因区存在与否 ,以鉴别BCG菌株与其他牛分支杆菌菌株及其他MTC菌种。结果　所试 5株BCG疫苗生产用标准菌株和近期国内发生的 1例小儿BCG接种后全身播散性感染致死病例的 2株BCG分离菌株 ,均缺失RD1基因区 ;其他牛分支杆菌菌株 ,包括 3株牛分支杆菌标准菌株、5株分别从结核病牛或鹿分离的牛分支杆菌菌株 ,1株从结核病患者痰标本分离的牛分支杆菌菌株 ,以及其他MTC菌种 ,包括结核分支杆菌H3 7Rv和H3 7Ra标准菌株、48株从结核病患者痰标本分离的结核分支杆菌菌株、3株非洲分支杆菌标准菌株 ,均存在RD1区。结论　多重PCR技术用于牛分支杆菌BCG菌株的鉴定简便、快速、特异 ,适于在临床实验室应用。; 李国利陈保文庄玉辉王国治赵铭沈小兵孙桂芝; 关键词：结核分支杆菌 BCG 多重聚合酶链反应卡介苗结核病

耻垢分枝杆菌与结核分枝杆菌抗原的交叉免疫应答研究被引量：1: 2017年; 目的探讨耻垢分枝杆菌（Mycobacterla smegmatis，MS）与结核分枝杆菌（Mycobacteria tuberculosis,MTB）抗原及其免疫原性的交叉情况。方法以低温超声破碎方法提取MS和MTB菌体抗原．通过Westernblot观察菌体抗原与抗血清的交叉免疫应答。将超声破碎的菌体抗原与不完全弗氏佐剂混匀后肌肉注射于小鼠，免疫后7d以ELISPOT技术及流式细胞学技术检测小鼠脾脏淋巴细胞经不同细菌抗原分别刺激后产生的各类细胞因子水平，ELISA技术检测血清中抗体效价水平。结果MS与MTB间存在一些交叉抗原。经两细菌致敏的小鼠均能对不同分枝杆菌抗原产生以细胞免疫为主的免疫应答，CIM^＋及CD8^＋T淋巴细胞分泌IL-2、IFN-γ水平均较未免疫组明显增高（P〈0．05），对非分枝杆菌属布氏杆菌的对照抗原几乎不产生细胞免疫应答。结论MS与MTB间存在这些共同抗原使MS致敏动物能引起针对结核分枝杆菌特异性免疫应答，为MS用于结核新疫苗佐剂等研究提供科学依据。; 曹俊卢锦标谢安平徐苗王国治沈小兵陈保文郭述良; 关键词：结核分枝杆菌耻垢分枝杆菌免疫应答

豚鼠模型中结核菌素纯蛋白衍生物量效关系比较研究被引量：3: 2018年; 目的在不同分枝杆菌致敏豚鼠模型中研究结核菌素纯蛋白衍生物(purified protein derivative of tuberculin,TB-PPD)的量效关系。方法将受试豚鼠随机分成6组:结核分枝杆菌H37Rv活菌致敏组、结核分枝杆菌临床株CMCC 94757、94754、94766致敏组、卡介苗(Bacillus Calmette-Guérin vaccine,BCG)致敏组和灭活结核分枝杆菌H37Rv致敏组。各组豚鼠分别于左侧大腿腹股沟皮下注射相应致敏原,5~6周后,所有豚鼠于脊柱两侧皮内注射20 IU/m L TB-PPD和50 IU/m L TB-PPD各0.1 m L;于注射后24 h、48 h观察和记录局部硬结的纵径与横径,计算平均值。结果所有组别豚鼠接受两种规格TB-PPD皮试后,无论是24 h还是48 h,局部硬结反应直径均大于10 mm,全部阳性,阳转率均为100%。5 IU TB-PPD皮试反应强度高于2 IU TB-PPD,存在明显的剂量效应关系。其中,24 h结果显示:2 IU TB-PPD和5 IU TB-PPD在H37Rv活菌致敏组、94766致敏组、灭活H37Rv致敏组皮试反应大小差异无统计学意义(t=2.291、P=0.071;t=2.722、P=0.053;t=1.76、P=0.153),其余3组5 IU TB-PPD皮试反应强度高于2 IU TB-PPD,差异均有统计学意义(t=4.098、P=0.015;t=4.811、P=0.009;t=3.068、P=0.037)。48 h硬结反应和24 h、48 h平均硬结反应结果均显示:在各致敏组豚鼠模型中5 IU TB-PPD皮试反应强度均高于2 IU TB-PPD,皮试反应大小均有统计学差异(t=3.471、P=0.018;t=3.371、P=0.020;t=6.216、P=0.003;t=5.244、P=0.006;t=3.959、P=0.017;t=4.674、P=0.010;t=4.824、P=0.008;t=3.794、P=0.019;t=3.857、P=0.018;t=2.86、P=0.046;t=3.539、P=0.024;t=3.365、P=0.028)。结论各组豚鼠致敏模型中5 IU TB-PPD的效价均明显高于2 IU TB-PPD,存在较为明显的量效关系。各种感染状态下,虽然高剂量制品可诱导更强的迟发型超敏(delayed type hypersensitivity,DTH)反应,但低剂量制品也不影响其阳性检出率。; 苏城卢锦标沈小兵陈保文王国治都伟欣; 关键词：结核菌素纯蛋白衍生物皮肤试验结核分枝杆菌卡介苗

一种增强型结核亚单位疫苗: 本发明提供了一种增强型结核亚单位疫苗，其包括结核分枝杆菌抗原Ag85b蛋白、重组结核分枝杆菌ESAT6-CFP10融合蛋白、BCG-CpG佐剂、铝佐剂以及PolyIC佐剂。本发明疫苗可减轻Mtb感染豚鼠各脏器的病变程度，...; 王国治卢锦标都伟欣陈保文杨蕾苏城沈小兵; 文献传递

结核病免疫治疗及诊断技术研究与应用: 王国治庄玉辉赵桂芳李国利沈小兵张小刚陈保文何秀云马欣罗永艾; 本研究属基础医学、临床医学与生物工程交叉学科结核病是危害人类健康的重大的传染病之一，结核病耐药治疗问题、结核菌生长缓慢检测周期长检出率低问题以及结核菌感染高危人群的预防问题是我国结核病控制面临的难题，本研究针对上述问题从...; 关键词：; 关键词：结核病实验室快速诊断耐药检测免疫治疗母牛分枝杆菌菌苗

结核分枝杆菌抗体检测试剂生产质量控制与临床研究概述被引量：5: 2012年; 依据国家食品药品监督管理局对体外诊断试剂研究与质量控制有关指导原则与《体外诊断试剂注册管理办法》(试行)的相关规定,参考《肺结核诊断标准》和《结核病诊断实验室检验规程》,探讨了结核分枝杆菌胶体金法和酶联免疫法抗体检测试剂的原辅材料、生产工艺、质量控制,以及临床评价研究的基本要求,为从事结核病血清学诊断试剂生产、研究单位及临床评价单位的同仁提供借鉴。; 陈保文都伟欣杨蕾王国治; 关键词：分枝杆菌结核抗体细菌

耻垢分枝杆菌疫苗对小鼠细胞因子产生及Th1/Th2应答的影响被引量：10: 2005年; 目的研究以耻垢分枝杆菌(M.S)制备的M.S疫苗对小鼠免疫应答的影响,验证M.S的免疫原性、探讨M.S疫苗的免疫调节作用。方法将BALB/c小鼠随机分成生理盐水对照组和M.S疫苗低、中、高剂量组,每组6只,分别注射生理盐水和不同剂量的M.S疫苗。取小鼠脾细胞或腹腔巨噬细胞体外培养,用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测培养上清中白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-12和γ干扰素(IFN-γ)的含量,分析M.S疫苗对小鼠Th1/Th2类应答的影响。结果(1)生理盐水对照组和M.S疫苗低、中、高剂量组小鼠产生的IL-12分别为(32.6±22.7)、(58.9±18.6)、(77.3±38.0)、(114.7±9.9)pg/m l,M.S疫苗中、高剂量组与生理盐水对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。(2)生理盐水对照组和M.S疫苗低、中、高剂量组小鼠产生的IL-2分别为(5.0±2.6)、(13.4±9.3)、(15.3±9.7)、(22.6±7.5)pg/m l,M.S疫苗高剂量组与生理盐水对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。(3)体外以ConA刺激时,生理盐水对照组和M.S疫苗中剂量组小鼠产生的IFN-γ分别为(662±279)和(807±163)pg/m l,IL-4分别为(407±127)和(101±26)pg/m l,但M.S疫苗组与生理盐水对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);体外以M.S-纯化蛋白衍生物(PPD)刺激时,生理盐水对照组和M.S疫苗中剂量组小鼠产生的IFN-γ分别为(14.0±6.31)和(55.3±32.4)pg/m l,两组比较差异有统计学意义(P<0.05),各组产生的IL-4均在检测限以下。结论M.S具有良好的免疫原性,以此制备的M.S疫苗具有促进Th1类应答、抑制Th2类应答的免疫调节作用。; 徐苗陈保文沈小兵苏城罗永艾王国治; 关键词：TH1细胞 TH2细胞免疫因子

16S～23SrDNA内转录间隔区序列分析及其在分支杆菌鉴定中的应用价值被引量：28: 2002年; 目的　研究 16S～ 2 3SrDNA内转录间隔区 (internaltranscribedspacer,ITS)序列在分支杆菌鉴定中的应用价值。方法　应用PCR 直接测序法对 2 2种 30株分支杆菌参考菌株和 16株分支杆菌临床分离菌株 16S～ 2 3SrDNAITS测序。对所测定序列以及GenBank所报道的有关序列用Clustal程序 (MegAlignPackage [WindowsVersion 4 0 1];DNASTAR ,Madson ,Wis)处理分析 ,计算种间相似性 ,用PHYLIPPackage构建分支杆菌菌种聚类分析树状谱。结果　除结核分支杆菌复合群 (MTC)菌种 (结核分支杆菌、牛分支杆菌、非洲分支杆菌和田鼠分支杆菌 ) 16S～ 2 3SrDNAITS序列完全一致外 ,其它分支杆菌菌种间核苷酸排列顺序及长度变异较大 ,种间相似性为 30 4 %～ 86 5 % ,聚类分析树状谱能将各分支杆菌菌种相分离。结果表明 16S～ 2 3SrDNAITS序列分析能将MTC与非结核分支杆菌 (NTM)相鉴别 ,能将NTM鉴定至种的水平。结论　 16S～ 2 3SrDNAITS可做为分支杆菌鉴定的靶基因。; 李国利庄玉辉赵铭王国治范以虎陈保文胡忠义; 关键词：分支杆菌内转录间隔区聚合酶链反应 NTM 结核病

斑点免疫金渗滤法检测抗荚膜组织胞浆菌抗体的研究被引量：2: 2007年; 目的研究快速检测荚膜组织胞浆菌抗体的方法。方法荚膜组织胞浆菌素纯蛋白衍生物(P-HTPM)为包被抗原,以葡萄球菌A蛋白(SPA)标记的免疫胶体金为检测标记物,采用斑点免疫金渗滤试验(DIGFA)检测荚膜组织胞浆菌(HC)免疫小鼠血清中抗HC抗体以及其他真菌免疫血清中抗体。结果DIGFA检测20份HC小鼠免疫血清,结果全为阳性,与ELISA检测结果一致,敏感性为100%。检测8份正常小鼠血清出现1份假阳性,特异性为87.5%。检测其他真菌免疫血清结果为:念珠菌属和马尔尼菲青霉菌免疫血清结果全为阴性;8份皮炎芽生菌血清出现1份阳性,9份副球孢子菌血清出现2份阳性。结论斑点免疫金渗滤法检测抗HC抗体有较高的敏感性和特异性,快速简便。经临床标本扩大验证后将对荚膜组织胞浆菌病的快速诊断有应用价值。; 王璞陈保文徐苗王国治; 关键词：荚膜组织胞浆菌斑点免疫金渗滤法

结核分枝杆菌早期培养滤液蛋白的制备和应用: 2012年; 全球结核杆菌感染者高达20亿人，每年新发病例约800万～1000万，其中我国每年新发患者高达150万。结核杆菌流行病学的一个重要特征是结核分枝杆菌的潜伏感染。结核分枝杆菌潜伏感染是一种亚临床状态，其中约有10％的结核分枝杆菌潜伏感染者会发展成为结核病患者。流行病学调查显示，我国受结核杆菌感染人数超过5亿。因此，如何有效、全面地筛查出结核病患者和结核杆菌潜伏感染人群，是结核病控制首要解决的问题。; 都伟欣杨蕾苏城沈小兵徐苗卢锦标王国治陈保文; 关键词：结核分枝杆菌流行病学调查结核病患者结核杆菌

陈保文

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