周海斌
- 作品数：14 被引量：62H指数：4
- 供职机构：山东大学更多>>
- 发文基金：教育部科学技术研究重点项目World Health Organization海外青年学者合作研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 小鼠Lrp5基因启动子的克隆及功能分析被引量：3
- 2005年
- 为分析小鼠LDL受体相关蛋白 5 (Lrp5 )基因启动子的结构与功能 ,采用DNA重组技术 ,构建了 7种含小鼠Lrp5基因启动子荧光素酶报告基因表达体系 ,分别为 :pGL3 10 3(- 10 3bp～ + 132bp) ,pGL3 30 3(- 30 3bp～ + 132bp) ,pGL3 4 99(- 499bp～ + 132bp) ,pGL3 70 8(- 70 8bp～ + 132bp) ,pGL3 90 9(- 90 9bp～ + 132bp) ,pGL3 10 34(- 10 34bp～ + 132bp ) ,pGL3 12 2 9(- 12 2 9bp～ + 132bp) .以pRL TK为内参照质粒 ,瞬时转染成骨细胞株 (U2OS )及非成骨细胞株 (COS 7) ,收集细胞测定荧光素酶相对表达活性 .7种荧光素酶表达质粒在 2种细胞中表达无显著差异 ,即在所分析的小鼠Lrp5基因的 136 1bp(- 12 2 9bp～ + 132bp)范围内 ,不存在成骨细胞特异的表达元件 ;而且 7种表达质粒在 2种细胞中呈现相似的变化趋势 ,pGL3 10 3表达活性最高 ,pGL3 12 2 9表达活性显著降低 .表明小鼠Lrp5基因转录所必需的基本启动子序列在 - 10 3bp～ + 1bp范围内 ,- 10 34bp～ - 12 2 9bp之间的 195bp片段内可能含有负调控元件 .
- 吕萍龚瑶琴李江夏周海斌陈丙玺
- 关键词：小鼠启动子
- 非综合征性耳聋一家系的基因定位被引量：3
- 2003年
- 目的 定位 1个一级表亲婚配非综合征性耳聋家系的致病基因 ,为分离该基因奠定基础。方法 先进行X染色体扫查 ,排除致病基因位于X染色体的可能 ;随后采用纯合子定位法 ,进行候选基因分析和常染色体基因组扫查 ;再对提示与致病基因紧密连锁的位点所在区域进一步分析 ,确定致病基因所在区域。结果 确认该家系的非综合征性耳聋为常染色体隐性遗传方式 ,候选基因分析排除 2 5个已知基因是该家系致病基因的可能 ,而常染色体扫查提示致病基因位于D17S12 93附近 ,进一步分析将其定位于D17S185 0和D17S1818之间 5 .0 7cM区域。结论 该家系的致病基因定位于 17q11.2 12的D17S185 0和D17S1818之间 5 .0 7cM区域 ,是新的常染色体隐性遗传非综合征性耳聋致病基因位点。
- 程琳龚瑶琴刘奇迹陈丙玺郭辰虹李江夏张锡宇卢勇高贵敏周海斌郭亦寿
- 关键词：非综合征性耳聋基因定位
- 正常人群及3个智力低下家系FMR1基因CGG重复序列检测与分析被引量：2
- 2004年
- 目的:检测、分析脆性X综合征致病基因FMR1第1外显子的三核苷酸CGG重复序列在正常人群及智力低下家系中的分布情况。方法:采用PCR扩增技术和聚丙烯酰胺凝胶电泳技术方法,对随机抽取的154名中国汉族正常人(男73人、女81人)和3个智力低下家系有关成员FMR1基因CGG重复序列进行分析。结果:共检测到19种等位基因,CGG重复变异范围n=12～40,最大频率等位基因n=29,频率为16.2%。3个智力低下家系中未检测到CGG重复序列异常扩增。结论:在中国正常人群体中FMR1基因CGG重复序列变异分布与高加索人群体有差异;所检测的3个家系智力低下症状不是由于FMR1基因CGG重复异常扩增所致。
- 高贵敏周海斌张锡宇陈丙玺郭辰虹龚瑶琴
- 关键词：脆性X综合征基因FMR1三核苷酸重复
- 21-羟化酶基因新突变P459H和R483W的功能学研究被引量：1
- 2009年
- 对两个单纯男性化型21-羟化酶缺陷症（21-OHD）患者CYP21A2基因突变P459H和R483W进行体外功能学研究，构建携带点突变P459H和R483W的真核表达载体，转染哺乳动物细胞COS-7，测定孕酮转化为11．脱氧皮质酮的转化率，P459H突变的21-羟化酶残余活性为6．8％，R483W则为2．9％。
- 宋璐璐蒋玲王甲莉王慧周海斌张晓黎
- 关键词：先天性肾上腺皮质增生症CYP21基因突变酶活性测定
- 21-羟化酶缺乏症家系的基因突变研究被引量：5
- 2007年
- 目的通过对3个21-羟化酶缺乏症家系的21-羟化酶基因（steroid21-hydroxylase gene,CYP21）直接测序研究,探讨家系中该基因突变类型。方法收集4例患者及其部分家系成员外周血,提取基因组DNA,PCR扩增CYP21基因后直接测序。结果CYP21基因序列分析共检测到6种突变类型。家系1中患者CYP21基因存在4种杂合突变：clusteE6、Q318X、A391T、P459H,其中前3种突变串联排列于同一条染色体上,P459H突变目前国内外尚未见报道,A391T为罕见突变;家系2中患者CYP21基因存在clusteE6、R483W两种杂合突变,其中R483W为罕见突变类型;家系3中患者第4外显子存在I172N纯合突变。结论在3个21-羟化酶缺乏症家系中共检测出6种突变类型,其中P459H为新发现的突变,A391T、R483W为罕见突变。虽然导致21-羟化酶缺乏症的突变主要是一些从假基因（CYP21P）转位到CYP21的序列,但随机突变也是21-羟化酶缺乏症的原因。
- 王慧蒋玲王萍萍周海斌王甲莉宋璐璐
- 关键词：21-羟化酶缺乏症先天性肾上腺皮质增生症CYP21基因突变
- 白藜芦醇促进成骨细胞分化的机制研究
- 白藜芦醇能促进骨髓基质细胞向成骨细胞的分化，以剂量依赖的方式提高碱性磷酸酶和脯氨酰羟化酶活性。其在明显促进成骨细胞分化的同时，能抑制脂肪细胞的分化，目前发现白藜芦醇可以激活SIRT1，而后者又能够抑制脂肪的关键调控因子P...
- 周海斌
- 关键词：白藜芦醇成骨细胞细胞分化药物靶点分子机制
- 亚甲基四氢叶酸还原酶基因C677T突变与山东汉族人群深静脉血栓形成的相关性被引量：14
- 2002年
- 目的 研究亚甲基四氢叶酸还原酶 (methylenetetrahydrofolate reductase,MTHFR)基因C6 77T突变与中国人深静脉血栓形成的关系。方法 采用聚合酶链反应 -限制性片段长度多态性方法对山东汉族 6 3例深静脉血栓形成患者和 80名正常对照进行了 MTHFR基因 C6 77T突变检测 ,计算患者组与对照组的基因型频率 ,以及该突变与深静脉血栓形成的相关性。结果 患者组与对照组 C/ T杂合子频率分别为 4 1.2 7%和 4 3.75 % ;T/ T纯合子频率分别为 5 2 .38%和 36 .2 5 %。患者组突变频率较高 (χ2 =6 .372 ,P<0 .0 1,ORT/T=4 .5 5 2 ,95 %可信区间 :1.4 4 0～ 14 .398;χ2 =6 .74 2 ,P =0 .0 0 9)。结论 MTHFR基因C6 77T突变与山东汉族人群深静脉血栓形成有相关性。
- 郭辰虹郭琼行龚瑶琴陈丙玺刘奇迹李江夏高贵敏周海斌
- 关键词：亚甲基四氢叶酸还原酶基因深静脉血栓形成MTHFR
- 小鼠Lrp5基因基本启动子分析被引量：1
- 2004年
- 目的:研究小鼠Lrp5基因基本启动子。方法:PCR扩增小鼠Lrp5基因基本启动子序列,构建荧光素酶报告基因表达体系,以PRL鄄TK为内参照质粒,瞬时转染COS鄄7细胞熏48h后收集细胞测定荧光素酶相对表达活性。结果:在小鼠Lrp5基因基本启动子区域,构建了三种荧光素酶报告基因表达体系pGL3鄄16(鄄16bp～+132bp)、pGL3鄄54(鄄54bp～+132bp)和pGL3鄄103(鄄103bp～+132bp)。pGL3鄄103表达载体的相对荧光素酶活性最高;pGL3鄄54的相对荧光素酶活性是pGL3鄄103表达载体的80%;而pGL3鄄16相对荧光素酶表达活性急剧下降,与阴性对照pGL3鄄basic的活性相近,无启动子活性。结论:鄄54bp～鄄16bp区域内含有小鼠Lrp5基因转录所必需的基本启动子序列,其中三个SP1保守序列是小鼠Lrp5基因基本启动子所必需的。
- 吕萍龚瑶琴李江夏周海斌陈丙玺
- 关键词：基因小鼠
- 小鼠Lrp5基因5′端调控区域的功能
- 2005年
- 为研究小鼠低密度脂蛋白(LDL)受体相关蛋白5(LRP5)基因5′端调控序列的功能,PCR扩增小鼠Lrp5基因翻译起始位点上游3041bp(-2909bp^+132bp)DNA序列.PCR产物定向克隆到pGL3-basic载体上,重组质粒命名为pGL3-2909.以pGL3-2909质粒为模板,以不同的引物扩增出不同长短的DNA片段,分别定向克隆到含小鼠Lrp5基因基本启动子并含有荧光素酶报道基因的pGL3-103载体上,构建了12种荧光素酶报告基因表达体系:pGL3-267,pGL3-513,pGL3-535,pGL3-560,pGL3-575,pGL3-623,pGL3-645,pGL3-719,pGL3-770,pGL3-1032,pGL3-1330,pGL3-1619.以pRL-TK为内参照质粒,瞬时转染COS-7细胞,48h后收集细胞测定荧光素酶相对表达活性,pGL3-575(-2909bp^-2334bp)活性是pGL3-513(-2909bp^-2396bp)的20%,pGL3-535(-2909bp^-2374bp)的活性是pGL3-513的44%,pGL3-575的活性是pGL3-560(-2909bp^-2349bp)的48%,均有显著性差异.结果表明,在-2396bp与-2374bp之间的22bp区域内以及-2349bp与-2334bp之间的15bp区域内存在负调控元件.软件分析表明,此区域含有IK2,LYF1及MZF1调控元件.
- 吕萍龚瑶琴李江夏周海斌陈丙玺
- 关键词：小鼠
- 提高出生人口先天素质的干预模式被引量：10
- 2002年
- 目的 :降低出生人口缺陷 ,提高人口先天素质。方法 :培训遗传咨询人员 ,建立遗传咨询网络 ,确认监护对象 ,确定监护目标和制定干预方法。结果 :创立了《提高出生人口先天素质的干预模式》 ;在山东省 10个市 (设区市 )培训遗传咨询医生 1396人 ,技术人员 12 4人 ;建立遗传咨询门诊 6 0个 ;遗传学实验室30个。按这个模式试行结果 ,可以降低出生缺陷率 5 .2‰左右。结论 :本干预模式行之有效 ,简便易行 ,便于推广 。
- 郭亦寿龚瑶琴郭辰虹陈丙玺刘奇迹李江夏高贵敏周海斌
- 关键词：畸形先天素质干预模式人口素质
