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汪琳: 作品数：76 被引量：265H指数：7; 供职机构：北京出入境检验检疫局更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技重大专项国家高技术研究发展计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程医药卫生更多>>

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禽流感免疫噬菌体抗体库构建及ELISA检测方法的建立: 2012年; 本研究应用噬菌体抗体库技术筛选禽流感亚型病毒Fab抗体,并建立相应ELISA检测方法。用禽流感亚型混合疫苗免疫小鼠,取其脾脏提取总RNA用于扩增免疫球蛋白轻链和重链基因,克隆至噬菌粒pComb3,然后转化入感受态细胞XL1-Blue中,以1012 CFU辅助噬菌体VCSM13进行感染后,获得Fab抗体库容量为8×107 CFU。以H5N1病毒为抗原进行4轮亲和筛选,获得特异性结合的克隆,利用获得的特异性克隆进行ELISA检测方法的建立。; 邢佑尚汪琳张灿赵胤泽栢亚铎吴亚琼李玉欣; 关键词：禽流感病毒噬菌体抗体库

应用基因芯片检测烟草脆裂病毒被引量：7: 2007年; Total RNA in tulips was extracted by Trizol method.Primers were designed according to the sequences of Tobacco rattle virus and 18S rRNA gene of plant.The corresponding sections were amplified by RT-PCR and the PCR products were labeled by Cy3-dCTP.The probes of plant virus,18S rRNA gene and comparisons were designed and immobilized on chips.Labeled PCR products were hybridized with the probes and the signals were scanned by scanner and analyzed by GenePix Pro 4.0 software.Tobacco rattle virus was detected from tulips which were imported from Holand.The accuracy and sensitivity of the plant virus gene chip were proved.; 马新颖汪琳任鲁风邓丛良高文娜汪万春周琦; 关键词：基因芯片烟草脆裂病毒有害生物检疫

阪崎肠杆菌单克隆抗体制备及ELISA检测方法的建立被引量：7: 2013年; 试验旨在制备抗阪崎肠杆菌的单克隆抗体,初步建立其ELISA检测方法。以灭活的阪崎肠杆菌全菌体为抗原免疫BALB/c小鼠,筛选血清效价高的小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,制备杂交瘤细胞,并用间接ELISA法选取阳性杂交瘤细胞,扩大培养后测定单克隆抗体的效价,进行特异性及抗体间的配对,使用mAb亚类检测试剂盒鉴定单克隆抗体的亚型,并利用得到的抗体建立双抗体夹心ELISA检测方法。本试验得到3株具有良好特异性能稳定分泌单克隆抗体的阳性细胞株5C10、2B6和Ab02,经两两配对,据阳性D450nm值及P/N值选择1∶20000稀释的5C10作为包被抗体,1∶40000稀释的Ab02作为酶标二抗,建立ELISA检测法,应用建立的方法与荧光定量PCR方法检测动物实验室保存的20份进出口送检奶粉样品,结果显示试验结果一致。本试验成功制备阪崎肠杆菌的单克隆抗体并建立其ELISA检测法,为大批量快速检测阪崎杆菌奠定了基础。; 汪琳李勐伟刑佑尚柏亚铎尹羿蒲静乔彩霞高志强魏学良李朝明李琴; 关键词：阪崎肠杆菌单克隆抗体杂交瘤细胞 ELISA检测

荧光RT-PCR检测活禽和禽组织中禽流感病毒的研究被引量：41: 2004年; 本研究根据A型流感病毒的核酸保守区共有序列 ,开发、设计多条引物和探针序列 ,从中筛选敏感、特异的引物、探针 ,在循环参数、病毒核酸提取方法及逆转录条件优化的基础上 ,建立了快速的通用型“一步法”检测活禽或禽产品中所有A型禽流感病毒的荧光RT -PCR检测技术。该方法敏感性高、特异性强 ,与国际标准方法———世界动物卫生组织 (OIE)确定的鸡胚病毒分离相比 ,敏感性基本一致 ,可直接用来检测咽喉 /泄殖腔拭子和禽肉中的禽流感病毒 ,将检测时间从原来最短所需要的 2 1d缩短为 4h。; 张鹤晓赖平安刘环刘继红郭晋优谷强张利峰汪琳段生涛张向东朱文斯杨伟黄茜华赖少梅李宁; 关键词：荧光RT-PCR 禽流感病毒血凝素神经氨酸酶

非洲马瘟病毒VP7基因拼接、表达及重组ELISA方法的建立与初步应用被引量：10: 2008年; 采用人工拼接的方式拼接了非洲马瘟病毒(AHSV)含有绝大多数线性抗原表位的VP7编码基因片段,克隆于pET-30a构建重组质粒pET-30a-VP7,将pET-30a-VP7转化BL21(DE3),经1.0 mmol/L IPTG诱导,外源基因以包涵体的形式获得高效表达。通过Dot-ELISA以及ELISA试验证明表达产物具有良好的反应原性。以纯化后表达产物作为诊断抗原包被酶标板建立了检测AHSV抗体的间接ELISA方法。结果表明,抗原的最佳包被浓度为0.25μg/mL,血清的最佳稀释度为1∶40,待检血清阳性临界值初步定为0.25。用此方法和商品化ELISA试剂盒检测了184份血清样品,结果完全符合。; 高志强张鹤晓赖平安谷强蒲静汪琳乔彩霞吴丹柏亚铎张伟; 关键词：非洲马瘟基因拼接

双重实时荧光PCR定量检测动物产品中牛源性成分被引量：4: 2018年; 旨在建立一种定量检测动物产品中牛源性成分含量的双重实时荧光PCR方法。以牛卫星IV DNA为检测靶基因,以肌肉生长抑制素基因作为内对照合成引物探针,采用基于TaqMan的双重实时荧光PCR技术对已知牛肉添加比例的冻干混合肉粉标准品进行检测并建立线性模型,并应用模拟样品和送检样品进行了验证检测。结果显示,该方法可检出牛源成分含量为0.1%的冻干肉粉,不与其他种动物组织发生交叉反应,重复性试验的相对标准偏差小于5%,方法的扩增效率为93.6%。该方法适用于肉品中牛源性成分的定量检测,可用于测定市场上动物产品中的牛源性成分含量。; 高志强汪琳蒲静尹羿张伟赵相鹏姚震宇

国礼动物变化趋势及检疫监管被引量：1: 2017年; 为了解国礼动物发展现状,给优化检疫管理政策提供支持,本文梳理了自1949年以来我国接收国礼动物和作为国礼走出国门的年代、动物物种及赠送和受赠国家等情况,阐述了动物作为国礼的原因、变化趋势,分析了其在政治、运输饲养、疫病传播等方面存在的风险,提出了通过部门协作、通关运输、隔离检疫、饲养与治疗、防疫消毒、信息沟通、应急处置等措施,来提升对国礼动物监管水平的建议。; 齐玮汪琳李迪赵相鹏任丛丛任彤张伟蒲静高志强尹羿; 关键词：检疫监管疫病防控

生命探测技术在口岸动物搜检中的应用分析被引量：3: 2017年; 为了探索、发展现场高效的活动物搜检技术,对现有红外生命探测仪、音频生命探测仪、电磁波生命探测仪、二氧化碳探测仪、光学探测仪、雷达生命探测仪等6种生命检测技术进行综述比较,分析在国境口岸违禁动物搜检中应用生命检测技术的可能性。; 王梓乐汪琳洪炜赵中权赵相鹏蒲静高志强张伟夏云成

实验室质量控制关键要素管理系统的建立与运行被引量：1: 2014年; 利用RFID等现代信息化技术,以"人、机、样、法、溯"为关键要素,建立人员、设备、样品、方法、试剂等数据库,开发相应管理和溯源软件,搭建动物检疫实验室质量控制关键要素管理系统并运行,提高实验室管理工作效率并有效地节约成本。本文阐述了系统核心技术的实现方法。; 张玉红韩瑞徐慧芳秦奕尹羿柏亚铎蒲静乌日古玛拉李江宇汪琳; 关键词：实验室 BS架构