王茂鑫
- 作品数：5 被引量：21H指数：3
- 供职机构：解放军白求恩国际和平医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金吴阶平医学基金会临床科研专项资助基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肿瘤干细胞及其在肿瘤放疗抵抗中的作用
- 2012年
- 肿瘤干细胞是决定肿瘤形成及转移的细胞群，它能发展成为由新的肿瘤干细胞和非致瘤性普通肿瘤细胞组成的肿瘤组织。肿瘤干细胞可能在肿瘤的形成、生长、浸润、转移及复发中起着关键性作用。本文就肿瘤干细胞的起源、免疫表型、龛、放疗抵抗及低氧在其放疗抵抗中的作用等方面的研究进展做一综述。
- 王茂鑫李晓明
- 关键词：STEM
- 低氧对Hep-2细胞肿瘤干细胞特性和化疗抵抗的影响及其作用机制被引量：8
- 2012年
- 目的探讨低氧对Hep-2细胞肿瘤干细胞特性和化疗抵抗的影响，并分析其相关机制。方法构建针对低氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor 1 apha，HIF-1d）的短发夹RNA重组质粒，转染Hep-2细胞，经筛选建立HIF-1仪基因敲除的Hep-2细胞并检测HIF-1α表达的变化；观察低氧条件培养的Hep-2细胞增殖、克隆形成、细胞周期、凋亡及CD133表型等细胞生理学特性变化；流式细胞仪分选CD133^＋细胞，观察CD133^＋细胞克隆形成及顺铂杀伤情况，并检测相关基因Oct-4、p53及survivin表达变化。用方差分析及两样本均数比较的#检验进行统计分析。结果成功建立HIF—lct基因敲除Hep一2细胞，HIF一1仪在mRNA和蛋白水平上的表达明显下调；低氧培养Hep-2细胞具有较高的增殖活性及克隆形成能力，凋亡率降低，细胞周期GO／G1期阻滞、CD133表达升高，而HIF-1α仪基因敲除后上述变化减弱；成功分选出Hep-2细胞中的CD133^＋细胞，CD133^＋细胞克隆形成能力高、顺铂杀伤抗性强，而HIF-1α基因敲除后上述能力降低，并出现Oct-4表达下调，p53表达上调，survivin表达下调。结论低氧能够诱导和强化Hep-2细胞的肿瘤干细胞特性，增强CD133^＋细胞的增殖分化和化疗抵抗能力，其作用机制可能与HIF-1α及其诱导的相关基因表达变化相关。
- 屈永涛李晓明徐鸥王茂鑫路秀英
- 关键词：低氧诱导因子1
- 组织缺氧诱导因子-1α及相关靶基因在喉鳞状细胞癌组织中的表达被引量：5
- 2012年
- 目的检测喉鳞状细胞癌（简称鳞癌）组织缺氧诱导因子-1α（hypoxia inducible factor 1 alpha，HIF-1α）、葡萄糖转运蛋白-1（glucose transporter protein-1，GLUT-1）、血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）的蛋白表达情况，并通过体外实验进一步验证低氧对喉鳞癌细胞HIF—1α及其下游靶基因GLUT-1、VEGF的表达上调方面的重要促进作用。方法采用SP免疫组织化学和免疫细胞化学方法检测喉鳞癌组织和Hep-2细胞中HIF-1α、GLUT-1、VEGF蛋白的表达，分析HIF-1α与GLUT—1、VEGF表达的相关性。结果35例喉癌患者组织切片中16例HIF-1α表达阳性（45．7％），16例GLUT-1表达阳性（阳性率45．7％），19例VEGF表达阳性（阳性率54．3％）。HIF-1α和VEGF的表达水平与喉癌病理分级和淋巴转移有关（P值均〈0．05）；GLUT-1表达水平与淋巴转移有关（P〈0．05）。体外实验结果显示，Hep-2细胞在低氧条件下HIF-1α、GLUT-1、VEGF的蛋白表达明显增加（P值均〈0．05）。结论HIF-1α可作为转录调控因子参与调控GLUT-1、VEGF的表达，进而在喉癌的发生、侵袭、转移过程中发挥重要作用。
- 徐鸥李晓明王茂鑫屈永涛路秀英单春光孙庆佳
- 关键词：喉肿瘤缺氧诱导因子1,Α亚基
- 肿瘤干细胞在低氧介导的喉癌放疗抵抗中的作用的初步观察
- 2011年
- 目的:观察体外低氧和常氧培养条件下喉癌Hep-2细胞系在放疗前后CD133+细胞比例及生长抑制率的变化,探讨肿瘤干细胞在低氧介导的喉癌放疗抵抗中的作用。方法:体外常氧和低氧环境下培养人喉癌Hep-2细胞,用western blot检测HIF-1α的表达。细胞汇合约80%左右时后分别给予0、5、10、15、20Gy的60 Co照射,检测各组细胞放疗后不同时间细胞生长抑制率和CD133+细胞比例的变化。结果:低氧和常氧条件下,Hep-2细胞放疗后24h细胞增殖抑制率达到高峰,并随放疗剂量的增加而增加。常氧组各个剂量和时间点的生长抑制率均高于低氧组,24h、10Gy时差异最大,有统计学意义(P<0.05)。放疗后CD133+细胞低氧和常氧组均有不同程度的富集,低氧组在各个剂量和时间点的CD133+细胞比例均高于常氧组,24h、10Gy时差异最大,有统计学意义(P<0.05)。结论:喉癌干细胞在低氧介导的喉癌放疗抵抗中有重要作用,并提示阻断低氧因素可能会增强喉癌的放疗敏感性。
- 王茂鑫李晓明路秀英屈永涛徐鸥孙庆佳
- 关键词：低氧诱导因子CD133肿瘤干细胞
- 喉癌干细胞在低氧介导的喉癌放疗抵抗中的作用机制被引量：10
- 2011年
- 目的 体外观察低氧和常氧培养条件下喉癌CD133＋细胞放疗后生长抑制率、克隆形成率的变化和DNA依赖蛋白激酶催化亚单位（DNA dependent protein kinase catalytic subunit, DNA-PKcs）、共济失调毛细血管扩张症突变基因（ataxiatelangiectasia mutate,ATM）、Survivin、P53的表达,探讨肿瘤干细胞在低氧介导的喉癌放疗抵抗中的作用机制.方法 体外培养人喉癌Hep-2细胞,用流式细胞仪分选出CD133＋细胞,并分别在低氧和常氧条件下行无血清培养,流式细胞仪检测缺氧诱导因子-1α的表达.低氧组和常氧组分别用直线加速器给予0、5、10、15、20Gy的照射,24h后行四甲基偶氮唑蓝（MTT）检测；给予10 Gy照射后12、24、36、48 h行MTT检测.行软琼脂克隆形成实验,并给予10 Gy照射,14 d后观察低氧和常氧组克隆形成率.两组细胞分别给予10 Gy照射,24h后用流式细胞仪分别检测DNA-PKcs、ATM、Survivin、P53的表达.结果 流式细胞仪分选后获得CD133＋细胞纯度是92.8％,CD133＋细胞常氧组各个剂量和时间点的生长抑制率均高于低氧组；在低氧和常氧条件下,CD133＋细胞放疗后生长抑制率随放疗剂量的增加而增加,而10 Gy放疗后各个时间点细胞生长抑制率变化不大,24h时差异最大,具有统计学意义（t=6.12,P均＜0.05）.软琼脂克隆形成实验显示CD133＋细胞克隆形成率明显高于CD133-的对照组（P＜0.01）,CD133＋细胞低氧组的克隆形成率明显高于常氧组（P＜0.05）.放疗前后低氧组克隆形成率变化不明显,而常氧组放疗后克隆形成率较放疗前低（P＜0.05）.CD133＋细胞的DNA-PKcs、ATM、Survivin和P53的表达均高于CD133-细胞（P＜0.01）.放疗后两组细胞各种蛋白表达均高于放疗前（P＜0.01）,低氧组放疗后DNA-PKcs、Survivin表达均较常氧组高（P＜0.05）,而ATM、P53表达差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 喉癌干细胞在低氧介导的喉癌放疗抵抗中有重�
- 王茂鑫李晓明赵勇路秀英屈永涛徐鸥孙庆佳
- 关键词：肿瘤干细胞喉肿瘤细胞低氧缺氧诱导因子1,Α亚基
