陈滢
- 作品数：13 被引量：9H指数：2
- 供职机构：安徽医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 与14-3-3ζ相互作用的蛋白Polo样激酶1的筛选与鉴定
- 2012年
- 目的:应用酵母双杂交系统筛选与14-3-3ζ相互作用的蛋白,进一步鉴定其与Polo样激酶1(Plk1)相互作用。方法:构建pGBKT7-14-3-3ζ诱饵表达载体,筛选HeLa细胞cDNA文库中与14-3-3ζ相互作用蛋白,进一步通过共转酵母、免疫荧光以及外源性和内源性的细胞免疫共沉淀实验验证两者的相互作用。结果:通过酵母双杂交系统筛选出的阳性相互作用蛋白中包括Plk1,进一步通过共转酵母,外源性和内源性的细胞免疫共沉淀实验证实两者的相互作用,免疫荧光实验证实两者共定位于有丝分裂过程中胞质分裂期的中体。结论:Plk1是高度保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,在中体的成熟,有丝分裂期染色体的分离,胞质分裂以及DNA的损伤应答等环节发挥重要作用,其与14-3-3ζ的相互作用为14-3-3蛋白家族参与有丝分裂(M期)的调控提供了直接证据。
- 都建程里陈立建陈滢安然
- 关键词：POLO样激酶1酵母双杂交蛋白质相互作用有丝分裂
- 泛素连接酶RNF2通过与MANF相互作用改善脑缺血诱导的神经元损伤
- 目的 证明泛素连接酶RNF2 与中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)的相互作用及其对缺血性脑损失的保护作用。方法 用酵母双杂交系统筛选与MANF相互作用的蛋白;用Co-IP、Pull-down 及免疫荧光双标等方...
- 沈玉君陈滢杨文沈玉先
- 关键词：神经营养因子脑缺血
- 一种预防弓形虫病的ME49Δcdpk3减毒活疫苗及其制备方法和应用
- 本发明涉及弓形虫疫苗技术领域，具体来说是一种用于预防弓形虫病的ME49Δcdpk3减毒活疫苗，减毒活疫苗是通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术在ME49上敲除CDPK3构建的ME49Δcdpk3虫株，减毒活疫的制...
- 都建吴敏敏蔡海建安然陈滢周南
- 文献传递
- 一种预防弓形虫病的ME49Δcdpk3减毒活疫苗及其制备方法和应用
- 本发明涉及弓形虫疫苗技术领域，具体来说是一种用于预防弓形虫病的ME49Δcdpk3减毒活疫苗，减毒活疫苗是通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术在ME49上敲除CDPK3构建的ME49Δcdpk3虫株，减毒活疫的制...
- 都建吴敏敏蔡海建安然陈滢周南
- 微信公众号辅助大学《妇产科护理学》教学——“母乳喂养”微信公众号的开发
- 2019年
- 在"互联网+"教育背景下,随着微信公众号的移动学习平台逐渐火热,它颠覆了传统的线下课程,为移动学习提供了全新的平台。针对《妇产科护理学》教学出现的问题,本文提出了开发"母乳喂养"微信公众号辅助课程教学,旨在扩充学生的课外知识,巩固教学的重点和难点,从而提高教学效率。
- 陈滢
- 关键词：《妇产科护理学》母乳喂养辅助教学
- 中脑星形胶质细胞源性神经营养因子在治疗溃疡性结肠炎中的应用
- 本发明公开了中脑星形胶质细胞源性神经营养因子在治疗溃疡性结肠炎中的应用。本发明研究发现了MANF在人溃疡性结肠炎患者以及小鼠溃疡性结肠炎模型中表达上调，说明MANF在溃疡性结肠炎中表达增加。本发明通过动物实验表明，MAN...
- 沈玉先杨琳邵伟陈滢沈玉君
- MANF对内质网应激诱导的细胞凋亡的保护作用被引量：5
- 2013年
- 目的构建中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)基因真核表达质粒并转染小鼠神经瘤细胞系(N2A),建立稳定表达MANF的细胞系,并观察MANF对内质网(ER)应激诱导细胞凋亡的影响。方法将MANF基因克隆至pEGFP-C2载体中,经酶切、聚合酶链式反应(PCR)、测序检测其构建的正确性,脂质体转染法将重组质粒转染入N2A细胞,经G418(500μg/ml)连续筛选,获得稳定表达MANF的神经细胞系。细胞免疫荧光法观察MANF的定位,蛋白质印迹法(Western blot)和反转录PCR法(RT-PCR)鉴定稳转细胞系中MANF的蛋白和基因表达水平。在稳定转染细胞系中,分别用4μg/ml衣霉素(TM)处理16 h和10μmol/Lβ淀粉样蛋白(Aβ)处理24 h诱导ER应激,Western blot法检测CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)的表达和Caspase-3的激活情况。结果构建的pEGFP-C2-MANF质粒经酶切测序等鉴定确定构建成功,经G418抗性筛选出稳定转染MANF的N2A细胞系,RT-PCR、Western blot和细胞免疫荧光法证明稳转细胞中MANF的基因和蛋白水平均高表达,并且MANF的细胞定位准确。诱导ER应激后,MANF能显著抑制CHOP的表达和Caspase-3的激活。结论成功建立稳定表达MANF的神经细胞系,并且发现MANF可以抑制ER应激诱导的神经细胞凋亡。
- 陈滢李成锦杨文程里安然都建沈玉君冯利杰沈玉先
- 关键词：转染内质神经保护
- 一种预防人和动物弓形虫病的蛋白混合疫苗
- 本发明公开了一种预防人和动物弓形虫病的混合蛋白疫苗。本发明所要保护的一个技术方案是一种免疫原性组合物，所述组合物的活性成分为弓形虫重组蛋白14‑3‑3、MIF和CDPK3组成的重组蛋白混合物。本发明的实施例中将弓形虫重组...
- 都建安然陈滢温红阳吴敏敏闫奇
- 酵母双杂交筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白被引量：4
- 2013年
- 目的利用酵母双杂交方法,筛选与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的宿主蛋白。方法 RT-PCR扩增弓形虫RH株速殖子ROP18基因片段,扩增产物经双酶切后插入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中,将重组质粒导入酵母AH109菌株中,检测诱饵载体有无毒性和自激活作用,利用酵母双杂交系统从人胚胎脑cDNA文库中筛选与ROP18相互作用的宿主蛋白。结果构建了诱饵载体pGBKT7-ROP18,ROP18具有自激活功能。用ROP18^(25-25lan)为诱饵,筛选获得一系列与ROP18相互作用的宿主蛋白:DNA损伤特异性结合蛋白1(DDB1)、torsin A相互作用蛋白1(TOR1AIP1)、整联蛋白β1(integrinβ1)、溶质运载蛋白3(SLC3A2)、酪氨酸硫化转移酶2(TPST2)、Derl样域家族成员2(DERL2)和OCIA结构域蛋白1(OCIAD1)。结论通过酵母双杂交技术筛选出与弓形虫毒力因子ROP18相互作用的多种宿主蛋白。
- 都建安然程里陈滢沈继龙
- 关键词：弓形虫酵母双杂交相互作用宿主蛋白
- 泛素连接酶RNF2与MANF的相互作用及其神经保护作用
- 中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(mesencephalicastrocyte-derivedneurotrophicfactor,MANF)是一种分泌性蛋白,在内质网应激(Endoplasmicreticulumstr...
- 陈滢
- 关键词：神经营养因子酵母双杂交技术神经保护作用泛素连接酶
- 文献传递
