蔡伟
- 作品数：27 被引量：39H指数：6
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 水仙退化病毒巢式RT-PCR检测试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种水仙退化病毒巢式RT-PCR检测试剂盒及其检测方法，专用于水仙退化病毒的检测。该试剂盒包括：外侧正向引物、外侧反向引物、内侧正向引物、内侧反向引物、RT Buffer、RNA酶抑制因子、反转录酶、dNTPs...
- 沈建国蔡伟金晶廖富荣高芳銮林双庆
- 文献传递
- 水仙迟季黄化病毒检测试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种水仙迟季黄化病毒检测试剂盒及其检测方法，专用于水仙迟季黄化病毒的检测。该试剂盒包括：外侧上游引物、外侧下游引物、内侧上游引物、内侧下游引物、RTBuffer、RNA酶抑制因子、反转录酶、dNTPs、PCR ...
- 沈建国于文涛黄振廖富荣蔡伟林双庆
- TC/IC-RT-PCR检测黄瓜绿斑驳花叶病毒被引量：6
- 2012年
- 根据GenBank上登录的黄瓜绿斑驳花叶病毒(CGMMV)外壳蛋白基因保守序列,设计特异性引物,利用试管捕捉RT-PCR(TC-RT-PCR)和免疫捕捉RT-PCR(IC-RT-PCR)技术对黄瓜绿斑驳花叶病毒进行检测.结果表明,TC-RT-PCR和IC-RT-PCR均具有良好的特异性,检测灵敏度分别比DAS-ELISA高10和100倍;通过对一批进境黄瓜样品的检测,验证了2种检测技术的实际应用效果.因此,本研究建立的TC-RT-PCR和IC-RT-PCR检测技术,可有效应用于CGMMV的快速检测.
- 沈建国林双庆蔡伟李海明王念武翁瑞泉黄可辉
- 关键词：黄瓜绿斑驳花叶病毒
- 美人蕉黄斑驳病毒荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种美人蕉黄斑驳病毒荧光定量PCR检测试剂盒及其检测方法，专用于美人蕉黄斑驳病毒的检测。该试剂盒包括：正向引物、反向引物、荧光探针、TaqMan PCR Master Mix、阳性对照、阴性对照和ddH<Sub...
- 沈建国李敏张总泽蔡伟廖富荣
- 文献传递
- 水稻瘤矮病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种水稻瘤矮病毒荧光定量RT-PCR检测试剂盒及其检测方法，专用于水稻瘤矮病毒的检测。该试剂盒包括：反转录酶、RNA酶抑制剂、5×RT Buffer、dNTPs、2×Buffer、正向引物、反向引物、荧光探针、...
- 沈建国高芳銮蔡伟闫诚
- 文献传递
- 美人蕉黄斑驳病毒巢式PCR检测试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种美人蕉黄斑驳病毒巢式PCR检测试剂盒及其检测方法，专用于美人蕉黄斑驳病毒的检测。该试剂盒包括：外侧上游引物、外侧下游引物、内侧上游引物、内侧下游引物、PCR Buffer、dNTPs、Mgcl<Sub>2<...
- 沈建国虞赟蔡伟陈智明张永江闫诚
- 文献传递
- 进境大豆种子上菜豆荚斑驳病毒和大豆花叶病毒的多重RT-PCR检测被引量：14
- 2016年
- 【目的】针对进境大豆种子上症状相似的菜豆荚斑驳病毒(Bean pod mottle virus,BPMV)和大豆花叶病毒(Soybean mosaic virus,SMV),建立同时快速检测2种病毒的多重RT-PCR技术。【方法】根据GenBank公布的BPMV、SMV外壳蛋白基因序列,设计2对特异性引物,以复合感染BPMV、SMV的大豆种子为材料,提取dsRNA作为模板进行多重RT-PCR的引物浓度、退火温度和循环数的优化。利用优化建立的多重RT-PCR方法分别对健康大豆种子、BPMV、SMV及2种病毒复合感染的大豆种子进行检测,测定该方法的特异性。利用健康大豆种子提取的dsRNA,将从复合侵染BPMV、SMV大豆种子中提取的dsRNA按10倍梯度稀释,依次稀释为原液的10^(-1)、10^(-2)、10^(-3)、10^(-4).10^(-5)和10^(-6)倍作为模板,分别进行多重RT-PCR和单一RT-PCR扩增,测定灵敏度。多重RT-PCR扩增产物回收纯化后,连接于pMD18-T载体,进行克隆测序和序列比对,进一步验证该方法的可靠性。应用建立的多重RT-PCR方法对来自于美国、阿根廷、中国和巴西的疑似带病大豆种子进行检测,同时以单一RT-PCR检测进行验证。以BPMV、SMV抗体等体积混合液包被PCR管后再加入样品提取液或直接以样品提取液包被PCR管,将免疫捕获、试管捕捉和多重RT-PCR相结合,建立同时检测BPMV、SMV的多重一步IC-RT-PCR、多重一步TC-RT-PCR方法。【结果】多重RT-PCR的优化结果显示,最佳引物浓度为BPMV 0.4μmol·L^(-1)、SMV 0.4μmol·L^(-1),最佳退火温度为52℃,最佳循环数为35。特异性测定结果表明,多重RT-PCR能够从复合感染BPMV、SMV的大豆种子上同时扩增到大小约542、221 by特异性目的条带,从单一感染BPMV的大豆种子上扩增到大小约542 by特异性目的条带,从单一感染SMV的大豆种子上扩增到大小约221 by特异性目的条带,而从健康大豆种子材料上未扩增出任何特异性条带。灵敏度测定结果表明,当dsRNA原液稀释至10^(-3)倍�
- 沈建国高芳銮蔡伟金晶廖富荣吴祖建
- 关键词：菜豆荚斑驳病毒大豆花叶病毒多重RT-PCR双链RNA
- 美人蕉黄斑驳病毒巢式PCR检测试剂盒及其检测方法
- 本发明涉及一种美人蕉黄斑驳病毒巢式PCR检测试剂盒及其检测方法，专用于美人蕉黄斑驳病毒的检测。该试剂盒包括：外侧上游引物、外侧下游引物、内侧上游引物、内侧下游引物、PCR Buffer、dNTPs、Mgcl<Sub>2<...
- 沈建国虞赟蔡伟陈智明张永江闫诚
- 全基因组序列的系统发育与重组分析鉴定我国马铃薯Y病毒株系被引量：8
- 2017年
- 为明确我国马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)株系组成及其在不同寄主上的分布特征,文章对31条PVY中国分离物的基因组编码区进行了系统发育及重组分析。系统发育分析结果显示,最大似然法(maximum likelihood,ML)和邻接法(neighbor-joining,NJ)重建的系统发育拓扑结构基本一致,GF_YL20、FZ10、DF、SD1、1116和9703-3等6个分离物均未与已知株系相聚,其他株系来源相同的分离物以较高的自展值相聚成簇,显示出较强的株系特异性。重组分析显示,31个PVY分离物中,共有28个PVY分离物均检测到具有显著的重组信号,这些分离物主要包括PVY^(N-Wi)、PVY^(NTN)和PVY^(NTN-NW)三种株系。进一步分析显示,分离物1104、DF、SD1、1116和9703-3为未报道过的PVY新重组分离物。株系统计结果显示PVY重组株系已上升为优势株系,生产上需要密切注意这些株系,尤其新重组分离物的发展动态。以上结果表明,综合应用PVY全基因组序列的系统发育和重组分析,可以实现PVY株系的准确鉴定。
- 蔡伟杨宏凯沈建国邹文超高芳銮
- 关键词：马铃薯Y病毒系统发育分析株系鉴定
- 应用RT-PCR检测水仙潜隐病毒被引量：6
- 2012年
- 根据已报道的水仙潜隐病毒(Narcissus latent virus,NLV)外壳蛋白(Coat protein,CP)基因序列,设计一对特异性引物,以提取的水仙样品总RNA为模板进行RT-PCR,并进行特异性和灵敏度测定。结果表明,此法能够从携带NLV的水仙样品中成功扩增出大小约829 bp的特异性目的片段,具有良好的特异性和较高的灵敏度,可有效地应用于水仙样品中NLV的检测。
- 沈建国高芳銮虞赟蔡伟李敏于文涛廖富荣
- 关键词：RT-PCR
