赵忠鹏
- 作品数：65 被引量：252H指数：10
- 供职机构：病原微生物生物安全国家重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学轻工技术与工程更多>>
- 犬细小病毒核酸疫苗、重组活载体疫苗与弱毒疫苗免疫犬实验研究被引量：9
- 2008年
- 分别用犬细小病毒(CPV)核酸疫苗(pVCPV-VP2)、CPV重组活载体疫苗(CAV2/CPV)与CPV弱毒疫苗对犬进行了免疫试验,以检测不同CPV疫苗的免疫原性。采用CPV ELISA、CPV HI与CPV微量中和试验检测免疫犬的体液免疫水平,采用淋巴细胞转化试验检测犬的细胞免疫水平。结果,pVCPV-VP2和CAV2/CPV均能诱导机体产生抗CPV ELISA抗体与抗CPV中和抗体,但是pVCPV-VP2不能诱导机体产生可检测的抗CPV HI抗体,而CAV2/CPV能够诱导机体产生抗CPV HI抗体。淋巴细胞转化试验结果,pVCPV-VP2和CAV2/CPV免疫犬的外周血淋巴细胞对ConA与CPV的刺激均出现明显的增殖反应。结果表明,pVCPV-VP2和CAV2/CPV免疫犬均能诱导机体产生抗CPV的特异性体液免疫反应和细胞免疫反应,两者所表达的VP2蛋白均具有较好的免疫原性。CAV2/CPV以及pVCPV-VP2和CAV2/CPV联合免疫犬的抗CPV体液免疫水平和细胞免疫水平均比用pVCPV-VP2单独免疫犬的体液免疫水平和细胞免疫水平高。但CAV2/CPV诱导机体产生的抗CPV特异性免疫反应仍然比CPV弱毒疫苗诱导机体产生的抗CPV特异性免疫反应弱。另外,CAV2/CPV还能诱导机体产生抗CAV-2的特异性免疫反应。
- 谢之景杨松涛夏咸柱闫芳赵忠鹏高玉伟邹啸环黄耕
- 关键词：犬细小病毒核酸疫苗重组活载体疫苗
- 布鲁氏菌毒力、免疫相关分子的筛选研究
- 布鲁氏菌病(Brucellosis)(简称布病)是由布鲁氏菌(Brucella)引起的人畜共患传染病,在我国被列为二类传染病,是一种重要的生物战剂和生物恐怖剂。近年来,疫情反弹,死灰复燃,给畜牧业和人类健康带来严重危害。...
- 赵忠鹏
- 关键词：布鲁氏菌蛋白质组学新型疫苗双向电泳
- 犬细小病毒基因型的调查被引量：42
- 2004年
- 采用 PCR方法扩增了 13株犬细小病毒 ( canine parvovirus,CPV) VP2基因的 2个片段 ,通过序列测定和 DNAS-tar软件分析 ,结果显示 ,我国的 CPV分离株也存在基因变异现象 ,除发现 CPV- 2、CPV - 2 a、CPV- 2 b突变株外 ,还发现在 CPV- 2 a基础上进一步进化产生的 2个新的变异株。在我国 ,CPV- 2曾在 2 0世纪 80年代早期流行 ,但 1986年后分离到的 CPV以 CPV- 2 a为主 ,在 2 0 0 2年送检的 8份病料中分离到 4株 CPV- 2 a和 4株 CPV- 2 b。PV/貉 / CC/ 1/ 86在CPV- 2 a的基础上 VP2发生氨基酸 30 0 G→ S替换 ,PV/犬 / JL / 1/ 0 2在 CPV- 2 a的基础上 VP2发生氨基酸 5 6 4 S→ N替换 ,其确切的生物学意义尚不清楚。我国的 CPV分离株与参考毒株的核酸同源性超过 98% ,没有形成明显的中国CPV分支 。
- 谢之景夏咸柱扈荣良赵忠鹏高玉伟黄耕
- 关键词：犬细小病毒基因型进化
- 犬冠状病毒S蛋白主要抗原区基因片断的表达及免疫原性被引量：1
- 2004年
- 应用 Pichia pastoris 酵母表达了犬冠状病毒大熊猫野毒株(CCV DXMV) S 蛋白主要抗原区基因片断。用特异性引物扩增出 CCV DXMV 株 S1 基因片断,并将其克隆到 pGEM-T 载体中得到 pTS1。用 Kpn I 和 NotI 双酶切pTS1 回收目的基因 S1 定向克隆到 pPICZαA 中,构建出重组质粒 pPICZαAS1。将 pPICZαAS1 用 Sac I 内切酶线性化后,电转化感受态 GS115 酵母细胞,用 PCR 法筛选阳性重组子。用 1%的甲醇诱导重组酵母菌,取培养物上清进行重组蛋白的检测。结果重组酵母菌培养物上清用 SDS-PAGE 电泳可检测到相对分子量为 106kDa 大小的重组蛋白, Western-blot 证实该重组蛋白可以与 CCV 多克隆抗体发生特异性血清学反应。凝胶薄层扫描分析表明,3 株重组酵母菌在 1%甲醇诱导 144h 后,重组蛋白 S1 表达量约占培养物上清总蛋白量的 6.6-8.6%左右。用重组蛋白 S1 免疫 BALB/C 小鼠 3 次后,小鼠血清 CCV 中和抗体可达 1:8-1:16,表明重组 S1 蛋白具有一定的免疫原性。
- 乔军夏咸柱夏咸柱胡桂学杨松涛赵忠鹏谢之景
- 关键词：犬冠状病毒免疫原性
- 犬细小病毒基因型的调查研究
- 前言:犬细小病毒(canine parvovirus,CPV)是细小病毒科细小病毒属成员,主要引起犬的出血性肠炎和幼犬心肌炎;自1978年分离成功以来,已传遍所有养犬国家和地区,为了与犬极小病毒(MCV)相区别而命名为C...
- 谢之景夏咸柱扈荣良赵忠鹏高玉伟黄耕
- 文献传递
- 表达犬瘟热病毒H基因的重组犬2型腺病毒免疫原性测定被引量：4
- 2007年
- 为测定表达犬瘟热病毒(CDV)H基因的重组犬2型腺病毒(CAV-2/CDVLPH)免疫原性,25只45-50日龄犬(抗CDV中和抗体小于1∶2,CAV-2 HI抗体效价小于1∶2)随机分为5组进行免疫犬试验,第1组为CAV-2/CDVLPH免疫组,第2组为pVAXLPH免疫组,第3组为pVAXLPH和CAV-2/CDVLPH联合免疫组,CDV弱毒疫苗组和pVAX1空载体组分别作为阳性和阴性对照组。利用间接ELISA和CDV中和试验检测免疫犬的抗CDV体液免疫水平、CAV-2 HI试验检测免疫犬的抗CAV体液免疫水平、淋巴细胞转化试验检测免疫犬的抗CDV和抗CAV-2细胞免疫水平,分析CAV-2/CDVLPH的免疫性。结果,能够在各试验组免疫犬血清中检测到抗CDV ELISA抗体和抗CDV中和抗体,同时在第1组和第3组免疫犬的血清中检测到抗CAV-2的HI抗体,免疫犬的外周淋巴细胞对特异性和非特异性抗原刺激均有明显增殖,第2组的免疫应答水平低于第3组,第1组又高于第3组,但低于CDV弱毒疫苗免疫组,试验表明CAV-2/CDVLPH可同时诱导免疫犬产生抗CDV和CAV特异性免疫,CAV-2/CDVLPH与pVAXLPH相比能诱导犬产生较高的特异性免疫应答,然而低于CDV弱毒疫苗。
- 闫芳夏咸柱扈荣良谢之景赵忠鹏高玉伟黄耕
- 关键词：犬瘟热H基因
- 大熊猫血清犬冠状病毒的中和抗体调查(英文)被引量：2
- 2004年
- 本文为进一步了解犬冠状病毒在大熊猫群体中的感染情况,采用固定病毒(100 TCID50)-稀释血清法建立了检测大熊猫血清CCV抗体的微量中和试验。运用该方法测定了四川大熊猫保护区和动物园的62份大熊猫血清CCV中和抗体,以大于1:4抗体效价作为阳性判定标准,结果8份大熊猫血清为阳性,抗体滴度在1:8和1:32之间,阳性率达12.9%。这是首次比较全面地对大熊猫进行CCV中和抗体水平调查,结果表明: CCV感染在我国大熊猫群体中较为普遍,已给大熊猫的健康带来威胁。因此,有必要研制安全有效的疫苗以保护大熊猫的安全。表1参17。
- 乔军夏咸柱夏咸柱杨松涛胡桂学胡桂学高玉伟孙贺廷赵忠鹏谢之景闫芳贺文琦
- 关键词：大熊猫血清犬冠状病毒抗体疫苗
- A/California/07／2009亚型猪流感冷适应减毒疫苗株的拯救及免疫效果评价被引量：2
- 2010年
- 应用反向遗传学技术,选择冷适应、温度敏感、减毒的A/Ann Arbor/6/60 ca(H2N2)型流感病毒的6个内部基因为骨架,与A/California/07/2009株流感病毒2个抗原基因HA、NA分别克隆到polⅠ-polⅡ转录表达载体pAD3000中,构建8个转录表达载体重组质粒,共转染Vero细胞,获得重配A/California/07/2009ca株流感病毒.重配病毒的TCID50为7.5,病毒传4代后其血凝素(HA)滴度稳定在1∶256,半数感染剂量EID50为8,鸡胚传20代,经RT-PCR鉴定未发现重组病毒基因突变,电镜观察重配病毒符合流感病毒的主要特征;蔗糖纯化的病毒经肌肉注射(灭活)及滴鼻(减毒活病毒)两种途径免疫BALB/c小鼠,结果显示:滴鼻免疫和肌肉注射都可以产生较高效价的血凝抑制(HI)抗体,肌肉注射组产生的HI抗体略高(P=0.044),但肌肉注射组检测不到高效价IgA抗体;滴鼻免疫组鼻冲洗液中可以检测到高效价的IgA抗体,同型病毒感染后,IL-1β、TNFα、IFN-α等前炎因子分泌较早,且高于肌肉注射组(P<0.05),可见,喷鼻减毒疫苗比灭活全病毒疫苗能更好地激发黏膜免疫反应.通过对小鼠各个器官病毒载量的检测发现,4天后鼻腔、气管、脑、肺、脾脏没有病毒存在,证明减毒活疫苗株在小鼠上是安全的.以上数据可以初步断定,重组病毒有作疫苗候选株的可能,而且喷鼻疫苗具有降低免疫剂量、同时激活体内体液免疫和细胞免疫的功能.
- 段跃强罗德炎邢丽杨鹏辉赵忠鹏贾卫红李培锋王希良
- 甲壳胺对HepG2细胞蛋白酪氨酸激酶和磷酸酶活性的影响
- 2014年
- 目的:初步探讨甲壳胺诱导人肝癌Hep G2细胞凋亡的信号转导机制。方法:采用酶联免疫法,动态检测甲壳胺作用于Hep G2细胞后,细胞膜相及胞浆内的蛋白酪氨酸激酶(PTK)及蛋白酪氨酸磷酸酶(PTP)活性的变化。结果:甲壳胺可以抑制Hep G2细胞内的PTK活性,并呈一定的浓度依赖性;甲壳胺作用Hep G2细胞后,随着PTK活性的减弱,PTP的活性也短暂下降。结论:甲壳胺诱导Hep G2细胞凋亡时,涉及到PTK的活性改变。观察到膜相蛋白中PTK的活性改变早于胞浆蛋白,提示可能存在一个信号的跨膜转运过程;同时伴有PTP的活性变化,可能反映了胞内蛋白酪氨酸残基的磷酸化与去磷酸化即时调节机制。
- 赵丽艳赵忠鹏马守栋刘金凤李明春
- 关键词：甲壳胺HEPG2细胞信号转导磷酸化
- 壳聚糖黏膜佐剂促进黏膜免疫的研究进展被引量：2
- 2011年
- 近年来通过黏膜部位释放抗原物质的新型免疫方法受到了越来越多的关注,其中鼻腔免疫被认为是最有前景的给药途径,佐剂可以提高或优化对通过黏膜或系统途径接种抗原的免疫应答,新的黏膜佐剂和传递系统是疫苗领域的研究热点。本文就纳米载体-壳聚糖作为特殊的黏膜免疫佐剂和PEG交联壳聚糖季铵盐智能水凝胶体系作为新型的鼻腔免疫传递系统作一综述。
- 师秀敏赵忠鹏闫芳王希良
- 关键词：黏膜佐剂免疫
